XE-2100血液分析儀兩種血小板測定方法對血液病患者血小板計數的影響

[摘要] 目的 通過XE-2100血液分析儀電阻抗法（PLT-I法）和熒光染色激光散色法（PLT-O法）檢測血液病患者血小板數量，探討兩種方法對血液病患者血小板計數的準確性。方法 以50例健康者和150例血液病患者的外周血為研究對象，采用XE-2100血液分析儀PLT-I法、PLT-O法和顯微鏡法同時測定血小板，以顯微鏡法結果為參考。結果 健康者用PLT-I法和PLT-O法測定血小板與顯微鏡法比較差異無統計學意義（P＞0.05）。血液病患者PLT-O法測定血小板與顯微鏡法比較差異無統計學意義（P＞0.05）， 但PLT-I法測定血小板與顯微鏡法比較差異有統計學意義（P＜0.05）。結論 XE-2100血液分析儀在測定血液病患者的血小板時，用PLT-O法有較好的準確性。

[關鍵詞] XE-2100血液分析儀；血液病；血小板測定；準確性

[中圖分類號] R558 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）26-53-02

The Impact of Platelet Counting Setected by XE-2100 Automatic Hematology Analyzer in Hematological Patients

PENG Songqing WU Xiaolai

Department of Laboratory，Shengzhou City People's Hospital in Zhejiang Province Shengzhou City，Shengzhou 312400，China

[Abstract] Objective To analyze the accuracy of electric impedance （PLT-I） method and optical （PLT-O） method for platelets counting by XE-2100 hematology analyzer in hematological patients. Methods The blood samples from 50 healthy person and 150 hematological patients were collected for platelet counting. The platelet of these samples were simultaneously assayed by PLT-I method and PLT-O method with reference to manual counting. Results When the blood from healthy person was assayed by PLT-I method and the determination of platelet PLT-O， the result of platelet counting was not significant different in comparison with manual counting（P＞0.05）. When the blood from hematological patients was assayed by PLT-I method and PLT-O，the result of platelet counting by PLT-O method was no significant different compared with manual counting（P＞0.05）， whereas the result of platelet counting by PLT-I method was significantly different compared with manual counting （P＜0.05）. Conclusion Blood platelets from hematological patients were assayed by XE-2100 hematology analyzer； PLT-O method has a good accuracy.

[Key words] XE-2100 hematology analyzer； Blood disease； Platelet counting； Accuracy

目前各種型號的血液分析儀已廣泛應用于臨床，實驗室對血液分析儀器的要求也在逐漸提高，而為實驗室和臨床關注的有核紅細胞、幼稚白細胞、異常血小板等測定的正確性問題，已成為臨床檢驗工作者關注的焦點。臨床工作中有一部分標本特別是血液病患者標本存在巨大血小板、血小板聚集、小紅細胞及細胞碎片等干擾血小板計數[1，2]，從而影響血小板測定結果的正確性。本文旨在比較和分析XE-2100血液分析儀PLT-I法和PLT-O法對某些血液病患者血小板測定的準確性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

1.1.1 健康組 50例為健康體檢未發現異常的健康者，其中女25例、男25例，平均年齡37歲。

1.1.2 血液病患者組 150例為2008年1月～2011年3月在嵊州市人民醫院門診及住院患者，其中再生障礙性貧血（AA）20例，男8例、女12例，平均年齡39歲；缺鐵性貧血（IDA）女性患者30例，平均年齡36歲；特發性血小板減少性紫癜（ITP）女性患者20例，平均年齡47歲；急性粒細胞性白血病（AML）20例，男14例、女6例，平均年齡50歲；慢性粒細胞性白血病（CML）20例，男13例、女7例，平均年齡61歲；多發性骨髓瘤（MM）20例，男15例、女5例，平均年齡59歲；惡性淋巴瘤20例，男7例、女13例，平均年齡56歲，上述所有患者均診斷明確。

1.2 儀器與試劑

XE-2100血液分析儀、配套試劑（上海科華公司）及全血質控品（日本東亞公司）。CX21型Olympus顯微鏡（歐林巴斯光學工業株式會社）；牛鮑改良血細胞計數板；20μL微量采血管；EDTA-K2抗凝真空采血管（浙江康是公司）。血小板計數液（草酸銨法稀釋液）按照《全國臨床檢驗操作規程》第3版配制[3]。

1.3 方法

1.3.1 采血 用EDTA-K2抗凝真空采血管采健康者及血液病患者肘靜脈血2mL，充分混勻。

1.3.2 血液分析儀和手工顯微鏡法血小板測定 先在XE-2100血液分析儀用PLT-I法和PLT-O法檢測血小板，再用顯微鏡法按標準操作規程計數血小板[3]，每份標本2次計數，誤差小于10%，取均值與PLT-I法、PLT-O法結果相比較。

1.3.3 統計學方法 應用SPSS10.0統計軟件處理，血小板測定結果以（χ±s）表示，組間比較用方差分析。

2 結果

2.1 PLT-I法、PLT-O法血小板計數精密度結果

見表1。兩種血小板測定方法精密度（CV）均在儀器容許范圍內，但是PLT-O法CV高于PLT-I法。其中儀器血小板測定精密度容許范圍CV＜4.0%。

2.2 XE-2100血液分析儀PLT-I法、PLT-O法與顯微鏡法血小板計數結果比較

健康者在XE-2100血液分析儀上用PLT-I法和PLT-O法測定血小板與顯微鏡法比較差異無統計學意義（P＞0.05）；血液病患者PLT-O法測定血小板與顯微鏡法比較差異無統計學意義（P＞0.05）， 但PLT-I法測定血小板與顯微鏡法比較差異有統計學意義（P＜0.05），測定結果見表2。

3 討論

血小板測定是臨床血液性疾病診斷最重要的全血指標之一，由于血小板體積小，容易發生粘附、聚集和變性破壞，而且檢測時干擾因素較多，常難以得到正確的計數結果。許多儀器（如電阻抗型血細胞分析儀）測定血小板有較好的重復性，但對巨大血小板、血小板凝集、小紅細胞或細胞碎片等標本往往無法得到準確的結果。顯微鏡法計數血小板操作繁瑣且費時，重復性差，不適合大批量操作，因此靈敏、快速、準確地檢測血小板具有重要的實際臨床意義。

本文對XE-2100血液分析儀PLT-I法與PLT-O法在某些血液病患者中血小板計數的準確性進行了比較和分析。XE-2100測定血小板有兩種檢測方法，即電阻抗法（PLT-I法）和熒光染色激光散色法（PLT-O法）。PLT-I法采用紅細胞/血小板檢測通道，利用鞘流電阻原理檢測血小板，其優點鞘流電阻法檢測的顆粒數多，能達到20~25萬顆粒，而且檢測時沒有細胞并行，因此檢測的重復性較好，無需特殊試劑因而經濟實用，缺點是檢測的顆粒信號不能反映體積（2～20 fl）以外的其他方面的信息，如標本中存在的小紅細胞、細胞碎片、細菌、雜物等，依靠體積信號辨別則無法解決。PLT-O法采用血小板/網織紅細胞檢測通道，采用的光源為633nm波長的半導體激光束，染料為Plymethine（聚次甲基）和Oxazine（惡嗪），因血小板體積較小，但是顆粒中存在少量RNA，可被染料輕微著色而激發出熒光，同時通過前向散射光檢測顆粒大小、熒光強度反映細胞內核酸的含量，對于巨大血小板或凝集塊、細胞碎片、小紅細胞等特殊標本則更能取得準確的結果，因此對血液病患者標本檢測時有較好的正確性，但是PLT-O法檢測的顆粒一般僅4~6萬個，重復性會略遜于PLT-I法。

骨髓造血功能指標之一是血小板的數量和質量，正確的血小板結果對血液病的診斷、治療及預后有著重要意義[4]。臨床實際工作中可用PLT-I法作為常規標本檢測，當遇到某些血液病患者或一些特殊標本（如混有大型血小板或小球性紅細胞時或細胞碎片等），儀器屏幕和報告單上會有一標記“”提示PLT-I結果可信度低（血小板異常），建議使用PLT-O法再次檢測，使血小板結果更加可信，這樣可節約試劑成本、降低復查次數，但在一些特殊病例如EDTA依賴性的血小板聚集時應與顯微鏡法復核，使結果更準確、可靠。

[參考文獻]

[1] Tatsumi N，Tsuda I，Funahara Y．Assessment of he-matological data obtained by the aperture impedancemethod in blood from patients with thalassemia or he-moglobinpoathy[J]．ICMR Annals，1998，8（1）：49-60.

[2] Nakagoshi R．Abnomal cases of platelet distribution[J]．Med Tech，1991，40（1）：41-48．

[3] 葉應嫵，王毓三．全國臨床檢驗操作規程[M]．第3版．南京：東南大學出版社，2006：136-137．

[4]李振．惡性腫瘤的化學治療與免疫治療[M]．北京：人民衛生出版社，1996：10-16．

（收稿日期：2011-06-14）