甘藍型油菜及其親本種BAC末端重復序列分析

摘要：以蕓薹屬的３個物種（甘藍型油菜Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ、白菜Ｂ． ｒａｐａ、甘藍Ｂ． ｏｌｅｒａｃｅａ）的ＢＡＣ末端序列為研究對象，對其重復序列的組成和比例、ＧＣ含量做了初步的比較研究。３個物種中ＢＡＣ末端重復序列所占的比例分別是１８．９８％、１９．３７％和１９．４５％。３個物種的ＢＡＣ末端重復序列均可分為反轉座子、轉座子、小ＲＮＡ、微衛星、簡單重復序列和低復雜度序列６種類型，其中反轉座子所占比例最大，甘藍型油菜ｒＤＮＡ的含量明顯高于其他兩個物種中該重復類型的含量。

關鍵詞：甘藍型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）；親本種；ＢＡＣ末端；重復序列

中圖分類號：Ｓ５６５．４ 文獻標識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０11）19－4073-04

ＢＡＣ Ｅｎｄ Repeat Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｐａｒｅｎｔａｌ Ｓｐｅｃｉｅｓ

ＣＡＯ Ｒｕｉ，ＬＩ Ｒｕｉ－ｙｕａｎ，ＬＯＮＧ Ｙａｎ，ＭＥＮＧ Ｊｉｎ－ｌｉｎｇ

（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｗｕｈａｎ， ４３００７０， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｒｅｐｅａｔ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ’ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ， ＧＣ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ＢＡＣ ｅｎｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｐａｒｅｎｔａｌ ｓｐｅｃｉｅｓ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ， Ｂ． ｒａｐａ， Ｂ． ｏｌｅｒａｃｅａ ｗere ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｌｙ ａｎａｌｙｚｅｄ． Ｔｈｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ BAC and ｒｅｐｅａｔ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｉｎ Ｂ． ｎａｐｕｓ， Ｂ． ｒａｐａ， Ｂ． ｏｌｅｒａｃｅａ ｗａｓ １８．９８％， １９．３７％， １９．４５％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｔｈｅ ｒｅｐｅａｔ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｉｎ ＢＡＣ ｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｓｐｅｃｉｅｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ ｉｎｔｏ ６ ｔｙｐｅｓ of retrotransposon， transposon， miRNAs， microsatellite， simple sequence repeat and low complexity sequence， ａｍｏｎｇ ｗｈｉｃｈ ｒｅｔｒｏｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ； ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｒＤＮＡ ｉｎ Ｂ． ｎａｐｕｓ ｗａｓ ｍｕｃｈ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｔｗｏ ｓｐｅｃｉｅｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ； ｐａｒｅｎｔａｌ ｓｐｅｃｉｅｓ； ＢＡＣ ｅｎｄ； ｒｅｐｅａｔ ｓｅｑｕｅｎｃｅ

１９３５年日本學者總結前人的實驗結果，并在細胞學研究的基礎上，提出了禹氏三角假說［１］，認為蕓薹屬栽培種包括３個二倍體基本種：白菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ，ＡＡ，２ｎ＝２０）、甘藍（Ｂ． ｏｌｅｒａｃｅａ，ＣＣ，２ｎ＝１８）和黑芥（Ｂ． ｎｉｇｒａ，ＢＢ，２ｎ＝１６），以及３個四倍體復合種：甘藍型油菜（Ｂ． ｎａｐｕｓ，ＡＡＣＣ，２ｎ＝３８）、芥菜型油菜（Ｂ． ｊｕｎｃｅａ，ＡＡＢＢ，２ｎ＝３６）和埃塞俄比亞芥（Ｂ． ｃａｒｉｎａｔａ，ＢＢＣＣ，２ｎ＝３４），其種間關系如圖１所示：

盡管前人對甘藍型油菜、白菜和甘藍３個物種的基因組進行了許多基于細胞學、遺傳學的比較分析，但由于基因組測序成本的限制，很少有直接大規模利用３個基因組的序列進行比較生物學分析的報道。細菌人工染色體（Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ，ＢＡＣ）文庫的構建對于基因組的測序起著至關重要的作用。ＢＡＣ克隆載體一般可以插入１００～３００ ｋｂ的外源基因組片段［２］。對每個插入的外源基因組序列進行末端測序可得ＢＡＣ末端序列，每個末端序列的長度約為５００ ｂｐ。本研究利用甘藍型油菜及其親本種白菜和甘藍的ＢＡＣ末端序列，對其所含重復序列的組成和比例、ＧＣ含量進行了初步的比較。

１材料與方法

１．１３個物種ＢＡＣ末端序列信息來源及概況

甘藍型油菜的ＢＡＣ末端序列主要來源于中英合作測序項目（ＢＢＳＲＣ－ｆｕｎｄｅｄ ＵＫ－Ｃｈｉｎａ），所測的品種是Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ“Ｔａｐｉｄｏｒ”，共有７３ ７２８個ＢＡＣ，測序所用的載體為ｐＢＡＣ／ＳＡＣＢ１，所用的酶是ＨｉｎｄⅢ，共得到了９３ １６５條ＢＡＣ末端序列，均以ＪＢｎＢ命名。白菜和甘藍的ＢＡＣ末端序列均來源于ＧｅｎＢａｎｋ數據庫，檢索詞分別為：Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ ＢＡＣ－ｅｎｄ和Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ ＢＡＣ－ｅｎｄ。白菜的ＢＡＣ末端序列主要來自３個ＢＡＣ文庫，ＫＢｒＨ、ＫＢｒＢ和ＫＢｒＳ，分別含有５６ ４８３、５０ ６８８、１４ ２５６個ＢＡＣ，測序所用的酶分別是ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ、ＢａｍＨⅠ，ＫＢｒＨ文庫和ＫＢｒＢ文庫的載體均是ｐＣＵＧＩＢＡＣＩ，所測的品種均是Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ，ｓｕｂ.ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ，ｖａｒ. Ｃｈｉｉｆｕ－４０１，得到的白菜ＢＡＣ末端序列共１９８ ４９０條；甘藍的ＢＡＣ末端序列來自ＪＢｏ文庫，共包含３３ ７９２個ＢＡＣ，測序所用的載體為ｐＢｉＢＡＣ２，酶是ＨｉｎｄⅢ，所測品種為Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ ｖａｒ． ａｌｂｏｇｌａｂｒａ。

１．２ＢＡＣ末端序列分析方法

１．２．１載體序列和其他污染序列的去除用ＳｅｑＣｌｅａｎ（ｈｔｔｐ：//ｃｏｍｐｂｉｏ．ｄｆｃｉ．ｈａｒｖａｒｄ．ｅｄｕ/ｔｇｉ/ｓｏｆｔｗａｒｅ/）修正序列中載體及一些低質量或者低復雜度序列的腳本，所用到的關于污染的數據庫來自ｆｔｐ：//ftp.ncbi.nih.gov/pub/UniVec/，下載后先用ｆｏｒｍａｔｄｂ工具格式化后被Ｓｅｑｃｌｅａｎ使用。

１．２．2重復序列的分析用ＲｅｐｅａｔＭａｓｋｅｒ軟件（ｈｔｔｐ：//www.repeatmasker.org/ＲＭＤｏｗｎｌｏａｄ．ｈｔｍｌ）分析ＢＡＣ末端序列含有的重復序列，重復序列庫從網站ｈｔｔｐ：//www.girinst.org/accountservices/rｅｇｉｓｔｅｒ．ｐｈｐ下載。

２結果與分析

２．１３個物種ＢＡＣ末端序列基本信息

本研究分析的甘藍型油菜ＢＡＣ末端序列的堿基數占其全基因組的１／２４，白菜ＢＡＣ末端的堿基數約占其全基因組的１／３，甘藍ＢＡＣ末端的堿基數約占其全基因組的１／９（表１）。從ＧＣ含量來看，甘藍型油菜和白菜的相似性較大，即甘藍型油菜的ＡＡＣＣ基因組多呈現出ＡＡ基因組的特征。對３個物種的ＢＡＣ末端序列長度分布進行分析比較，發現甘藍型油菜和白菜的ＢＡＣ末端序列在長度分布上都出現了1個以上的峰值，而甘藍的長度分布呈現較好的正態分布。造成多峰值的原因可能是不同的內切酶或不同的批次測序，也有可能是人為的操作誤差。從ＢＡＣ末端長度（最小／最大／平均長度）來看，甘藍型油菜和甘藍的相似性較大，多呈現ＣＣ基因組特征，但是由于測序受到多種因素影響，其可能不能代表基因組結構之間的真正關系。

２．２３個物種ＢＡＣ末端重復序列分析結果

甘藍型油菜的ＢＡＣ末端序列共有９ ３３８ ３７０ ｂｐ的堿基被檢測為重復序列，占全部ＢＡＣ序列的１８．９８％。白菜的ＢＡＣ末端序列共有２９ ９３４ ７０６ ｂｐ的重復序列，占全部ＢＡＣ序列的１９．３７％。甘藍的ＢＡＣ末端序列有１３ ０２８ ００６ ｂｐ為重復序列，占全部ＢＡＣ序列的１９．４５％。３個物種的重復單元都可分為６大類：反轉座子（Ｒｅｔｒｏｅｌｅｍｅｎｔｓ）、轉座子（ＤＮＡ ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎｓ）、小ＲＮＡ（ｓｍａｌｌ ＲＮＡ，ｒＤＮＡ）、微衛星（Ｓａｔｅｌｌｉｔｅｓ）、簡單重復序列（Ｓｉｍｐｌｅ ｒｅｐｅａｔｓ）和低復雜度序列（Ｌｏｗ ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙ）（表２）。對３個物種的重復序列分布進行比較，發現在６大類序列中反轉座子所占比重最大，其中包括了最常見的重復家族Ｇｙｐｓｙ和Ｃｏｐｉａ（可編碼反轉錄酶或整合酶），其次為小ＲＮＡ（ｒＤＮＡ）序列。這表明了３個物種（ＡＡＣＣ、ＡＡ、ＣＣ）基因組在成分上的相似性。但是３個物種不完全相同的重復序列比例顯示了３個物種間的差異。

白菜和甘藍的重復序列占各自ＢＡＣ末端序列全長的比例比較相近，略高于甘藍型油菜的重復序列所占的比例，除ｒＤＮＡ外，白菜和甘藍各個重復類型的比例更相近，這反映出ＡＡ基因組和ＣＣ基因組的相似性。白菜Ｅｎ－Ｓｐｍ轉座子的含量明顯低于其他兩個物種；而甘藍中ＬＩＮＥｓ和Ｈｏｂｏ－Ａｃｔｉｖａｔｏｒ的含量明顯高于其他兩個物種；對于甘藍型油菜而言，其ｒＤＮＡ的含量明顯高于其他兩物種該重復元素含量。進一步研究發現３個物種中的ｒＤＮＡ都主要由ＳＳＵ＿ｒＲＮＡ＿Ａｔｈ和ＬＳＵ＿ｒＲＮＡ＿Ａｔｈ這兩類構成。

３討論

研究表明，分析一個物種的ＢＡＣ末端序列也是研究一個物種基因組特性的好方法，研究的準確性在于所測序的ＢＡＣ末端是從ＢＡＣ文庫中隨機挑選的，ＢＡＣ末端序列已經被認為是高特異性的序列標記［３］。由于ＢＡＣ末端對整個基因組的代表性作用，也有很多科學家用ＢＡＣ末端序列進行比較基因組學的研究［４］。本研究所用的甘藍型油菜末端序列有９３ １６５條，總堿基數為４９ １８２ ８４４ ｂｐ，約占甘藍型油菜全基因組的１／２４。雖然用于分析的ＢＡＣ末端序列條數是有限的，對整個基因組的覆蓋率也是有限的，但從理論上來說其在基因組是隨機分布的，在一定程度上能代表其基因組的特征。

ＧＣ含量是一個基因組的重要特征。甘藍型油菜、白菜和甘藍的ＢＡＣ末端序列ＧＣ含量分別是４０．８％、４０．５％和３８．５％，擬南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ）基因組的ＧＣ含量是４２．７％。植物基因組都含有大量的轉座元素（ＴＥ），比如轉座子、反轉座子等。在本研究中，甘藍型油菜、白菜、甘藍的ＴＥ含量分別是１１．３９％、１３．４２％、１４．１２％。其中兩種重要而且含量較高的反轉座子Ｇｙｐｓｙ與Ｃｏｐｉａ在３個物種中的比例分別是１∶１．０５、１∶２．０１、１∶１．５３，其在擬南芥中是１∶１［５，６］，水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ）中為２∶１［７，８］，蘋果（Ｍａｌｕｓ ｐｕｍｉｌａ）中是１∶３［９］。

Ｅｎ－Ｓｐｍ轉座子是一類自主型轉座系統，在白菜中含量很高，而在甘藍中，ＬＩＮＥｓ和Ｈｏｂｏ－Ａｃｔｉｖａｔｏｒ的含量明顯高于其他兩個物種，其中Ｈｏｂｏ－Ａｃｔｉｖａｔｏｒ最早是科學家在調查猴的ＤＮＡ轉座子時發現的超家族，并戲稱為“太空侵略者”。對于甘藍型油菜中的兩類ｒＤＮＡ，ＳＳＵ＿ｒＲＮＡ＿Ａｔｈ ２００７年作為植物界編碼ｒＲＮＡ的基因收錄在ｒｅｐｅａｔｍａｓｋｅｒ的ｒｅｐｂａｓｅ中，序列來源是擬南芥１８ Ｓ ｒＲＮＡ。ＬＳＵ＿ｒＲＮＡ＿Ａｔｈ是同一時間收錄進來的擬南芥５．８ Ｓ ｒＲＮＡ。有研究表明很多異源多倍體中的核ｒＤＮＡ存在同步進化現象（指個體或者種群內基因的重復單位之間發生隨機而定向純合的進化方式），如Ｗｅｎｄｅｎ等［１０］對棉屬的５個四倍體種（ＡＡＤＤ基因組）及二倍體親本種（ＡＡ或ＤＤ）的１８ Ｓ ｒＤＮＡ基因的ＩＴＳ區和５．８ Ｓ ｒＤＮＡ區域進行了分析，發現所有的二倍體、四倍體只有單一的序列，不存在基因座多態性，說明二倍體、四倍體ＩＴＳ區重復單位間的序列雜合性很低或不存在，它們之間已經接近或完全純合［１０］。但是對蕓薹屬的多倍體復合體的研究結果卻相反，Ｗａｔｅｒｓ等［１１］對６個栽培種Ｂ． ｒａｐａ（ＡＡ）、Ｂ． ｎｉｇｒａ（ＢＢ）、Ｂ． ｏｌｅｒａｃｅａ（ＣＣ）、Ｂ． ｊｕｎｃｅａ（ＡＡＢＢ）、Ｂ． ｃａｒｉａｎｔａ（ＢＢＣＣ）、Ｂ． ｎａｐｕｓ（ＡＡＣＣ）的研究發現多倍體種同時具有兩個二倍體祖先種的ｒＤＮＡ重復序列，而且在Ｂ． ｎａｐｕｓ和Ｂ． ｊｕｎｃｅａ中，兩個親本ｒＤＮＡ序列的摩爾數相等，表明這些多倍體中ｒＤＮＡ未發生同步進化。本研究中甘藍型油菜ｒＤＮＡ的含量明顯高于其他兩個物種中該重復元素含量，很好地佐證了該結論。

參考文獻：

［１］ ＮＡＧＡＨＡＲＵ Ｕ． Ｇｅｎｏｍｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｗｉｔｈ ｓｐｅｃｉａｌ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｔｏ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂ． ｎａｐｕｓ ａｎｄ ｐｅｃｕｌｉａｒ ｍｏｄｅ ｏｆ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｊａｐａｎ Ｊ Ｂｏｔ，１９３５（７）：３８９－４５２．

［２］ ＣＨＯ Ｋ，Ｏ＇ＮＥＩＬＬ Ｃ Ｍ，ＫＷＯＮ Ｓ Ｊ，ｅｔ ａｌ． Ｓｅｑｕｅｎｃｅ－ｌｅｖｅｌ ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ ｇｅｎｏｍｅ ａｒｏｕｎｄ ｔｗｏ ｓｔｅａｒｏｙｌ－ＡＣＰ ｄｅｓａｔｕｒａｓｅ ｌｏｃｉ［Ｊ］． Ｔｈｅ Ｐｌａｎｔ Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１０，６１（４）：５９１－５９９．

［３］ ＺＨＡＯ Ｓ，ＳＨＡＴＳＭＡＮ Ｓ，ＡＹＯＤＥＪＩ Ｂ，ｅｔ ａｌ． Ｍｏｕｓｅ ＢＡＣ ｅｎｄｓ ｑｕａｌｉｔｙ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ａｎｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｅｓ［Ｊ］． Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００１，１１（１０）：１７３６－１７４５．

［４］ ＤＡＴＥＭＡ Ｅ，ＭＵＥＬＬＥＲ Ｌ，ＢＵＥＬＳ Ｒ，ｅｔ ａｌ． Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｂａｃ ｅｎｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｏｍａｔｏ ａｎｄ ｐｏｔａｔｏ ｒｅｖｅａｌｓ ｏｖｅｒｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｇｅｎｅ ｆａｍｉｌｉｅｓ ｉｎ ｐｏｔａｔｏ［Ｊ］． ＢＭＣ Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００８，８（１）：３４．

［５］ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｓｅｑｕｅｎｃｅ（ｆｔｐ：／／ｆｔｐ．ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ．ｏｒｇ／ｈｏｍｅ／ｔａｉｒ／Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ／）［ＤＢ／ＯＬ］．

［６］ ＢＥＶＡＮ Ｍ，ＷＡＬＳＨ Ｓ． Ｔｈｅ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｇｅｎｏｍｅ： Ａ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｐｌａｎｔ ｒｅｓｅａｒｃｈ［Ｊ］． Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００５，１５（１２）：１６３２－１６４２．

［７］ ＦＥＮＧ Ｑ，ＺＨＡＮＧ Ｙ，ＨＡＯ Ｐ，ｅｔ ａｌ． Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｉｃｅ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ４［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ，２００２，４２０（６９１３）：３１６－３２０．

［８］ ＧＯＦＦ Ｓ Ａ，ＲＩＣＫＥ Ｄ，ＬＡＮ Ｔ Ｈ，ｅｔ ａｌ． Ａ ｄｒａｆｔ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒｉｃｅ ｇｅｎｏｍｅ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ． ｓｓｐ． Ｊａｐｏｎｉｃａ）［Ｊ］． Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００２， ２９６（５５６５）：９２－１００．

［９］ ＨＡＮ Ｙ，ＣＨＡＧＮ Ｄ，ＧＡＳＩＣ Ｋ，ｅｔ ａｌ． ＢＡＣ－ｅｎｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ－ｂａｓｅｄ ＳＮＰｓ ａｎｄ Ｂｉｎ ｍａｐｐｉｎｇ ｆｏｒ ｒａｐｉｄ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｍａｐｓ ｉｎ ａｐｐｌｅ［Ｊ］． Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２００９，９３（３）：２８２－２８８．

［１０］ ＷＥＮＤＥＬ Ｊ Ｆ，ＳＣＨＮＡＢＥＬ Ａ，ＳＥＥＬＡＮＡＮ Ｔ． Ｂｉｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ ｉｎｔｅｒｌｏｃｕｓ ｃｏｎｃｅｒｔｅｄ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ａｌｌｏｐｏｌｙｐｌｏｉｄ ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｏｔｔｏｎ（Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ）［Ｊ］． Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９９５，９２（１）：２８０－２８４．

［１１］ ＷＡＴＥＲＳ Ｅ Ｒ，ＳＣＨＡＡＬ Ｂ Ａ． Ｂｉａｓｅｄ ｇｅｎｅ ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｉｓ ｎｏｔ ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ ａｍｏｎｇ ｒＤＮＡ ｒｅｐｅａｔｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｔｒｉａｎｇｌｅ［Ｊ］． Ｇｅｎｏｍｅ，１９９６，３９（１）：１５０－１５４．