卵巢上皮性癌患者血清TK1濃度的檢測及臨床意義

【摘要】 目的 觀察卵巢癌患者血清細胞質胸苷激酶（TK1）濃度的變化，初步探討其臨床意義。方法 免疫印跡增強發光法檢測30例卵巢良性上皮性腫瘤、75例卵巢上皮性癌、40名健康婦女血清TK1濃度。結果 41.33%(31/75)宮頸癌患者患者血清TK1為陽性，平均濃度為(2.99±1.09) pM，顯著高于卵巢良性腫瘤組或健康對照組（P<0.05）；宮頸癌患者TK1濃度隨臨床分期的進展而增高，Ⅲ-Ⅳ患者的血清濃度出率高于Ⅰ、Ⅱ期患者，差異有統計學意義（P<0.05）；術后宮頸癌患者血清TK1濃度為(1.09±0.31) pM，與術前相比顯著降低（P<0.05）。結論 血清TK1濃度對宮頸癌患者的診斷、預后及療效的評價具有潛在的應用價值。

【關鍵詞】 卵巢癌； 細胞質胸苷激酶； 臨床意義

Study on patients with ovarian epithelial carcinoma and serum TK1 concentration detection and its clinical significance ZHOU Huan，CHEN Min，FAN Li，et al.The 4th Peoples Hospital of Wuxi City，Wuxi 215006，China

【Abstract】 Objective To study the concentration and clinical significance of Cytosolic Thymidine Kinase (TK1) in patients with ovarian cancer.Methods A chemiluminescent dot blot assay was employed to determine the serum concentration of TK1 in healthy women，patients with benign ovarian tumor，or epithelial ovarian carcinoma.Results The serum concentration of TK1 in patients with ovarian cancer was (2.99±1.09) pM which was significantly higher than that in patients with benign ovarian tumor or health donors(P<0.05).The serum concentration of TK1 in patients with epithelial ovarian carcinoma increased with advance of the clinical stages.The concentration in Ⅲ- Ⅳ patients was significant higher than that in Ⅰ，Ⅱpatients(P<0.05).Furthermore，the serum concentration of TK1 in patients was significantly decreased to (1.09±0.31) pM after surgical resection.Conclusion There was potentially clinical application value of Cytosolic Thymidine Kinase for diagnosis，prognosis and evaluation or curative effecting for epithelial ovarian carcinoma.

【Key words】 Cytosolic Thymidine Kinase； Ovarian Cancer； Clinical significance

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卵巢上皮性癌是婦科惡性腫瘤中病死率最高的腫瘤，其5年生存率大約為39%［1］。雖然包括腫瘤細胞減滅術以及隨后系統的紫杉醇加鉑類化療的標準治療已經部分改善了患者的生存時間［2］，但美國癌癥協會2006年美國惡性腫瘤發病率、死亡率的數據表明，目前為止卵巢上皮性癌的死亡率仍遠遠超過其他任何一種婦科生殖系統惡性腫瘤。胸苷激酶（TK）是DNA合成的關鍵酶，與細胞的增殖、分裂密切相關，細胞內胸苷激酶濃度在細胞周期中呈周期性變化。TK1在多種惡性腫瘤中異常升高，并且血清中TK1濃度可作為腫瘤惡性程度、復發或預后的指標。本研究通過免疫印跡增強發光檢測了卵巢良性上皮性腫瘤、卵巢交界性上皮性腫瘤、卵巢上皮性癌及健康婦女血清TK1濃度，并對其臨床意義進行了初步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2007年12月~2011年5月期間無錫市第四人民醫院收治、經病理檢查確診的30例卵巢良性上皮性腫瘤（漿液性囊腺瘤9例、黏液性囊腺瘤21例），75例卵巢上皮性癌（漿液性囊腺癌60例、黏液性囊腺癌15例）患者為研究對象。健康對照組（40例）為同期經無錫市第四人民醫院健康體檢中心體檢的健康女性。卵巢癌患者年齡45~74歲，平均 （57.1±12.9）歲，；非卵巢癌患者年齡45~77歲，平均（53.6±10.8）歲。卵巢上皮性癌患者均為首發病例，術前 3個月內均未應用任何激素類藥物治療，未行化療或放療。手術病理分期按國際婦產科聯盟（FIGO）2000年標準:Ⅰ期 11例，Ⅱ期14例，Ⅲ期41例，Ⅳ期9例。高分化18例，中分化15例，低分化42例。

1.2 主要試劑、儀器 血清TK1檢測試劑盒、TK1標準品及CIS-1型化學發光成像系統均購自深圳華瑞（深圳華瑞同康，深圳）。

1.3 標本收集及處理 卵巢患者分別于手術前、術后一周采集外周血。患者或健康對照組清晨空腹采集靜脈血2 ml，2 h內分離血清，分裝于Eppendorf管中，-80 ℃冰箱凍存，備用。

1.4 血清TK1測定 TK1濃度測定參照試劑盒說明書，簡要如下。冰凍血清于37 ℃水浴箱充分溶解，將3 μl的血清標本或標準品點樣于硝酸纖維素膜上（Hyband-C，購于Amersham公司），10%小牛血清封閉30 min后，加入抗-TK1 IgY抗體（華瑞同康，深圳，中國），并孵育2 h；洗滌后加生物素化的二抗并在常溫下孵育40 min；接著將膜浸泡于含鏈菌親和素-辣根過氧化酶的TBS緩沖液反應1 h；洗滌后再加入ECL發光試劑；斑點的強度采用CIS-1型化學發光成像分析系統檢測。

1.5 統計學處理 采用SPSS統計軟件分析，兩組間差異采用t檢驗，兩組以上采用方差分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 卵巢上皮性癌患者與良性患者、正常人血清TK1濃度的比較 對75例卵巢上皮性癌患者、30例卵巢良性患者及40名健康婦女血清測定發現，41.33%(31/75)宮頸癌患者血清TK1高于參考值（2 pM），平均濃度為(2.99±1.09) pM，顯著高于其他兩組（P<0.05）。良性腫瘤組或健康對照組血清TK1濃度分別為(0.46±0.13) pM、(0.40±0.10) pM，兩組間無顯著差異(P>0.05)。見表1。

2.2 卵巢上皮性癌患者手術前后血清TK1濃度的比較 分別測定卵巢上皮性癌患者術前、術后1周血清TK1濃度，結果顯示，術后1周患者平均TK1濃度為(1.01±0.29) pM，與術前(2.99±1.09) pM比較差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.3 卵巢上皮性癌不同分期血清TK1濃度的比較 對不同分期的宮頸癌患者血清TK1濃度分別統計發現，卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期患者TK1濃度分別為(0.84±0.26) pM、(2.41±0.62) pM、(3.62±1.34) pM，三組間比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

3 討論

卵巢上皮性癌是婦科惡性腫瘤中病死率最高的腫瘤，雖然治療方案不斷改進，但療效仍不甚理想。合理使用腫瘤標記物對卵巢癌的早期診斷、早期治療，預后和轉歸及治療療效的監測等方面具有重要臨床意義。胸苷激酶（TK）是DNA合成的關鍵酶，存在細胞質胸苷激酶（TK1）、線粒體胸苷激酶（TK2）兩種同工酶。其中TK1與細胞的增殖、分裂密切相關，腫瘤組織中或患者外周血中TK1濃度不但反映了消化道肺癌［3］、腫瘤［4］、膀胱癌［5］、乳腺癌［6］等多種腫瘤生長、增值的程度，而且作為腫瘤復發或者療效評估的重要指標備受關注。

本研究分別檢測了75例卵巢上皮性癌患者、30例卵巢良性患者及40名健康婦女血清TK1濃度。結果顯示41.33%(31/75)宮頸癌患者血清TK1高于參考值2 pM，平均濃度為(2.99±1.09) pM，顯著高于良性病變或正常對照組（P<0.05）。良性腫瘤組與健康對照組血清TK1濃度無顯著差異(P>0.05)。統計卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期患血清TK1濃度發現，三組間均有顯著性差異(P<0.05)，濃度分別為(0.84±0.26) pM、(2.41±0.62) pM、(3.62±1.34) pM。分別測定卵巢上皮性癌患者術前、術后一周血清TK1濃度，結果顯示，術后一周患者平均TK1濃度為(1.01±0.29) pM，與術前(2.99±1.09) pM比較，差異有統計學意義(P<0.05)。

總之，本試驗通過對卵巢良、惡性病變患者、不同分期卵巢上皮性癌患以及卵巢癌患者術前、術后血清TK1濃度的比較分析，提示血清TK1濃度的檢測對卵巢上皮性癌的診斷、療效觀察具有潛在的應用價值。

參 考 文 獻

［1］ Jemal A，Murray T，Samuels A，et al.Cancer statistics.CA Cancer J Clin，2003，53:5-26.

［2］ Ozols RF，Bundy BN，Greer BE，et al.Phase Ⅲ trial of carboplatin and paclitaxel compared with cisplatin and paclitaxel in patients with optimally resected stage Ⅲ ovarian cancer:a Gynecologic Oncology Group study.J Clin Oncol，2003，21:3194-3200.

［3］ Li HX，Zhang S，Lei DS，et al.Serum thymidine kinase 1 is a prognostic and monitoring factor in patients with non-small cell lung cancer.Oncol Rep，2005，13:145-149.

［4］ Zou L，Zhang PG，Zou S，et al.The half-life of thymidine kinase 1 in serum measured by ECL dot blot:a potential marker for monitoring the response to surgery of patients with gastric cancer.Int J Biol Marker，2002，17:135-140.

［5］ Zhang J，Jia Q，Zou S，et al.Thymidine kinase 1: a proliferation marker for determining prognosis and monitoring the surgical outcome of primary bladder carcinoma patients.Oncol Rep，2006，15:455-461.

［6］ He Q，Zou L，Zhang PA，et al.The clinical significance of thymidine kinase 1 measurement in serum of breast cancer patients using anti-TK 1 antibody.Int J Biol Marker，2000，15:139-146.

（收稿日期：2011-07-29）

（本文編輯：郎威）