手足口病患兒細胞免疫功能的改變及其臨床意義

張玉蘭,劉小慧

(江西省兒童醫院功能科,南昌 330006)

手足口病是(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是由多種腸道病毒感染引起的小兒傳染病。臨床表現輕重不一,輕者只有皮疹,重者病情進展迅速,短期內出現生命危險。細胞免疫機制在病毒感染性疾病的發生、發展中起著較為重要的作用。因此筆者對HFMD患兒細胞免疫功能狀況作了初步探討,現報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

觀察186例 HFMD患兒均為2008年6月至2009年6月在江西省兒童醫院住院HFMD患者,年齡范圍4個月～6歲,平均年齡(2.87±0.74)歲,男102例,女84例。均符合2008年5月衛生部公布的《手足口病預防控制指南(2008年)》的診斷標準[1]。根據病情分為普通組和重癥組。重癥病例診斷標準為有肌陣攣、腦炎、急性弛緩性麻痹、心肺衰竭、肺水腫等癥狀。普通病例122例、重癥病例64例作為觀察組。另據EV71檢測結果分為EV71陽性組和EV71陰性組,其中陽性組107例,陰性組79例。選取同期健康體檢的正常兒童140例作為健康對照組,男78例,女62例,平均年齡(2.6±0.71)歲。觀察組和健康對照組年齡和性別經檢驗差異無統計學意義。所有檢測對象均常規采集咽拭子標本,觀察組和健康對照組均清晨空腹采集EDTA.K3抗凝靜脈血2 mL。

1.2 檢測方法

用流式細胞儀測定外周血T細胞亞群T淋巴細胞(CD3+)、Th 細胞(CD4+)、T s細胞(CD8+)、CD16+,計算其占淋巴細胞的百分比,并計算CD4+/CD8+比值。咽拭子標本送江西省疾病預防控制中心實驗室,用RT-PCR法檢測腸道病毒EV71。

1.3 統計學方法

兩均數比較采用t檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

所有患兒病原檢測EV71陽性率為57.8%(107/186)。觀察組和健康對照組CD3+、CD4+、CD16+、CD8+,CD4+/CD8+比較見表1。

表1 觀察組和對照組T細胞亞群、NK細胞結果比較 ±s,%

表1 觀察組和對照組T細胞亞群、NK細胞結果比較 ±s,%

組別 n CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD16+觀察組 186 63.36±7.61 34.26±6.92 24.87±6.21 1.37±0.48 18.46±5.28健康組 140 69.87±8.36 39.28±7.65 25.53±7.72 1.53±0.56 21.37±6.39 P＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

重癥組 CD3+、CD4+、CD16+、CD4+/CD8+和普通組的比較,見表2。

表2 重癥組與普通組T細胞亞群及NK細胞結果比較 ±s,%

表2 重癥組與普通組T細胞亞群及NK細胞結果比較 ±s,%

組別 n CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD16+普通組 122 65.36±7.61 36.26±6.92 25.39±5.8 1 1.42±0.51 21.87±6.2 1重癥組 64 58.49±6.84 28.78±5.71 24.67±5.24 1.17±0.26 17.32±4.68 P＜0.05 ＜0.01 ＞0.05 ＜0.01 ＜0.05

EV71陽性組和 EV71陰性組 CD3+、CD4+、 CD16+、CD4+/CD8+的比較,見表3。

表3 EV71陽性與陰性患兒T細胞亞群及NK細胞結果比較 ±s,分

表3 EV71陽性與陰性患兒T細胞亞群及NK細胞結果比較 ±s,分

組別 n CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD16+EV71陽性組 107 59.48±7.82 29.91±6.26 25.23±6.14 1.18±0.29 16.79±4.36 EV71陰性組 79 66.57±8.13 36.86±7.04 24.53±5.47 1.50±0.58 22.46±6.49 P＜0.05 ＜0.01 ＞0.05 ＜0.01 ＜0.05

3 討論

細胞免疫在機體的免疫應答中起著至關重要的作用,是機體防病抗病的主要免疫屏障之一。細胞免疫主要由NK細胞、T淋巴細胞承擔。NK細胞可以直接殺滅腫瘤細胞或病毒感染的細胞;T細胞分CD8+細胞和CD4+細胞。其中CD4+細胞既可通過細胞毒作用及分泌細胞因子,直接清除異己抗原(包括突變的腫瘤細胞、入侵的微生物等),又可通過介導體液免疫應答清除異己抗原。而CD8+細胞能則通過抑制CD4+細胞活性,從而間接抑制B細胞的分化和TC殺傷功能,對體液免疫和細胞免疫起負向調節作用,以保持機體免疫平衡[2]。許多病毒(如HIV病毒)入侵后可以直接破壞機體的細胞免疫體系,致使機體免疫力下降,而無法有效清除病毒,導致疾病的發展。

HFMD的病原是EV71和COXA16等腸道病毒感染,其中最主要是EV71,本組樣本的檢出率為57.8%與文獻[3]報道結果相近。研究發現HFMD患兒細胞免疫功能顯著下降,主要表現為T細胞總數、CD4+細胞、及NK細胞下降;CD8+細胞變化不顯著;CD4+/CD8+下降。重癥組上述改變尤其明顯,與文獻報道的結果相似。表明患兒細胞免疫功能受損。主要是 T細胞總數、CD4+細胞及NK細胞數量下降,CD4+/CD8+比值降低,從而導致免疫清除功能下降。

重癥HFMD進展快、死亡率高。常在短期內死于神經源性肺水腫、肺出血。重癥病例幾乎(90%)均發生在EV71感染的患兒。有學者在研究腦膜炎患兒免疫應答時發現,特定的細胞毒T細胞相關抗原4(CTLA-4)免疫應答的改變與EV71感染性腦膜炎相關[4]。本研究亦發現上述T細胞免疫的改變主要發生在EV71感染陰性組而陰性組不明顯,表明EV71更易損傷機體的細胞免疫系統?？赡苓@就是為什么EV71感染更多導致重癥病例的原因之一。

綜上所述,HFMD患兒T細胞總數、CD4+細胞及NK細胞數量降低,T細胞總數、CD4+細胞及NK細胞數量下降,CD4+/CD8+比值降低,免疫清除功能下降。重癥病例降低尤其嚴重。患兒細胞免疫功能可作為一個判斷病情嚴重程度的重要指標。

[1] 衛生部.手足口病預防控制指南(2008年版)[EB/OI。].(2008-05-03)[2009-11-25].http:∥WWW.gov.cn/gzdt/2008-05/03/content_960347.htm.

[2] 熊仁秋.細胞毒T細胞的殺傷機制及其生理意義[J].國外醫學:免疫學分冊,2002,25(3):152.

[3] 吳亦棟,尚世強,陳志敏,等.手足口病病原體流行特征分析及臨床意義[J].中華兒科雜志,2010,48(7):537-539.

[4] Yang K D,Yang M Y,Li C C,et al.Altered cellular but not humoralreactions in children with complicated enterovirus 71 infections inTaiwan[J].J Infect Dis,2001,183(6):850-856.