桂林西瓜霜的快速檢驗方法

廣西桂林食品藥品檢驗所（541002）蔣玲 謝黔鋒 饒偉文

桂林西瓜霜由西瓜霜、青黛、大黃、黃連、黃柏、山豆根等14味藥組成，具有清熱解毒、消腫止痛的功效。臨床上用于風熱上攻，肺胃熱盛所致的乳蛾、喉痹、口糜、急慢性咽喉炎，口腔潰瘍等癥[1]。收載于《中國藥典》2005年版一部，其青黛、大黃、黃連、黃柏的TLC鑒別方法操作步驟較多，檢驗周期長。為了配合藥品抽樣車在藥品抽樣現場進行快速檢驗，提高抽樣命中率，本研究對桂林西瓜霜的快速檢驗方法進行了研究，效果較滿意。現報告如下：

1 儀器與試藥

BUT2030-40-06超聲波清洗器，必能信超聲（上海）有限公司；ZF-I型三用紫外分析儀，上海顧村電光儀器廠。

桂林西瓜霜，桂林三金藥業股份有限公司提供，批號分別為060236、060305、060307。缺青黛的陰性樣品、缺大黃的陰性樣品、缺黃連和黃柏的陰性樣品，桂林三金藥業有限公司提供。大黃對照藥材，中國藥品生物制品檢定所，批號120984-200301；靛玉紅對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號0717-200303；鹽酸小檗堿對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號110713-200608；硅膠GF254薄層板，藥品快檢專用TLC板，天津思利達色譜技術開發公司；硅膠GF254：青島海洋化工廠。所用試劑均為分析純。

附圖1 青黛和大黃的薄層色譜圖

2 方法與結果

2.1 青黛、大黃的薄層色譜鑒別 取樣品2.5 g，加鹽酸4 m L 濕潤，再加二氯甲烷10mL，振搖或超聲提取2min，濾過，濾液作為供試品溶液。另取大黃對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液。取靛玉紅對照品，加二氯甲烷制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述3種溶液各3μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚（60～90℃）－環己烷－乙酸乙酯－甲酸（1:1:1:0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，分別置可見光及紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與靛玉紅對照品色譜相應的位置上，可見光下顯相同的紫紅色斑點；在與大黃對照藥材色譜相應的位置上，紫外光燈（365nm）下顯相同的橙黃色熒光斑點。而同法操作，陰性對照溶液均無對應的特征斑點。見附圖1。

2.2 黃連、黃柏的薄層色譜鑒別 取2.1項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液，吸取上述2種溶液各2μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯－無水乙醇－甲酸（7:1:2）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，并在其下方另顯1～2個黃色熒光斑點，而同法操作，陰性對照溶液均無對應的特征斑點。結果見附圖2。

附圖2 黃連、黃柏的薄層色譜圖

3 討論

3.1 桂林西瓜霜為中藥保護品種，陰性樣品由桂林三金藥業有限公司制備。為了盡量減少對照藥材的使用，便于快檢，故選擇鹽酸小檗堿對照品作對照，采取在其下方另顯1～2個斑點作為結果判斷依據。大黃中蒽醌類成分多以結合型蒽醌的形式存在，與糖通過苷鍵結合，遇酸可水解成游離型的蒽醌，后者可溶于親脂性的有機溶劑。靛玉紅在親脂、親水性的有機溶劑中都有較好的溶解性。小檗堿與鹽酸成鹽后易溶于沸水，在三氯甲烷和二氯甲烷中也能溶解。本文用鹽酸酸化使結合型蒽醌水解，同時使小檗堿成鹽，然后用二氯甲烷提取。提取溶劑比較了酸性乙醇、不同濃度鹽酸加三氯甲烷或二氯甲烷等溶劑，發現鹽酸加三氯甲烷或二氯甲烷的提取效果較好，故選擇毒性相對較小的鹽酸加二氯甲烷。由于鹽酸用量少，免去了分液這一步驟，直接濾過，濾液作為青黛、大黃、黃連、黃柏的共用供試液。

3.2 青黛、大黃的鑒別，比較了①石油醚（60～90℃）－環己烷－乙酸乙酯－甲酸（1:1:1:0.1）、②石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15:5:1）的上層溶液、③三氯甲烷－乙酸乙酯－甲酸（18:1:0.5）、④環己烷－乙酸乙酯（2:1），結果①和②均能使待測組分有效分離，斑點清晰，故選擇配制較簡便的①作為展開劑。

3.3 黃連、黃柏的鑒別，展開劑比較了①乙酸乙酯－無水乙醇－甲酸（7:1:2）、②乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水（5:3:1:1）、③乙酸乙酯－無水乙醇－濃氨溶液（6:3:1.5）、④乙酸乙酯－無水乙醇－濃氨溶液（35:5:1），結果以①為好。《中國藥典》方法的展開劑中有苯，毒性大，不采用。

3.4 用本方法檢驗了同一生產企業的3批樣品，結果均符合規定。同時取樣按《中國藥典》2005年版一部桂林西瓜霜項下的方法檢驗，結論與本方法相同。

3.5 本方法曾在不同溫度、濕度下試驗，重現性較好；用自制的硅膠GF254薄層板試驗，斑點也能有效分離。經對比，按《中國藥典》方法檢驗，耗時約5h，而本方法只需1h，且用乙酸乙酯等毒性小的溶劑替換了藥典方法中苯、甲醇等毒性大的溶劑，達到了快檢“簡便、快捷、環保、統一”的要求，適用于藥品抽樣時的快速檢驗，在基層藥品經營、使用單位亦適用。