MGB-2在卵巢上皮性癌組織中的表達及其與化療耐藥的相關性研究*

[摘要]目的 探討卵巢上皮性癌組織中乳球蛋白-2（mammaglobin-2，MGB-2）的表達及其與卵巢癌化療耐藥的關系及臨床意義。方法 73例卵巢癌患者根據臨床治療情況分為化療耐藥組（25例）與非耐藥組（48例），采用免疫組化法測定兩組癌組織中MGB-2的表達，并探討其與化療耐藥的關系；采用多因素Logistic回歸分析法探討卵巢癌患者的年齡、手術病理分期、病理類型及分級、殘留灶直徑、化療方案及三者的表達與卵巢癌化療耐藥的關系。 結果 MGB-2的陽性表達率顯示：耐藥組為96%（24/25），明顯高于非耐藥組[68%（33/48）]（P＜0.01）；多因素分析顯示：MGB-2表達與卵巢癌的手術病理分期均為與耐藥及預后相關的獨立危險因素。結論 卵巢癌組織中MGB-2的高表達是卵巢癌化療耐藥及預后差的危險因素。

[關鍵詞] MGB-2；卵巢腫瘤；卵巢上皮性癌；藥物耐受

[中圖分類號] R737.31 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）26-45-02

Immunohistochemical Expression of MGB-2 in Ovarian Epithelial Carcinoma and Its Correlation with Drug Resistance of Chemotherapy

ZHANG Yuyang 1 ZHENG Feiyun 1 CHEN Fengdi 1 HE Qiuxiang 2

1.Department of Gynecology，the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou 325000，China；2.Department of Pathology，the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College， Wenzhou 325000，China

[Abstract] Objective To investigate the possible correlation between the expression of MGB-2 in tumor tissues and the response to patients with ovarian epithelial carcinoma. Methods Seventy-three patients were divided into drug resistant group （n=25） and drug sensitive group（n=48）.The antigens of MGB-2 in ovarian cancer tissues were tested by immunohistochemistry. Logistic regression was employed to analyze the correlation between drug resistance and factors including patients′age，clinical stage，pathological degree and type of tumors， chemotherapy methods，operative results and the expression of MGB-2 in tumors. The disease prognosis was analyzed by multivariate COX regression. Results In the drug resistance group， the expressions of MGB-2 were significantly higher than the drug sensitive group（P=0.008）. According to multivariate analysis，the expression of MGB-2 and clinical stage were independent factors correlate with drug resistance and disease prognosis for the patients with ovarian epithelial carcinoma. Conclusion The high expressions of MGB-2 in ovarian epithelial carcinoma are risk factor for drug resistance and poor disease prognosis.

[Key words] MGB-2；Ovarian cancer；Carcinoma；Drug tolerance

卵巢癌患者進行化療時約1/3的患者會出現耐藥，進而增加了其死亡率[1]。近年研究顯示，腫瘤細胞表面黏附的分子與其周圍的細胞外基質相互作用，從而促進腫瘤的侵襲和轉移，進而導致患者對化療藥物的耐藥[2]。細胞黏附介導的耐藥（cell adhesion mediated drug resistance）是新近提出的腫瘤細胞的一個耐藥機制[3]，而乳球蛋白-2（mammaglobin-2，MGB-2）在惡性的實體瘤組織中具有高表達[4]，本研究旨在探討卵巢上皮性癌組織中MGB-2的表達，并報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

我院2003年1月～2009年12月確診卵巢癌患者共73例，術前均未接受放化療或激素治療。 年齡最小25歲，最大74歲，平均齡54.3歲。病理類型：漿液性囊腺癌50例、黏液性囊腺癌8例、子宮內膜樣癌6例、未分化癌4例、透明細胞癌3例、混合性癌2例。病理分期：Ⅰ期16例、Ⅱ期9例、Ⅲ期40例、Ⅳ期8例。病理分級：G18例、G2 27例、G3 38例。其中：（1）非耐藥組48例：術后化療1個療程，CA125下降至原水平的50％，化療2個療程降至正常水平者視為CA125下降滿意。（2）耐藥組25例：患者在停用一線化療后6個月以上出現下列情況之一視為復發，CA125持續升高、身體檢查發現包塊、影像學檢查發現包塊、出現不明原因的腸梗阻或經過手術及術后各種治療，CA125未降至正常或疾病迅速進展導致死亡。

1.2 研究方法

應用MGB-2單克隆兔抗人抗體，購自美國Santa Cruz公司。二抗鼠抗體購自福州邁新公司。采用SP免疫組化法：10%福爾馬林液固定，常規石蠟包埋，5μm厚連續切片，分別做HE和免疫組化染色。MGB-2抗原微波修復，切片標本經H2O2封閉后滴加適量稀釋一抗，4℃孵育過夜后加入二抗，DAB顯色，HE復染。

1.3 結果判定

根據陽性細胞數與染色強度對免疫組化結果進行半定量分析[4]。染色強度：0分為染色強度與背景無明顯差異，1分：淡黃色，3分：黃色至棕黃色，2分的染色強度介于1～3分間；另外每一張切片計數10個高倍視野的細胞，陽性細胞數＜10%為0分，10%～30% 為1分，30%～70%為2分，≥70%為3分。將兩種計分相加，0分為陰性（-），2分為為弱陽性（+），3～4分為中度陽性（+ +），5～6分為強陽性（+++）。

1.4 統計學方法

所有數據均采用SPSS16.0軟件進行分析處理，其中計數資料采用卡方檢驗。并多因素Logistic回歸分析及采用Cox回歸模型分析相關參數，P＜0.05表示差異存在統計學意義。

2 結果

2.1 兩組中MGB-2的表達

見表1。

2.2 兩組單因素分析

對兩組患者進行單因素分析，表2結果顯示，兩組在病理分期、殘留灶直徑方面比較，差異有顯著統計學意義（P＜0.05），而在病理類型、病理分級、化療方案方面，兩組間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 卵巢癌化療耐藥的多因素分析

將兩組患者的病理分期、病理分級、病理類型、化療方案、殘留灶直徑、MGB-2的表達納入因變量進行多因素Logistic 回歸分析，如表3結果顯示，卵巢癌的病理分期、MGB-2的表達是與卵巢癌化療耐藥密切相關的獨立危險因素。

3 討論

卵巢癌是婦科惡性腫瘤的首要死亡原因，約80%的患者就診時已是晚期，而晚期患者的5年生存率僅為15%～25%，相比之下，早期卵巢癌患者的5年生存率接近90%[1]。臨床上卵巢癌化療耐藥近年來已經成為一個難題，因此，探討其耐藥機制并采取針對性的措施至關重要。近年來研究發現，腫瘤耐藥與腫瘤細胞的黏附成分及黏附能力改變以及由此導致的細胞骨架重排激活多個信號傳導通路有關[5]，從而提出腫瘤耐藥的一個新的機制即細胞黏附導致的腫瘤細胞耐藥。

腫瘤細胞通過與周圍環境的黏附作用提高細胞的存活及抗凋亡作用。 腫瘤細胞的生長以及轉移均與耐藥密切相關，耐藥的腫瘤細胞轉移侵襲能力更強。Osmak M等研究發現宮頸癌耐藥株細胞中uPA和PAI-1的表達明顯高于非耐藥株。本研究在卵巢癌患者中采用其癌組織標本，結合患者的臨床資料進行其耐藥機制的研究[6]。

本研究結果顯示，耐藥組乳球蛋白-2（mammaglobin-2，MGB-2）陽性表達率明顯高于非耐藥組；且多因素回歸分析證實，卵巢癌的病理分期及MGB-2是與化療耐藥密切相關的獨立性因素。而對卵巢癌患者的病理分級、化療方案及與化療耐藥無明顯相關性，在進行單因素分析時顯示，腫瘤的殘留灶直徑與化療耐藥相關[7]。Becker等研究發現MGB-2基因可能是哺乳動物多基因家族的成員之一，在惡性實體瘤組織中高表達，但在卵巢癌組織中少有文獻報道[8]。本研究結果顯示，MGB-2表達水平與卵巢癌上皮性癌患者病理分期等因素密切相關，說明MGB-2表達對卵巢癌上皮性癌細胞的轉移潛能可能有一定的促進作用[9]，因此，更深入了解引起化療耐藥的機制，將會為化療方案的選擇提供新的指導依據。

[參考文獻]

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（收稿日期：2011-06-29）