六種植物的提取物抑菌活性研究

摘要：采用生長速率法測定醉魚草、葛藤、雞血藤、狼毒、洋金花、野麻６種植物的7種樣品提取物對小麥赤霉病菌（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ）、棉花黃萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）、小麥紋枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ）、蘋果炭疽病菌（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ）、水稻紋枯病菌（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ）５種植物病原菌的離體抑菌活性，結果表明，狼毒根提取物對水稻紋枯病菌、小麥紋枯病菌和小麥赤霉病菌有較好的抑制作用，７２ ｈ的抑制率分別為９７．８２％、９４．２９％和８５．９６％；洋金花種子提取物對小麥赤霉病菌的抑制率達到１００％；醉魚草花序提取物對水稻紋枯病菌的抑制率為６１．２６％。試驗結果表明，狼毒、洋金花和醉魚草等３種植物的抑菌活性值得進一步研究。

關鍵詞：植物提取物；抑菌活性；生長速率法

中圖分類號：Ｓ４８２．２９文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）14－2880-02

Study on Antifungal Activity of the Extracts of 6 Plants

ＨU Ｌｉｎ－ｆｅｎｇ，ＨAN Ｈｕｉ－ｊｕａｎ，ＨOU Ｊｉａｎ－ｈｕ

（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｈｅｎａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｘｉｎｘｉａｎｇ ４５３００３， Ｈｅｎａｎ， Ｃｈｉｎａ ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ 7 ｅｘｔｒａｃｔｓ of 6 plants of Buddleja lindleyana， Pueraria lobata，Millettia dielsiana，Stellera chamaejasme，Datura metel，Boehmeria gracilis，ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ５ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｇｅｎs of Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ，Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ，Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ，Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ，Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ ｂｙ ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｒｏｏｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ ｈａd ｇｏｏｄ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ，Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ，Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ． Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅs ｗｅｒｅ ９７．８２％，９４．２９％ ａｎｄ ８５．９６％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｆｔｅｒ ７２ｈ． Ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｓｅｅｄ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｄａｔｕｒａ ｍｅｔｅｌ ｗａｓ １００％ ａｇａｉｎｓｔ Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ， ａｎｄ ｗｈｉｃｈ ｏｆ Ｂｕｄｄｌｅｊａ ｌｉｎｄｌｅｙａｎａ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ６１．２６％ ａｇａｉｎｓｔ Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ． Ａｌｌ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ， Ｄａｔｕｒａ ｍｅｔｅｌ ａｎｄ Ｂｕｄｄｌｅｊａ ｌｉｎｄｌｅｙａｎａ ｗｅｒｅ ｗｏｒｔｈ ｆｕｒｔｈｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈｉｎｇ ｏｎ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ； ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ； ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ

普遍使用的化學農藥對環境造成了一定的危害，從安全環保的角度來研制開發天然源農藥成為一個研究方向。對植物及其抗菌活性物質進行深入的研究，是開發和研制新型殺菌劑的重要研究領域之一［１－４］。為了尋找具有殺菌或抑菌活性的植物活性物質，試驗測定了６種植物的7種樣品提取物對５種植物病原菌的抑菌活性，現將結果報告如下。

１材料

１．１供試植物

６種植物于２００９年采自河南新鄉地區，供試植物樣品具體情況見表１。植物樣品于室內晾干、粉碎后密封，置于－４０℃冰柜中冷凍保存。

１．２供試菌種

５種植物病原為小麥赤霉病菌（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ）、棉花黃萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）、小麥紋枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ）、蘋果炭疽病菌（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ）、水稻紋枯病菌（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ），菌種由河南科技學院制藥工程生物測定實驗室提供，試驗前１周轉接至平板培養皿中培養備用。

２試驗方法

２．１供試樣品提取物的制備

供試植物樣品采用溶劑冷浸法提取。向粉碎好的植物樣品中加入９０％乙醇，樣品質量∶溶劑體積（ｇ／ｍＬ）為１∶５，冷浸３ ｄ后過濾。重復浸提３次，合并３次濾液濃縮得各樣品的乙醇提取浸膏。浸膏密封，置于４℃冰箱保存備用。

２．２抑菌活性測定

采用生長速率法［５，６］測定提取物對病原菌的離體抑菌活性。將供試樣品浸膏用溶劑（丙酮或水）配制成適當濃度溶液，與培養基混勻制成含藥平板，使含藥平板終濃度為每毫升含０．１ ｇ植物樣品提取物。試驗設置對應溶劑（丙酮或水）對照，每處理重復３次。用直徑４ ｍｍ打孔器從病菌培養平板邊緣打制菌餅，按無菌操作將菌餅倒扣接種于含藥平板中央。２５℃±２℃培養箱中培養７２ ｈ后，用十字交叉法測量菌落直徑。

２．３數據分析

按以下算式計算菌絲生長抑制率：

菌落生長直徑＝菌落直徑－菌餅直徑（４mｍ）

采用ＳＰＳＳ１３．０進行數據統計分析，數據間多重比較采用Ｄｕｎｃａｎ’ｓ新復極差法。

３結果與分析

采用生長速率法測定7種供試樣品提取物對５種病原菌的離體抑菌活性，抑菌效果見表２。結果表明，狼毒根提取物對水稻紋枯病菌、小麥紋枯病菌和小麥赤霉病菌有很好的抑制作用，抑制率分別為９７．８２％，９４．２９％和８５．９６％；洋金花種子提取物能完全抑制小麥赤霉病菌的生長；醉魚草花序提取物除對水稻紋枯病菌抑制率達到６１．２６％外，對其余供試菌的抑制率均低于５０％。供試樣品中葛藤莖、雞血藤全株和野麻種子提取物抑菌效果較差。

4討論

試驗通過測定６種植物的7種樣品提取物對５種植物病菌的抑制作用，從中篩選出具有較好殺菌活性的狼毒根和洋金花種子。狼毒含多種活性成分，在殺蟲活性方面已經開展了較為深入的研究［７，８］，但對其抑菌活性的研究還處于起步階段；洋金花的生物活性物質研究主要集中在其花組織上，通過其種子的抑菌活性試驗，發現其乙醇提取物在供試濃度下能夠完全抑制小麥赤霉病菌的生長。因此對狼毒和洋金花中的抑菌活性有必要開展深入研究，可采用活性跟蹤與植化分離相結合的方法，明確其抑菌活性成分，為其在農用殺菌劑方面的研發提供依據。

參考文獻：

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［２］ 馮俊濤，祝木金， 于平儒， 等． 西北地區植物源殺菌劑初步篩選［Ｊ］． 西北農林科技大學學報（自然科學版），２００２，３０（６）：１２９－１３３．

［３］ 胡林峰，馮俊濤，張興，等．孜然種子中殺菌活性成分分離及結構鑒定［Ｊ］．農藥學學報，２００７，９（４）：３３０－３３４．

［４］ 劉海燕，高微微，樊 瑛，等．細辛揮發油抗植物病原真菌活性初步研究［Ｊ］．植物病理學報，２００７，３７（１）：９５－９８．

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［７］ 王偉，仝寶勝，師光祿，等．瑞香狼毒粗提物對朱砂葉螨的生物活性［Ｊ］．中國農學通報，２０１０，２６（１１）：３６－３９．

［８］ 張國洲，徐漢虹．瑞香狼毒對菜粉蝶生物活性的研究［Ｊ］．西北農業學報，２００２，１１（３）：６７－７０．

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