摘要:研究香菇在不同生長期中甲醛含量的變化情況,采用乙酰丙酮分光光度法利用甲醛與乙酰丙酮及氨生成黃色化合物二乙酰基二氫盧剔啶后,于412nm下進行分光光度來全面跟蹤測定香菇不同生長期甲醛的含量。結果表明:在培養基檢測不出甲醛,但隨著香菇的生長發育,自身甲醛含量升高。
關鍵詞:本底甲醛香菇乙酰丙酮法分光光度法測定
香菇中含有甲醛,這已經成為不爭的事實。早在1974 年KenshiroFujimoto等對香菇中甲醛形成機理的研究時指出:香菇中甲醛含量高,在生長過程中甲醛含量穩定。為了進一步弄清此問題,本試驗從香菇栽培原料、子實體不同的發育階段測定其甲醛含量,試圖探索出其變化規律,以加快香菇中甲醛的形成機理及存在狀態的研究,為香菇中甲醛毒性研究提供理論支持和科學依據。
1 實驗部分
1.1 材料及處理
香菇栽培原料,菌棒(麗水市蓮都區某香菇栽培基地提供)
香菇樣品從基地采集后,為防止香菇中甲醛的揮發,用塑料袋密封運回實驗室,當天測定。
1.2 主要儀器與試劑
紫外分光光度計、水蒸氣蒸餾裝置、數顯電熱恒溫水浴、粉碎機
乙酰丙酮溶液:100ml蒸餾水中加入醋酸銨25g,冰醋酸3ml 和乙酰丙酮0.140ml,振搖促溶,貯備于棕色瓶中。
甲醛儲備液:取36%~38%甲醛1g定容于100ml容量瓶。取10ml該溶液,加0.10mol/L碘溶液50ml,1mol/L氫氧化鈉溶液20ml,室溫放置15min后,加10%硫酸溶液15ml,用0.10mol/L硫代硫酸鈉標準溶液滴定,滴定至淡黃色時,加入1ml淀粉溶液,繼續滴定至無色,同時取10ml蒸餾水進行空白實驗。
甲醛標準使用液:將標定后的甲醛標準儲備液用蒸餾水稀釋至10.0μg/ml
1.3 實驗方法
1.3.1 樣品的前處理
將香菇打成細末,稱取10.000g于500mL蒸餾瓶中,加入體積分數10% 磷酸溶液10mL,玻璃珠數粒,加蒸餾水至約200mL,連接冷凝裝置。冷凝管下口插入盛有20mL蒸餾水且置于冰浴的100mL燒杯中。加熱蒸餾,收集蒸餾液至約80~90mL,放至室溫,移入100mL容量瓶中,用蒸餾水定容。
1.3.2 甲醛標準曲線的繪制
分別吸取10μg/mL的甲醛標準溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于25mL容量瓶中,加入乙酰丙酮溶液1.0mL,加水定容至刻度,混合均勻,置40℃水浴中保溫30min,取出冷卻至室溫。以空白為參比,于波長412nm 處,用1cm 比色皿進行比色,測定吸光度,繪制標準曲線。
1.3.3 甲醛測定方法——乙酰丙酮分光光度法
采用乙酰丙酮分光光度法測定甲醛含量。其操作原理為:用蒸餾水蒸餾樣品中的甲醛,同時用水吸收,吸收液中的甲醛與乙酰丙酮及銨離子反應生產黃色物質二乙酰基二氫盧剔啶后,412nm下進行分光光度測定,與標準比較定量。
1.3.4 香菇不同生長期甲醛含量的測定
采集香菇栽培原料,自行栽培,收集不同發育階段(生長2天、4天、6天、8天、10天、12天、14天)鮮菇各100g左右。碾碎后分別稱10g的鮮菇,測定栽培原料及各生長發育階段香菇的甲醛含量。
2 結果與討論
2.1 甲醛的標準曲線
得到的線形回歸方程為y=0.0069x+0.0135,相關系數為0.9961,具有較好的相關性。
2.2 不同生長時期香菇中甲醛含量的變化
香菇不同生長時期甲醛的測定結果如下表所示:
由表1可以得出香菇原料基中不含有甲醛,出菇后菇體內甲醛含量呈遞增趨勢。出菇后14天子實體成熟,菇體內甲醛達到最大值15.67mg/kg。這一結果與林樹錢等人的試驗大致相符。說明香菇子實體在生長發育過程中自然形成一定量的甲醛,是香菇生理代謝產物。
甲醛是對人體健康非常有害的化學物質,然而對于香菇自身代謝產生的甲醛,其含量遠遠低于我國和國際所規定的標準,所以對人體不會產生影響。
參考文獻:
[1]Kenshiro Fujimoto,et al.The Mechanism of FromaldehydeFormat ion In Shii-Ta-ke Mushroom,Mushroom Science(Part I) proceedings of the Ninth Internat ional Scientific Congress on the Cultivation of Edibl e Fungi,Tokyo,1974(第九屆東京,食用菌栽培科學國際會議論文1974年).
[2]陳乃平.乙酰丙酮分光光度法測定微量甲醛,貴州化工.1999,2:36-43.
[3]林樹錢,王賽貞,林志杉.香菇生長發育和加工貯存中甲醛含量變化的初步研究.中國食用菌.2002,21(3):26-28
[4]福建進出口商品檢驗檢疫局.蘑菇,姬松茸,杏鮑菇,白靈菇的甲醛測定報告.
[5]楊雪嬌,黃偉,溫健昌等.2005 年東莞市食用菌甲醛含量抽查結果分析[J].中國衛生檢驗雜志,2007,19(2):150-152.