兩種HIV抗體診斷試劑盒檢測(cè)早期感染的比較

[摘要] 目的 比較兩種HIV抗體診斷試劑盒檢測(cè)HIV早期感染的性能。方法 采用兩種試劑盒對(duì)血液樣本進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)其中5份HIV抗體陽(yáng)性血漿樣品進(jìn)行稀釋，然后用ELISA檢測(cè)。對(duì)檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性反應(yīng)的稀釋樣品分別用兩種HIV抗體確證試劑盒進(jìn)行檢測(cè)以測(cè)試其靈敏度，比較兩種試劑盒檢測(cè)結(jié)果及靈敏度。結(jié)果 兩種方法共檢出91份陽(yáng)性，確證68份陽(yáng)性標(biāo)本，其余23份確證為陰性。北京萬(wàn)泰試劑盒和英科新創(chuàng)試劑盒檢測(cè)假陽(yáng)性率分別為13.92%和15.00%，兩種試劑盒假陽(yáng)性率相似（P＞0.05）；2份質(zhì)控品英科新創(chuàng)試劑出現(xiàn)漏檢；其中有2套系列稀釋樣品英科新創(chuàng)已顯示為陰性，北京萬(wàn)泰仍能檢出陽(yáng)性，且稀釋8倍時(shí)北京萬(wàn)泰試劑仍檢出陽(yáng)性。結(jié)論 北京萬(wàn)泰診斷試劑盒與英科新創(chuàng)診斷試劑盒相比，可以更靈敏地檢測(cè)出HIV抗體。

[關(guān)鍵詞] HIV；抗體；艾滋病血清學(xué)診斷；酶聯(lián)免疫法

[中圖分類號(hào)] R446.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2011）26-87-02

Comparison of Two HIV Antibody Diagnostic Reagent Kit in Confirming Early HIV Infection

ZHOU Jiaoping GAO Jialiang PAN Tengfei YU Songyi

Clinical Laboratory Department，the People's Hospital of Yinzhou District in Zhejiang Province，Ningbo 315040，China

[Abstract] Objective To compare the performance of two HIV antibody diagnostic reagent kit in confirming early HIV infection. Methods All plasma specimens were detected by the two kits，five HIV antibody-positive plasma specimens were diluted and detected by ELISA．The above diluted specimens were detected with the two HIV antibody diagnostic reagent kits to analyze their sensitivity. Results All 91 samples had been diagnosed with the two kits，68 samples were confirmed，the others 23 samples were negative. The FPR of Wantai-RIBA kits and InTec kits were 13.92% and 15.00%. The FPR of two kits were similar（P＞0.05）. Two Samples QC specimens had been not detected by InTec kits，and two samples were diluted to 8 fold still been detected by Wantai-RIBA kits. Conclusion Compared with InTec，Wantai-RIBA diagnostic reagent kit have the better sensitivity of diagnosticing HIV antibody.

[Key words] HIV；Antibody；AIDS serodiagnosis diagnosis；ELISA

HIV感染的發(fā)病率在不斷升高，早期的診斷是及時(shí)防護(hù)和治療的關(guān)鍵。HIV抗體檢測(cè)是目前較為普遍的診斷方式，依據(jù)2009年修訂版《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》制定的常規(guī)程序分為篩查試驗(yàn)和確證試驗(yàn)兩個(gè)步驟，篩查試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，必須再做確證試驗(yàn)以明確診斷[1]。HIV抗體診斷試劑種類很多，目前普遍采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)，具有敏感性高、特異性強(qiáng)特點(diǎn)。本研究選擇兩種國(guó)產(chǎn)人類免疫缺陷病毒HIV（1+2型）抗體診斷試劑盒進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，觀察兩者的準(zhǔn)確性及靈敏度，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

標(biāo)本收集于2006年1月~2011年6月送檢的8349份血液樣本。血漿標(biāo)本的分離、保存和離心等嚴(yán)格按照試驗(yàn)室規(guī)范操作，并經(jīng)寧波市疾病控制中心HIV確證實(shí)驗(yàn)室確證。

1.2 試劑及儀器

人類免疫缺陷病毒HIV（1+2型）抗體診斷試劑盒（分別來(lái)自北京萬(wàn)泰生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)I20101206和英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司，批號(hào)20111104）。所用儀器美國(guó)伯樂(lè)公司BIO-RAD MODEL680型酶標(biāo)儀，BIO-RAD MODEL1575型洗板機(jī)；北京市醫(yī)療設(shè)備廠電熱三用水浴箱BS2-Ⅰ型。質(zhì)控品來(lái)自于美國(guó)伯樂(lè)公司（編號(hào)00101，批號(hào)E10F205）。所用試劑均經(jīng)衛(wèi)生部生物制品所批檢，并在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法

嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書對(duì)所有血液標(biāo)本同時(shí)使用兩種試劑進(jìn)行HIV檢測(cè)初試，檢測(cè)結(jié)果不相符及陽(yáng)性血樣進(jìn)行雙孔復(fù)試，后經(jīng)寧波市疾病控制中心HIV確證實(shí)驗(yàn)室免疫印跡法確證。對(duì)其中5例HIV抗體陽(yáng)性血漿樣品進(jìn)行稀釋，然后用ELISA檢測(cè)。對(duì)檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性反應(yīng)的稀釋樣品分別用兩種HIV抗體確證試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。兩種試劑盒對(duì)10份質(zhì)控品進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS16.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，率的比較行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種試劑盒檢測(cè)結(jié)果

8349份血液樣本，經(jīng)兩種試劑盒平行檢測(cè)，共檢測(cè)出91份陽(yáng)性標(biāo)本，其中北京萬(wàn)泰試劑檢測(cè)陽(yáng)性79份和英科新創(chuàng)試劑檢測(cè)陽(yáng)性80份，由寧波市疾病控制中心HIV確證實(shí)驗(yàn)室確證68份陽(yáng)性標(biāo)本，其余23份確證為陰性，檢出率為0.814%（68/8349）。其中11份（13.92%）北京萬(wàn)泰試劑檢測(cè)結(jié)果為假陽(yáng)性，而英科新創(chuàng)均為真陰性；其余12份（15.00%）英科新創(chuàng)檢測(cè)結(jié)果為假陽(yáng)性，萬(wàn)泰試劑檢測(cè)為真陰性，英科新創(chuàng)和北京萬(wàn)泰假陽(yáng)性率相似，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.239，P＞0.05）。見表1。

2.2 兩種試劑對(duì)于質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果

兩種試劑對(duì)10種質(zhì)控品進(jìn)行平行檢測(cè)，2份英科新創(chuàng)試劑出現(xiàn)漏檢（S/CO值為0.4~0.6），北京萬(wàn)泰試劑均檢出陽(yáng)性（S/CO值為1.75~2.50）。

2.3 兩種對(duì)確證標(biāo)本稀釋后檢測(cè)結(jié)果

對(duì)5個(gè)確證陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行稀釋，其中有2套系列稀釋樣品英科新創(chuàng)已顯示為陰性，北京萬(wàn)泰仍能檢出陽(yáng)性。北京萬(wàn)泰試劑盒靈敏度較英科新創(chuàng)試劑盒高，確證陽(yáng)性標(biāo)本及其稀釋標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果見表2。

3 討論

目前，我國(guó)HIV感染人數(shù)不斷增長(zhǎng)，并呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。本院近5年共檢出68例HIV陽(yáng)性感染者，檢出率為0.814%，而2011年1~6月我院已檢出17例HIV陽(yáng)性患者，較往年明顯增加。隨著社會(huì)的發(fā)展，人們健康意識(shí)的提高，更多的高危人群接受HIV檢測(cè)，因此，在受檢人群擴(kuò)大的情況下，可能會(huì)出現(xiàn)檢出率的升高[2]。為了能滿足檢測(cè)需求，盡量避免假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果的出現(xiàn)，選擇試劑成為重要的環(huán)節(jié)。本研究選擇了目前較為普遍使用的兩種HIV抗體診斷試劑盒進(jìn)行檢測(cè)對(duì)比，兩種試劑盒均為我國(guó)自行研制生產(chǎn)的產(chǎn)品，價(jià)格方面相較進(jìn)口產(chǎn)品具有明顯的優(yōu)勢(shì)，符合臨床減輕患者負(fù)擔(dān)、優(yōu)化醫(yī)療資源的目標(biāo)[3，4]。本研究結(jié)果顯示，檢測(cè)效果方面兩種試劑盒均存在一些假陽(yáng)性，但是兩者之間的差異不明顯。HIV不僅是一種病原體，其帶來(lái)的后果也讓人們對(duì)之產(chǎn)生恐懼，而假陽(yáng)性可能會(huì)帶來(lái)一些不必要的糾紛。兩種試劑盒均屬于第4代試劑，其在固相載體上同時(shí)包被抗p24的單克隆抗體和HIV抗原，可能相互干擾，影響了免疫反應(yīng)的特異度。篩查實(shí)驗(yàn)需有較高的敏感度，如果具備較好的確證試驗(yàn)，可容許篩查試驗(yàn)試劑特異度稍低[5，6]。兩者對(duì)質(zhì)控品進(jìn)行平行檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)英科新創(chuàng)存在漏檢的情況，北京萬(wàn)泰表現(xiàn)良好。而對(duì)稀釋確證陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)比較發(fā)現(xiàn)，北京萬(wàn)泰的靈敏度更高。

綜上所述，兩種國(guó)產(chǎn)試劑檢測(cè)性能之間存在一定的差異，北京萬(wàn)泰與英科新創(chuàng)診斷試劑盒相比，可以更靈敏地檢測(cè)出HIV抗體。而在臨床檢測(cè)過(guò)程中本著對(duì)患者負(fù)責(zé)的態(tài)度，應(yīng)加強(qiáng)各方面的準(zhǔn)備，應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控血清對(duì)試劑進(jìn)行質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)，并以國(guó)家權(quán)威機(jī)構(gòu)的試劑評(píng)估結(jié)果為選用試劑盒的依據(jù)。還應(yīng)該加強(qiáng)檢驗(yàn)人員的業(yè)務(wù)培訓(xùn)，避免HIV陽(yáng)性樣品漏檢，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確有效，并且必須經(jīng)由確證試驗(yàn)證實(shí)。

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（收稿日期：2011-06-29）