三黃片調和物外用抑菌作用實驗研究

基金項目 甘肅省中醫藥管理局科研資助項目（GZK-2010-31）

摘 要 目的：觀察三黃片用油或水調和后外用的局部抑菌作用。方法：選取A族乙型溶血性鏈球菌制作小鼠皮下細菌感染模型，研究三黃片油和水調和物對皮下細菌感染的保護作用。結果：三黃片水調和物大、小劑量及三黃片油調和物大劑量對小鼠皮下A族乙型溶血性鏈球菌感染有明顯抑制作用，與基質對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；抑制作用從給藥至第6天最明顯。結論：三黃片調和物有明顯抑菌作用。

關鍵詞 三黃片 調和物外用 抑菌作用 A族乙型溶血性鏈球菌

體表軟組織感染是一種常見病，西醫治療效果欠佳；中藥外用治療軟組織感染，療效顯著，臨床將三黃片用油或水調和用于治療體表軟組織感染，效果較好。本實驗將三黃片水調和物和油調和物分大、小劑量組，進行抑菌作用實驗研究，以指導臨床用藥，對基層醫療發展，有重要指導意義。

資料與方法

實驗材料：①試劑三黃片，創新藥業有限公司，國藥準字Z41020981，批號0903341；食用調和油，西安市金龍魚食品有限公司，西安市衛食證字［2008］第610100-0521號，批號20100419；將三黃片研成細粉，加調和油，制備1:1（g/ml）調和物備用。將三黃片研成細粉，分別加調和油或蒸餾水，制備1:1（g/ml）調和物備用；A族乙型溶血性鏈球菌，甘肅中醫學院病原教研室提供。②動物：昆明種小鼠112只，SPF級，雌雄各半，18～22g，20±2℃控溫和光暗周期各12小時環境飼養，自由飲水，實驗動物合格證號：SCXK（甘）2010-0001號，中國農業科學院蘭州獸醫研究所實驗動物中心提供。

方法：①小鼠皮下細菌感染模型制作及方法學研究【sup】［1］【/sup】：取小鼠40只，雌雄兼用，實驗前24小時，用8%Na【sub】2【/sub】S背部脫毛，面積約2cm×2cm，按體重隨機分為8組。取適當濃度A族乙型溶血性鏈球菌菌液，用平皿表面活菌計數法測定菌液活菌數，濃度8.0×10【sup】8【/sup】CFU（個）/ml，用5%高活性干酵母以10倍稀釋成不同濃度的受試菌液，分別取3ml菌液加入7ml瓊脂（3%，NS，60℃保溫）制備染菌載體，分別取染菌載體0.4ml于小鼠背部脫毛區皮下注射，隆起皮丘者納入試驗，對各小鼠于注射后24小時，第2～7天按評分標準評分，以7天內引起100%死亡（評分總分值50）的最小菌液濃度作為實驗時進行感染動物的菌液濃度［結果得最小菌液濃度2.4×10【sup】4【/sup】CFU（個）/ml］。②三黃片調和物對小鼠皮下細菌感染的保護作用：取小鼠72只，雌雄兼用，體重18～22g，隨機分成6組，每組12只，設空白對照組、陽性對照組、三黃片油和水調和物大劑量組和小劑量組。給藥前動物背部兩側脫毛。各組小鼠分別在脫毛區涂調和油0.4g/只、魚石脂軟膏0.2g/只、三黃片油調和物0.4g/只、三黃片油調和物0.2g/只、三黃片水調和物0.4g/只、三黃片水調和物0.2g/只，1次/日，連續3天，末次給藥6小時后，空白對照組各小鼠皮下注射3%瓊脂0.4ml，其余各組小鼠以終濃度2.4×10【sup】4【/sup】CFU（個）/ml皮下注射染菌載體0.4ml，注意無菌操作。繼續涂藥，連續6天，每次涂藥前按表10給每只小鼠評分，記錄總分值，組間差異采用秩和檢驗，結果，見表1。

統計學處理：所得數據應用SPSS13.0統計軟件包進行方差分析，組間資料比較用t檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

結 果

三黃片水調和物大、小劑量及三黃片油調和物大劑量對小鼠皮下A族乙型溶血性鏈球菌感染有明顯抑制作用，與基質對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；抑制作用從給藥至第6天最明顯。

討 論

體表軟組織感染是常見病，多發病，中醫藥外用治療軟組織感染等疾病歷史悠久，藥物通過皮膚吸收，直達病所，療效確切，物美價廉，在諸多領域有獨特優勢。三黃片是一種臨床常用的中成藥，具有清熱解毒、瀉火通便作用，在缺少外用藥的基層，將三黃片用水或油調和外用，治療體表軟組織感染，取得了較好的療效【sup】［2］【/sup】。一般認為三黃片由東漢張仲景《金匱要略》瀉心湯方劑得來，1997年收載于部版標準【sup】［3］【/sup】，由大黃、黃芩、黃連3味藥組成；含有大黃素、大黃酚、鹽酸小檗堿、黃芩苷等主要成分，是祖國醫學寶庫中的傳統有效方劑【sup】［4］【/sup】，臨床研究三黃片中黃芩黃連煎劑對痢疾桿菌、白喉桿菌、綠膿桿菌、傷寒桿菌、副傷寒感菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌、肺炎雙球菌、腦膜炎球菌、霍亂弧菌以及金黃色葡萄球菌皆有較強的抗菌作用【sup】［5］【/sup】，但相關外用臨床研究較少。本實驗選取A族乙型溶血性鏈球菌制作小鼠皮下細菌感染模型，研究三黃片油和水調和物對皮下細菌感染的保護作用。結果顯示，三黃片水調和物大、小劑量及三黃片油調和物大劑量對小鼠皮下A族乙型溶血性鏈球菌感染有明顯抑制作用，與基質對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；抑制作用從給藥至第6d最明顯，從而證實三黃片調和物外用的的抑菌作用，為三黃片調和物外用治療局部軟組織感染，提供了理論基礎；本試驗結果可更好指導臨床，為三黃片“老藥新用”提供了指導。且本實驗結果顯示，三黃片用油調和外用，僅大劑量組較對照組有統計學意義，而用水調和后，大、小劑量組均有統計學意義。提示三黃片調和外用，用水調和可能較用油調和作用更佳。從理論上中藥成分多為脂溶性，當更易溶解于油，用油調和可能作用更好，分析原因可能與所用藥物為片劑，研細后與賦形劑淀粉在油中顆粒被包裹，不易溶解，藥物皮膚滲透差，而相對更易溶于水有關，得出與水調和效更好的結論，若選用單獨藥物成分，結果可能會有改變。結合臨床外用療效可靠，將三黃片傳統藥片搗碎，用水或油調和成糊狀，外敷治療體表軟組織感染，方便經濟，效果好，安全性高，在廣大基層推廣應用，可節省醫藥資源，便于推廣，對服務基層醫療有重要意義；為其他中成藥外用提供指導。

參考文獻

1 陳奇，主編.中藥藥理研究方法學.北京:人民衛生出版社，2006:262.

2 高學敏，主編.中藥學［S］.北京:中國中醫藥出版社，2007:96-98.

3 葛金玉.三黃片臨床新用舉隅［J］.新疆中醫藥，1997，15（3）:55.

4 中華人民共和國衛生部藥典委員會.《中華人民共和國衛生部藥品標準》中藥成方制劑第12冊［S］.

5 國家藥典委員會.中國藥典（一部）［S］.北京:化學工業出版社，2005:328.

表1 三黃片調和物對小鼠皮下細菌感染的影響