宮頸上皮內瘤變及宮頸癌與人乳頭瘤病毒感染的關系探討

任守鳳

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，在女性惡性腫瘤中發病率僅次于乳腺癌，全球每年新發人數約四十七萬，死亡人數約二十三萬［1］。目前我國的宮頸癌發病呈總體下降但年輕患者增加的趨勢。分子流行病學研究已經證實：人乳頭瘤病毒(HPV)的感染與宮頸癌有著十分密切的關系。宮頸癌的篩查可以降低宮頸癌發生的危險，卻不能阻止HPV的感染。宮頸癌發病率高居女性惡性腫瘤榜首，人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染在宮頸癌發生及發展過程中起重要作用，與宮頸癌的發生有極為顯著的關連，90%以上宮頸癌伴有高危型HPV感染，高危型人乳頭瘤病毒持續感染是宮頸癌前病變和宮頸癌的重要發病誘因，HPV的感染發生先于宮頸癌，它是宮頸癌前病變和宮頸癌發生的必要生物學條件［2］。因此，本文采用雜交捕獲Ⅱ代方法，定量檢測宮頸上皮內瘤變及宮頸癌HPV DNA的負荷量，進一步探討HPV感染與宮頸癌前病變及宮頸癌的相關性，對于宮頸癌的預防及治療都有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2007年6月至2009年5月于本院就診的宮頸病變患者390例為研究對象，其中正常宮頸組織69例;宮頸上皮內瘤病變215例，其中CINⅠ69例，CINⅡ72例，CINⅢ74例;宮頸癌106例。

所選研究對象年齡均在25歲以上(25～65歲，平均年齡32.6歲)、有三年以上性生活史、無婦科病變手術史、無放化療病史。

1.2 方法 采用雜交捕獲Ⅱ代(hybrid captureII，HC2)方法，行高危型HPV DNA檢測，對HPV陽性者行陰道鏡下活檢，最終以組織病理學診斷為金標準。

1.2.1 HPVDNA檢測標本采集 ①采集標本前24 h內禁止性生活、陰道檢查、陰道灌洗及用藥，無陰道沖洗及陰道上藥。②用特制取材毛刷插人宮頸口內1～1.5 cm處，順時針或逆時針旋轉5圈，停留20 s采集宮頸脫落細胞。③將毛刷上的標本洗脫于有保存液的采集管中。

1.2.2 雜交捕獲實驗檢測方法 采用Digene公司提供的雜交捕獲Ⅱ代(HC2)HPV DNA檢測系統進行檢測，試劑采用Digene公司提供的高危型HPV DNA試劑盒，檢測探針包括13 種 HPV DNA 亞型，即 16，18，31，33，35，39，45，51，56，58，59，68 型。

1.2.3 陰道鏡下活檢查 對陰道鏡下有白色病變、鑲嵌、腺體開口、異型血管等可疑病變部位進行定點活檢，對鏡下正常者行常規移行帶區3，6，9，12四點活檢，活檢組織送病理。

1.2.4 結果判定 在DML2000系統上判讀，HPV DNA含量超過1 pg/ml即RLU/CO比值大于1為陽性，HPVDNA陽性病例與所檢病例的百分比;按HPV DNA含量分成5組，分別為：HPV ＜ 1、1≤HPV≤100、101≤HPV ≤500、501≤HPV ≤1 000、HPV ＞1 000［3］。

1.2.5 統計學方法 采用SPSS 14.0軟件進行統計學處理，各組間的比較采用χ2分析，P＜0.05差異有統計學意義。

2 結果

2.1 高危型HPV DNA在宮頸各實驗組中的檢出率 在宮頸正常組中的檢出率為31.83%，在CIN組中的檢出率為67.90%，在宮頸鱗癌組中的檢出率為97.17%。可見，高危型HPV檢出率隨著宮頸病變程度的加重而逐漸升高，三組間比較有統計學意義(P＜0.001)，詳見表1。

2.2 高危型HPV DNA在CIN各組的檢出率在CIN I組為46.78%，CINⅡ組為59.32%，CINⅢ組為96.01%。可見，高危型HPV DNA檢出率隨著CIN級別增高而增高，三組間比較有統計學意義(P＜0.001)，詳見表2。

表1 高危型HPV DNA在各組中的檢出率

表2 高危型HPV DNA在CIN各組中的檢出率

根據研究結果顯示：高危型HPV DNA在宮頸正常組、CIN組、宮頸癌三組間的檢出率比較有高度統計學意義(P＜0.001);高危型HPV DNA在CINI組、CINⅡ組、CINⅢ組三組間檢出率比較也有高度統計學意義(P＜0.001)。

3 討論

宮頸癌(Cervical cancer)是發生于子宮頸鱗狀上皮或腺上皮的一種癌。盡管宮頸癌的發生是多因素共同作用的結果，然而它的病因主要與高危型HPV感染有關。近40年由于宮頸細胞學篩查的普遍應用，使宮頸癌和癌前病變得以早期發現和治療，宮頸癌的發病率和死亡率已有明顯下降［4］。

HPV感染對于宮頸癌進展來說是一個必要但不是充分的前提條件。靈敏的HPV核酸檢測對于腫瘤進展的評估是非常有價值的。細胞涂片為ASC-US女性中，如果HPV核酸檢測為陰性，腫瘤進展的危險性則非常低。一般而言，這類女性應半年或更短的間隔重復進行宮頸細胞學檢查。持續的HPV感染是CIN2以及CIN3進展的分子標記。與其他HPV型別相比，HPV16感染持續更長的時間，連續5年的持續感染對于CIN3形成來說具有40%的風險。曾經認為較早開始性生活史以及多性伴史等是CIN2或CIN3以及宮頸癌進展的高危因素，現在則必須把這一概念轉變成：持續的高危型HPV感染是最重要的危險因子。CIN3即是腫瘤的起始點。CIN2可以代表帶有HPV感染的嚴重的細胞學變化，這里的HPV感染可以最終消退，也可以持續以形成疾病進展。CIN3女性人群中的中值年齡為27～30歲，20～25歲以下女性具有較快的CIN2以及CIN3的進展，經常是HPV新發感染后幾個月就可以形成。宮頸篩查中檢出的浸潤癌女性的年齡比CIN2女性高出10年或更多［5］。

2006年和2007年默沙東以及葛蘭素史克的HPV預防性疫苗先后上市，開啟了人類主動預防常見腫瘤的時代。但同時HPV預防性疫苗的安全性問題一直受到廣泛的關注。應該指出，即使將來我們可以使用HPV的預防性疫苗和治療性疫苗，疫苗免疫策略無法替代宮頸癌的早期篩查措施［5］。本文提示HPV陽性患者，宮頸上皮內瘤變患病率明顯高于普通人群，故對于高危型HPV感染者，應定期隨訪，并盡量行陰道鏡檢查［6］。

［1］Andrawiss M1．Cervical cancer vaccines available in 2007.1 drug DiscovToday，2005，10(14) ：9492-9501．

［2］Papillo JI，Zarka MA，St John TL.Evaluation of the thinPrepPap test in clinical practice：A seven month 163142 case experience in northern Vermont.，Acia Cytol，1998，42(1)：203-208．

［3］黃志宏，等.人乳頭狀瘤病毒負荷量與宮頸癌及宮頸癌前病變的相關研究．中國婦幼保健，2006，21(11)：1557-1559．

［4］樂杰．宮頸癌．婦產科學.第7版．北京：人民衛生出版社，2008，1：263．

［5］廖秦平，劉朝暉，等．宮頸人乳頭瘤病毒感染及相關疾病的診治．中國宮頸感染性疾病診治策略，2009，2：17-19．

［6］龍再秋，賈海清，等.高危性人乳頭瘤病毒陽性臨床意義探討.中國實用婦科與產科雜志，2009，25(11)：868．