刺榆黃酮預(yù)防大鼠高脂血癥形成的實驗研究

石利春，包海鷹，李 巖

（吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，吉林 長春 130118）

高血脂及脂質(zhì)代謝障礙是造成動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）的主要危險因素，而AS引起的心腦血管疾病嚴重危害人類健康，還可導(dǎo)致高血壓、糖尿病、冠心病等疾病的發(fā)生。而黃酮類化合物降血脂的作用機理主要通過抗氧化作用實現(xiàn)［1］。刺榆（Hemiptelea davidii），為榆科（Ulmaceae）刺榆屬（Hemiptelea）的單屬種植物，據(jù)筆者調(diào)查內(nèi)蒙古東部的居民在幾百年前就有食用其嫩莖葉的習(xí)慣，其具有降脂、滑腸和延年益壽的作用［2-3］。2004年韓國學(xué)者從中分離出黃酮類成分，且具有清除1，1-二苯基苦基苯肼（DPPH）自由基的活性［4］。本文采用大鼠高脂血癥模型，首次觀察了刺榆黃酮對動物實驗性高脂血癥的影響。

1 材料與方法

1.1 動物 Wistar大鼠60只，雄性，體質(zhì)量為220～250g，合格證號：10-1028，購自吉林大學(xué)實驗動物部。

1.2 植物 刺榆嫩莖葉采自于2005年，采自內(nèi)蒙古通遼市，經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)包海鷹教授鑒定。

1.3 藥品及試劑 血脂康膠囊：北京北大維信生物科技有限公司生產(chǎn)，批號20060608。膽固醇：上海新興化工試劑研究所產(chǎn)品，批號060608。丙硫氧嘧啶：上海復(fù)星朝輝藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號050901。豬油：由本實驗室自制。TC、TG、HDL-C、LDL-C含量測定試劑盒：北京中生北控生物科技股份有限公司，批號依次為070391，071461，070141，070151。

1.4 儀器 SPECTRAFLUOR PLUS型酶標儀：奧地利TECAN公司產(chǎn)品。GL-20G-Ⅱ離心機：上海安亭科學(xué)儀器廠。TU-1800S型紫外可見分光光度計：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司產(chǎn)品。

1.5 方法

1.5.1 刺榆黃酮的提取 將刺榆嫩莖葉粉末用95％乙醇于55℃水浴回流提取3次，每次8h，過濾，濾液合并濃縮至一定體積（無醇味）后依次用等量的石油醚（60-90）、正己烷萃取，然后將水層蒸干。將該提取物用蒸餾水溶解后，過聚酰胺柱（30～60目），依次用水、40％乙醇和95％乙醇洗脫，其中40％乙醇部分參照黃酮的理化鑒定方法［5］，結(jié)果均顯陽性。并用紫外分光光度法測定黃酮含量為57.06％。

1.5.2 藥理實驗方法［6］大鼠購入后先飼養(yǎng)7d以適應(yīng)環(huán)境，之后空腹測TC、TG、HDL-C、LDL-C含量。根據(jù)血脂水平隨機分為正常組，高脂模型組，血脂康組，刺榆黃酮高、中、低（4.5、1.5、0.5g/kg）3個劑量組，每組10只。高脂高膽固醇飼料的配方：在87.8％基礎(chǔ)飼料基礎(chǔ)上，加入2％膽固醇、10％豬油和0.2％丙硫氧嘧啶。正常組給予常規(guī)飼料外，其余組均飼以高脂高膽固醇飼料。正常組和高脂模型組大鼠每天灌胃等量的蒸餾水，其余各組每天灌胃給藥1次，給藥體積為10mL/kg。陽性藥物血脂康組的劑量為0.54g/kg體質(zhì)量。每2周剪尾取血測血脂，以動態(tài)觀察動物血脂變化及藥物的降血脂作用。每次取血前大鼠應(yīng)禁食（不禁水）16h，以排除食物對血脂水平的影響。

2 結(jié)果

大鼠給藥前及預(yù)防性給藥后第2、4周血脂檢測結(jié)果，見表1～表3。

表1 刺榆黃酮給藥前高脂血癥大鼠血脂含量（±s，n=10）

表1 刺榆黃酮給藥前高脂血癥大鼠血脂含量（±s，n=10）

注：給藥前各組動物血脂4項指標均衡一致，組間比較均為P＞0.05。

組 別 給藥量/（g/kg體質(zhì)量） TC/（mmol/L） TG/（mmol/L） HDL-C/（mmol/L） LDL-C/（mmol/L） TC/HDL-C正 常 組 - 2.11±0.14 1.82±0.34 0.63±0.13 1.45±0.14 1.71±0.31高脂模型組 - 2.26±0.62 1.79±0.32 0.60±0.22 1.43±0.32 1.70±0.29血 脂 康 組 0.54 2.34±0.33 1.76±0.48 0.68±0.35 1.45±0.31 1.63±0.37刺榆黃酮組 4.50 2.35±0.31 1.80±0.43 0.65±0.27 1.40±0.36 1.73±0.41刺榆黃酮組 1.50 2.18±0.40 1.85±0.31 0.58±0.37 1.38±0.29 1.68±0.26刺榆黃酮組 0.50 2.07±0.11 1.88±0.65 0.61±0.35 1.48±0.25 1.65±0.34

表2 刺榆黃酮預(yù)防性給藥2周對實驗性高脂血癥大鼠血脂含量的影響（±s，n=10）

表2 刺榆黃酮預(yù)防性給藥2周對實驗性高脂血癥大鼠血脂含量的影響（±s，n=10）

注：與高脂模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001。

組 別 給藥量/（g/kg體質(zhì)量） TC/（mmol/L） TG/（mmol/L） HDL-C/（mmol/L） LDL-C/（mmol/L） TC/HDL-C正 常 組 - 2.01±0.17### 1.87±0.56# 0.64±0.09## 1.42±0.17### 1.72±0.28###高脂模型組 - 4.30±0.52 1.42±0.22 1.21±0.46 2.76±0.40 5.51±1.96血 脂 康 組 0.54 3.54±0.81# 1.76±0.68 1.08±0.57 2.30±0.35# 3.56±0.36#刺榆黃酮組 4.50 4.10±0.89 1.71±0.42 1.29±0.66 2.60±0.63 4.65±1.43刺榆黃酮組 1.50 4.00±0.63 1.69±0.46 1.30±0.69 2.60±0.41 5.32±1.40刺榆黃酮組 0.50 4.64±1.66 1.68±1.05# 1.44±0.84 2.80±1.04 6.19±2.81

表3 刺榆黃酮預(yù)防性給藥4周對實驗性高脂血癥大鼠血脂含量的影響（±s，n=10）

表3 刺榆黃酮預(yù)防性給藥4周對實驗性高脂血癥大鼠血脂含量的影響（±s，n=10）

注：與高脂模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001。

組 別 給藥量/（g/kg體質(zhì)量） TC/（mmol/L） TG/（mmol/L） HDL-C/（mmol/L） LDL-C/（mmol/L） TC/HDL-C正 常 組 - 1.40±0.15### 1.97±0.31### 0.60±0.09## 1.28±0.19### 1.31±0.17##高脂模型組 - 3.10±0.81 1.29±0.42 1.21±0.59 3.00±0.96 3.64±1.56血 脂 康 組 0.54 1.79±0.16### 1.37±0.48 0.74±0.16# 1.51±0.24### 1.71±0.19###刺榆黃酮組 4.50 2.07±0.65## 1.40±0.23 1.20±0.38 2.14±0.58# 2.45±1.26#刺榆黃酮組 1.50 2.34±0.64# 1.12±0.28 1.09±0.44 2.16±0.55# 2.63±0.98刺榆黃酮組 0.50 3.14±0.78 1.33±0.23 1.34±0.81 2.44±0.75 3.41±1.18

結(jié)果表明：實驗前大鼠的血脂水平分布比較均勻，各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。在給藥2周后，高脂模型組大鼠血清TC和LDL-C含量均較正常組明顯升高（P＜0.001），隨之導(dǎo)致TC/HDL-C比值也明顯升高。陽性藥血脂康較明顯降低了血清TC和LDL-C含量（P＜0.05），而刺榆給藥組對此雖表現(xiàn)出降低趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。給藥4周后，刺榆黃酮4.5、1.5g/kg體質(zhì)量劑量組大鼠血清TC和LDL-C含量均明顯低于高脂模型組（P＜0.01，P＜0.05），其TC/HDL-C比值也明顯低于高脂模型組。

3 討論

降血脂藥物的開發(fā)是目前化學(xué)及藥學(xué)研究領(lǐng)域的一個熱點，眾多研究表明，黃酮類化合物是中藥降血脂主要有效成分之一，其機理主要是通過抗氧化作用，消除自由基來維持脂質(zhì)代謝正常而達到降血脂目的［1］。刺榆是科爾沁地區(qū)重要的防風(fēng)固沙樹種，具耐干旱、鹽堿、嚴寒，抗高溫等多種特性。據(jù)《本草拾遺》記載，刺榆性淡、澀，味平，主要功效為解毒消腫［6］，且據(jù)民間調(diào)查發(fā)現(xiàn)，其葉具有降脂、滑腸和延年益壽的作用［2］。

本實驗結(jié)果表明，刺榆黃酮對大鼠實驗性高脂血癥具有明顯的預(yù)防作用，主要是明顯降低血清TC和LDL-C含量，使TC/HDL-C的比值隨之降低，并呈現(xiàn)一定的劑量—效應(yīng)關(guān)系。其中刺榆黃酮4.5g/kg體質(zhì)量組效果最好。本實驗證實了刺榆的降血脂功效，但對其具體的降血脂機理有待進一步深入研究。鑒于刺榆葉可食，是一種具有較高開發(fā)潛力的保健食品和藥品資源。本實驗對刺榆的進一步研究和保護開發(fā)利用提供了有利的科學(xué)依據(jù)。

［1］齊君，李俊利，常福厚.中藥降血脂的研究進展［J］.內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2007（1）：59-60.

［2］馬毓泉.內(nèi)蒙古植物志：2卷［M］.2版.呼和浩特：內(nèi)蒙古人民出版社，1990：115.

［3］李巖，石利春，王玲，等.刺榆嫩莖葉的生藥學(xué)研究［J］.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2009，31（1）：51-54.

［4］Chang Bok Sim，Kwon Yong Soo，Kim Chang Min.The chemical structures and their antioxidant activity of the components isolated from the heartwood of Hemiptelea davidii［J］.Korean Journal of Phamacognosy，2004，35（1）：80-87.

［5］匡海學(xué).中藥化學(xué)［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2006：146-147.

［6］丁云錄，賁彥鴻，孫慶錄，等.海德捷寧對實驗性高脂血癥家兔的治療作用［J］.吉林中醫(yī)藥，2005，25（9）：57-59.