400例乙肝表面抗原膠體金試條法與ELISA法檢測結果分析

【摘要】 目的 對膠體金試紙條與酶聯免疫吸附（ELISA）法檢測乙肝表面抗原（HBsAg）進行方法學評價，探討兩種方法各自的優缺點，以期提高HBsAg檢測的準確性。方法 分別用膠體金試紙條與ELISA法同時檢測400份血清標本中的HBsAg，對陽性率進行比較，然后將陽性的20份標本做倍比稀釋，觀察兩種檢測方法靈敏度的差異。結果 兩種方法陽性率之間差異無統計學意義，ELISA法靈敏度較膠體金試紙條法高。結論 膠體金試紙條與ELISA法均為測定HBsAg的可靠方法。ELISA法適用于常規檢測，膠體金試紙條法操作簡便、快速，適用于急診及健康人群的篩查，但靈敏度有待提高。

【關鍵詞】 膠體金試紙條； 酶聯免疫吸附（ELISA）法； 乙肝表面抗原（HBsAg）

中國是世界上感染乙肝病毒人數最多的國家。目前，中國約有9300萬例乙肝病毒攜帶者，其中慢性乙肝患者約2000～3000萬，每年近30萬人死于與乙肝相關的肝硬化和肝癌等。乙肝病毒主要通過血液、母嬰和性接觸進行傳播。本研究用膠體金試紙條與ELISA法對本院體檢人群進行檢測，通過對檢測結果的分析，評價兩種方法的優缺點，以期提高HBsAg檢測的準確性。

1 材料與方法

1.1 材料 膠體金試紙條由英科新創（廈門）科技有限公司提供，酶聯免疫吸附實驗試劑由鄭州安圖綠科生物工程有限公司提供，所有試劑均在有效期內。

1.2 標本來源 靜脈采集本院2011年3月～2011年5月體檢者的血液標本2 ml，3000 r/min離心10 min，分離得到待檢血清，共計400份。取HBsAg陽性的血清標本10份，再用生理鹽水做倍比稀釋（1∶1、1∶2至1∶512）^［1］。

1.3 方法 兩種方法均嚴格按照各自的試劑說明書進行操作。結果判斷：膠體金試紙條在檢測線和對照線位置出現兩條紫紅色線為陽性，僅在對照線位置出現紫紅色線為陰性，試紙條上對照線位置未出現紫紅色為無效。ELISA法：待測樣品OD值≥CUT OFF值判為HBsAg陽性。

1.4 統計學處理 采用SPSS 13.0統計軟件進行分析。表1結果采用χ²檢驗，表2結果采用配對t檢驗。

2 結果

2.1 兩種方法測定的HBsAg結果間差異無統計學意義。見表1。

表1 健康體檢者篩查結果（n）

注：兩種方法比較，P>0.05

2.2 將倍比稀釋后的10份血清標本分別用膠體金試紙條與ELISA法檢測HBsAg，兩種方法檢測HBsAg的靈敏度差異具有統計學意義（P<0.01）。見表2。

表2 倍比稀釋后的標本分別用膠體金試紙條與ELISA法檢測HBsAg結果（n）

注：兩種方法比較，P<0.01

作者單位：475000 河南省開封市第六人民醫院（李伶俐）；河南省開封市河南大學淮河臨床醫學院（孫俊聰）

通訊作者：李伶俐

3 討論

ELISA法是目前國內最常用的檢測HBsAg的方法，具有較高靈敏度、特異性強、重復性好、可進行定量和半定量測定等優點，可以在酶免疫分析儀上做批量檢測。但是該方法易受加樣、反應溫度、反應時間、洗滌徹底性等諸多因素的影響，而且操作步驟較多，因此不適用于急診及無償獻血現場篩查。膠體金試紙條法因其具有操作簡便、快捷、可單份檢測、便于保存、不需特殊設備等優點，廣泛應用于臨床對HBsAg的初篩、急診及無償獻血的現場篩查有實用價值。但是，膠體金試紙條在HBsAg檢測中也有一定的欠缺，由于膠體金顯色需要較高濃度的標記物，故其靈敏度會受到一定限制，在HBsAg濃度較低時易出現假陰性。因此，盡管該操作簡便、快速、無需特殊設備，肉眼可以直接觀察結果，但對于低滴度HBsAg感染者極易造成漏檢^［2］。為避免假陰性的產生，最好用ELISA法進行HBsAg測定。

膠體金試紙條與ELISA法均為測定HBsAg的可靠方法，膠體金試紙條法操作簡便、快速，適用于急診及健康人群的篩查，ELISA法適用于常規檢測，但膠體金試紙條法的靈敏度有待提高。

參 考 文 獻

［1］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程.第3版.南京:東南大學出版社，2006：618-621.

［2］ 莊昕，姚宗蓓，楊蘭萍，等.膠體金免疫分析法檢測HBsAg效果評估.上海預防醫學雜志，2004，（5）:234.

（收稿日期：2011-07-20）

（本文編輯：郎威）