高效液相色譜法測定解郁安神顆粒中梔子苷的含量

高紅梅，張嘯環

（長春中醫藥大學，吉林 長春 130117）

解郁安神膠囊系由柴胡、遠志、酸棗仁、梔子等藥材組成的純中藥制劑。具有舒肝解郁、安神定志的作用，用于心煩、焦慮、失眠、健忘、更年期綜合征、神經官能癥等。本文闡述了其質量標準的研究，確保藥品的安全和有效。

1 儀器與試劑

島津LC-2010C高效液相色譜儀，梔子苷對照品（中國藥品生物制品檢驗所提供），批號：110749-200309，規格：供含量測定用。乙腈為色譜純，水為純化水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：Diamonsil C18（4.6mm×200mm，5μm）；流動相：乙腈-水（15∶85）；流速：1.0mL/min；柱溫：35℃；檢測波長：236nm；理論板數按梔子苷峰計算應不低于3 000。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含30μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本品內容物，研細，取約1g或0.5g（無糖型），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20mL，稱定重量，加熱回流40min，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.4 陰性對照品溶液的制備 取缺梔子的樣品內容物，照供試品溶液的制備項下同法操作，即得。

2.5 線性關系考察 精密稱取梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.068 4mg的溶液，分別精密吸取2、3、4、5、6μL測定，以對照品進樣量為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：Y=128 6.55X+16.86（r=0.999 8）。結果表明：梔子苷在0.1～0.4mg范圍內，呈良好的線性關系，由于標準曲線經過原點，故采用外表一點法。

2.6 方法學考察

2.6.1 精密度實驗 精密吸取供試品溶液5μL，注入液相色譜儀，重復6次，測定其色譜峰面積值的RSD為0.5％。

2.6.2 穩定性實驗 取供試品溶液，按色譜條件測定，于0、4、8、12、24h分別依法測定，結果峰面積的RSD為1.6％，梔子苷在24h內測定結果穩定。

2.6.3 重現性實驗 精密稱取同一批樣品6分，按供試品溶液的制備和測定方法測定，結果峰面積的RSD為0.7％。

2.6.4 回收率試驗 取已知含量的供試品（含量：0.31mg/g）6分，每分0.5g，精密稱定，分別精密加入梔子苷對照品按正文2.3項下操作，測定，并根據樣品含量及芍藥苷對照品加入量，計算回收率。結果平均回收率為100.2％，RSD=1.1％（n=6）。

2.7 樣品測定 測定9批樣品含量，結果見表1。

表1 9批樣品含量測定結果（n=2）

結論：根據《中國藥典》2005年版一部梔子的含量測定限度和該處方中梔子的量，得出本品每袋含梔子苷全部轉移時最低不得少于7.2mg，而上述測定結果最高值為5.9mg/袋。因此，暫定本品每袋含梔子以梔子苷（C17H24O10）計，不得少于3.0mg。

3 小結

3.1 流動相考察 梔子中主要含環烯醚萜苷類、有機酸類、揮發性成分等，參照《中國藥典》2005年版一部梔子項下含量測定方法，采用反相高效液相色譜法測定梔子中梔子苷的含量，以梔子苷作為指標性成分，控制本制劑的內在質量，具有合理性，易于操作，結果準確，重現性良好。

3.2 樣品檢測波長 取梔子苷對照品的甲醇溶液，經UV-2450紫外分光光度計200～400nm范圍內測定。結果梔子苷在236nm波長處有最大吸收，且溶劑、陰性無干擾。

［1］吳紅娟.不同來源梔子中梔子苷含量測定［J］.湖南中醫藥大學學報，2010（5）：58.

［2］中華人民共和國藥典委員會.中國藥典［M］.北京：人民衛生出版社，2010：119.