淺淡藥品生產(chǎn)企業(yè)無菌檢驗方法驗證

陳萬勝

淺淡藥品生產(chǎn)企業(yè)無菌檢驗方法驗證

陳萬勝

目的探討藥品生產(chǎn)企業(yè)無菌檢驗方法驗證。方法對左氧氟沙星氯化鈉注射液的無菌方法驗證進行總結(jié)匯報。結(jié)果通過實驗建立的方法驗證試驗，可作為鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液的無菌檢查法。結(jié)論無菌檢驗方法驗證能夠全面掌握測定方法和能夠準(zhǔn)確檢測方法達(dá)到能夠全面適用于該供試品的檢驗，避免產(chǎn)生假陰性和假陽性，更有利于對藥品質(zhì)量的控制保證藥品安全。

藥品生產(chǎn)企業(yè);無菌檢驗;方法驗證

《中國藥典》2005年版規(guī)定，對藥品生產(chǎn)企業(yè)進行“無菌檢查”和“微生物限度檢查”時，未經(jīng)過方法學(xué)驗證的藥物品種，按照《國藥典發(fā)［2005］98號》對藥品“無菌檢查”和“微生物限度檢查”的方法進行合理的驗證，首先進行方法學(xué)驗證［1］。藥品生產(chǎn)企業(yè)無菌檢驗方法驗證非常重要是保證藥品質(zhì)量的重要的措施［2］，為了能夠進一步了解藥品生產(chǎn)企業(yè)無菌檢驗方法驗證，我們對左氧氟沙星氯化鈉注射液的無菌方法驗證進行匯報如下。

1 樣品及設(shè)備

1.1 儀器 HTY一Ⅲ型智能集菌儀、HTY-K型培養(yǎng)器專用振蕩儀、集菌培養(yǎng)器(均為杭州高得醫(yī)療器械有限公司);LRH-250一Ⅱ生化培養(yǎng)箱(廣東醫(yī)療器械廠)。

1.2 樣品 鹽酸左氧氟沙星注射液規(guī)格100ml 0.2 g，批號2010268961.1.3試驗用菌株:金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌及黑曲霉菌。所有菌株均來自中國生物制品檢定所。

2 方法與結(jié)果

2.2 方法的驗證 取樣量:每管3瓶(50ml＜V＜100ml;培養(yǎng)基:100ml/管)。取一次性全封閉集菌器兩聯(lián)3套，在各套中取一管中先泵入培養(yǎng)基并夾緊管口，作為陽對照管。

2.2.1 將本品3瓶按薄膜過濾法濾［3］至另一管并泵入相同培養(yǎng)基，于兩管中分別接入小于100 cfu的試驗菌作為試驗管1組。

2.2.2 將本品3瓶按薄膜過濾法濾至另一管，用pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液作沖洗劑，分3次沖洗，每次100ml泵入相同培養(yǎng)基后，于兩管中分別接入小于100 cfu的試驗菌為試驗管2組。

2.2.3 將本品3瓶按薄膜過濾法濾至另一管，用pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液作沖洗劑，分5次沖洗，每次100ml泵入相同培養(yǎng)基后，于兩管中分別接入小于100 cfu的試驗菌為試驗管3組

2.2.4 再取硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基分別泵入另兩管集菌器中作為陰性對照管。所有試驗管均按規(guī)定溫度將上述集菌器培養(yǎng)3～5 d行觀察試驗用菌株生長情況。

2.3 方法驗證試驗結(jié)果 試驗管1組顯示兩霉菌正常生長、細(xì)菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單孢菌%枯草芽孢桿菌%生孢梭菌均不能生長;顯示本品的抑菌作用將對無菌檢查結(jié)果的判斷有影響，應(yīng)使用一定量沖洗劑消除干擾。試驗管2組顯示銅綠假單孢菌在48 h內(nèi)生長＆金黃色葡萄球菌至第5天后才被觀察到枯草芽孢桿菌及生孢梭菌仍不能生長，表明本品的抑菌作用仍未消除需進一步加大沖洗液用量。試驗管3組各管按規(guī)定溫度培養(yǎng)14d逐日觀察，供試品管均澄清，陽性管生長良好，判供試品符合規(guī)定。通過實驗建立的方法驗證試驗，可作為鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液的無菌檢查法。具體見表1。

表1 方法驗證試驗結(jié)果

3 討論

2005年10月我國對藥品在進行無菌檢查及微生物限度檢查時發(fā)布了《國藥典發(fā)［2005］98號》［4］文要求藥品檢驗應(yīng)對藥品檢測進行方法學(xué)驗證。不進行方法學(xué)驗證的不能出具“符合2005年版中國藥典的規(guī)定”的結(jié)論［5］。本驗證方法主要是對供試品在該實驗條件下有、無抑菌活性，主要通過適采取積極的方法降低和消除對實驗結(jié)果的影像，以達(dá)到和避免產(chǎn)生假陰性和假陽性。通過無菌檢驗方法驗證能夠全面掌握測定方法和能夠準(zhǔn)確檢測方法達(dá)到能夠全面適用于該供試品的檢驗，避免產(chǎn)生假陰性和假陽性，更有利于對藥品質(zhì)量的控制保證藥品安全。

作者單位:461000 河南省許昌市食品藥品檢驗所

［1］湯光．現(xiàn)代藥物學(xué)．中國醫(yī)藥科技出版社，1997，3，75．

［2］國家藥典委員會．中國藥典二部．人民衛(wèi)生出版社，2005，12，附錄89．

［3］杜平華．新編細(xì)菌檢驗用培養(yǎng)基手冊．青島海洋大學(xué)出版社，1994，5，27．

［4］中國藥品生物制品檢定所．中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范．中國醫(yī)藥科技出版社，2005:313．

［5］國家藥典委員會．中國藥典臨床用藥須知·化學(xué)藥和生物制品卷．人民衛(wèi)生出版社，2005，12，544．