氣相色譜法測定小兒感冒顆粒中百秋李醇的含量

北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司（100079）王春燕

小兒感冒顆粒是由廣藿香、菊花、連翹、大青葉、板藍(lán)根、地黃、地骨皮、白薇、薄荷、石膏十味藥組成，具有清熱解表功能，用于小兒外感風(fēng)熱所致發(fā)熱重，微惡風(fēng)寒，頭痛、有汗或少汗，咽紅腫痛，口渴，舌尖紅，苔薄黃而干，脈浮數(shù)等。處方中的君藥廣藿香所含的百秋李醇是主要有效成分，原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采用薄層掃描法測定百秋李醇含量，因展開劑中含毒性有機試劑苯，故改進(jìn)為氣相色譜法測定百秋李醇的含量，方法簡便、準(zhǔn)確，可應(yīng)用于本品的質(zhì)量控制。

1 儀器與試劑

Agilent N8960高效氣液相色譜儀，F(xiàn)ID檢測器，彈性石英毛細(xì)管柱（柱長30m，內(nèi)徑0.22mm，膜厚度0.25um）OV-101;載氣：氮氣。百秋里醇對照品購自中國藥品生物制品檢定所。正己烷為分析純。小兒感冒顆粒（外購）。

2 試驗內(nèi)容

2.1 色譜分析條件 程序升溫：初始溫度110℃，以每分鐘5℃速率升溫至160℃，保持20分鐘。進(jìn)樣口溫度：220℃。檢測器溫度：220℃，載氣流速：1.5ml/min。色譜柱的理論塔板數(shù)按百秋里醇（C15H26O）峰計算，應(yīng)不低于50000。

2.2 線性關(guān)系的考察 分別精密吸取百秋里醇對照品溶液（258ug/ml）1ml，2 ml，4ml，6ml，8ml，10ml置10ml容量瓶中，各加正己烷至刻度，搖勻，分別精密吸取1ul注入氣相色譜儀，記錄峰面積。以百秋里醇對照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為 Y=0.26869x+0.52725，相關(guān)系數(shù) r=0.99997。結(jié)果表明，百秋里醇在25.8～258.0μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2.3 供試品溶液和對照品溶液的制備

2.3.1 供試品溶液的制備 精密量取本品100ml，照揮發(fā)油測定法（《中國藥典》2005版一部附錄XD）試驗，自測定器上端加水至刻度部分，并溢入燒瓶為止，加正己烷5ml，連接回流冷凝管，加熱保持微沸4小時，放冷，待溶液分層清晰，分取正己烷液。揮發(fā)油測定器內(nèi)壁用正己烷少量洗滌，分取正己烷液，水液再用正己烷2ml提取1次，合并正己烷液，置10ml量瓶中，加正己烷至刻度，搖勻，即得。

2.3.2 對照品溶液的制備 精密稱取百秋里醇對照品，用正己烷配制成每毫升含百秋里醇100μg的溶液。精密吸取對照品溶液，供試品溶液各1ul，注入氣相色譜儀，測定，即得。百秋里醇對照品和小兒感冒顆粒的高效液相色譜圖（略）。

2.4 樣品測定結(jié)果 3批樣品(批號4260992、4260993、4260994) 測定結(jié)果分別為2.838ug/ml、3.811ug/ml及2.954ug/ml。

2.5 穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一供試品溶液（4260995）溶液，分別于配制后0，2，4，8，12，24小時測定峰面積。結(jié)果表明，百秋里醇在24小時內(nèi)峰面積穩(wěn)定，RSD為1.05%。

2.6 精密度試驗 精密吸取同一供試品溶液（批號4260995），重復(fù)進(jìn)樣5次，測定峰面積，RSD=0.53%（n=5）。

2.7 重現(xiàn)性試驗 分別精密稱取同一批樣品，按供試品溶液制備方法制備6份，測定結(jié)果，RSD=0.57%（n=6）。

2.8 空白試驗 按處方中藥味的比例自配不含廣藿香的群藥，制成空白溶液，按樣品方法測定，結(jié)果空白溶液在與對照品百秋里醇相同保留處未顯示明顯色譜峰，故認(rèn)為無干擾。

2.9 回收率試驗 采用加樣回收法。精密吸取已知含量的同一批號樣品（批號：4260996 百秋里醇含量為37.9ug/支）100 ml，共6份，分別精密加入百秋里醇對照品溶液（0.03068mg/ml）10ml，均按上述供試品溶液的制備方法制備，吸取1ul進(jìn)樣，測定百秋里醇的含量，計算加樣回收率，結(jié)果平均回收率為96.9%，RSD為1.85%（n=6）。結(jié)果見附表。

附表 回收率試驗

3 討論

參考《中國藥典》[1]和文獻(xiàn)[2]中程序升溫方法，認(rèn)為前者主峰與其他峰未分離完全，后者主峰與其他峰分離完全（R＞1.5），且溫度較低，檢測時間較短，故選擇后者，確定初始溫度110℃，以每分鐘5℃的速率升溫至160℃，保持20分鐘，進(jìn)樣口溫度：220 ℃，檢測器溫度：220℃。