針劑中先鋒必含量的測定

摘要：在酸性介質(zhì)中，先鋒必可以阻抑過硫酸鉀氧化熒光桃紅的熒光淬滅反應，而且先鋒必的含量與熒光強度的變化在1.0×10-6～1.3×10-5g·mL-1內(nèi)呈線性關(guān)系(R=0.9950)，檢出限為7.0×10-8g·mL-1。該法簡便、可靠，可用于藥物制劑中先鋒必含量的測定。

關(guān)鍵詞：先鋒必熒光桃紅阻抑

先鋒必（CRO）是常見的第三代頭孢菌素類抗生素藥物。其測定方法藥典采用高效液相色譜法[1]，已報道的還有分光光度法[2]，化學發(fā)光法[3]，電化學分析法[4]等。在酸性介質(zhì)中，利用先鋒必可以阻抑過硫酸鉀氧化熒光桃紅褪色的現(xiàn)象，建立了該方法。

1 實驗部分

1.1 主要儀器及試劑 BS210S電子天平；PHS-P1型酸度計（上海分析儀器廠）；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋；970CRT熒光分光光度計（上海精密科學儀器公司）。

熒光桃紅：5×10-5mol·L-1；K2S2O8溶液：0.02mol·L-1；鄰苯二甲酸氫鉀-鹽酸（KHP-HCl）pH=3.6；先鋒必(CRO)(0.0100g·mL-1)；所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。

1.2 實驗方法 依次加5×10-5mol·L-1的熒光桃紅1.5mL，KHP-HCl2.0mL，0.02mol·L-1K2S2O81.0mL于10mL試管中，再加入適量先鋒必，定容至刻度于65℃恒溫水浴中加熱20 min后取出且冷卻至室溫。然后在970CRT熒光計上（λex=470 nm，λem=556 nm）測定其熒光強度（F），以空白溶液的熒光強度為F0，計算ΔF＝F－F0。

2 結(jié)果與討論

2.1 激發(fā)和發(fā)射光譜 熒光桃紅在光照下顯示強烈的紅色熒光，當被K2S2O8氧化后，熒光強度大大降低，甚至消失。對體系中不同溶液的熒光光譜進行掃描，如圖1所示。結(jié)果發(fā)現(xiàn)體系的最佳λex=470nm和λem=556 nm沒有位移，而峰高卻有很大改變。但當加入先鋒必后，熒光強度反而增強，說明先鋒必對該反應有阻抑作用。

berberine:7.5×10-6mol·L-1;KHP-HCl buffer solution;K2S2O8:2×10-３mol·L-1;cefoperazone sodium:1.25×10-5g·mL-1

1，1′：berberine+H2O；2，2′：berberine+buffer solution；3，3′：berberine+buffer solution+K2S2O8+cefoperazone sodium；4，4′：berberine+buffer solution+K2S2O8

2.2 最佳實驗條件的選擇

2.2.1 反應介質(zhì)的影響 試驗了不同pH介質(zhì)對體系的影響，發(fā)現(xiàn)在KHP-HCl（pH=3.6）中的熒光值相對穩(wěn)定，且重現(xiàn)性好。對其用量進行了測定。最后發(fā)現(xiàn)：選擇加入2.0mLKHP-HCl為宜。

2.2.2 加熱溫度的影響 在不同溫度下反應后測定體系中各溶液的熒光強度。最后發(fā)現(xiàn)：選擇65℃較好。

2.2.3 反應時間的影響 考察了5~30min之間反應時間對ΔF的影響。結(jié)果表明：當反應20min后ΔF值較大而且相對穩(wěn)定，延長反應時間，ΔF值反而下降。故選擇20min后立即測定。

2.2.4 線性范圍與檢出限 按試驗方法測定體系熒光強度，結(jié)果表明先鋒必在1.0×10-6～1.3×10-5g·mL-1內(nèi)與△F呈線性關(guān)系。其回歸方程為：ΔF＝0.8570+2.4×107C(g·mL-1)，相關(guān)系數(shù)(γ)為0.9950。對1.0×10-5 g·mL-1的先鋒必連續(xù)測定11次，其相對標準偏差（RSD）為2.36％。按照IUPAC（3σ）建議，計算出該方法的檢出限為7.0×10-8gmL-1。

2.3 樣品測定 稱適量先鋒必（市售）樣品，按實驗方法進行處理。據(jù)線性方程計算CRO含量，其平均含量為標示量（1.0g）的98.8%（n=5），與藥典法測定結(jié)果（99.2%）基本相符。

3 結(jié)論

利用先鋒必阻抑過硫酸鉀氧化熒光桃紅的熒光淬滅現(xiàn)象，對市售先鋒必進行了測定，與藥典對照法基本一致，此法簡便、可靠，可用于市售制劑質(zhì)量控制。

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學工業(yè)出版社.2005，148-150.

[2]王雷，李軍，王瑋.分光光度法測定先鋒必含量[J].齊魯藥事，2004，23(8)：24-25.

[3]陳朝暉，蔡富春，黃玉明.化學發(fā)光法測定先鋒必[J].西南師范大學報，2002，27(5):806-810.

[4]胡勁波，謝光清，毛燕寧等.先鋒必的伏安行為及其應用研究[J].分析試驗室，1999，18(2):51.