非小細胞肺癌患者術前血清中MMP-3和MMP-7檢測的意義

[摘要] 目的 應用ELISA法分別檢測120例非小細胞肺癌患者和120例正常成人血清中基質金屬蛋白酶-3（MMP-3）和基質金屬蛋白酶-7（MMP-7）的表達，并分析二者的表達與非小細胞肺癌患者的分化程度、淋巴結轉移及臨床分期的關系，為術前判斷腫瘤的生物學行為提供理論幫助。 方法 選取我院確診的120例非小細胞肺癌需進行手術治療的術前患者作為觀察組，選取120例體檢證實為健康的成人血清作為對照組，應用酶聯免疫吸附實驗檢測兩組血清中MMP-3和MMP-7的含量，分析其意義及相關性。 結果 觀察組患者血清中MMP-3和MMP-7的表達明顯高于對照組，術前血清中MMP-3和MMP-7的表達與腫瘤的分化程度、淋巴結轉移及臨床分期密切相關。結果顯示非小細胞肺癌中MMP-3和MMP-7的表達具有正相關性。 結論 非小細胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的表達升高，MMP-3和MMP-7在腫瘤的進展中具有促進作用，術前聯合檢測血清中MMP-3和MMP-7的表達可能有助于判斷預后。

[關鍵詞] 非小細胞肺癌；基質金屬蛋白酶-3；基質金屬蛋白酶-7；酶聯免疫吸附實驗

[中圖分類號] R734.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2012）06-0114-02

Serum expressions and significance of MMP-3 and MMP-7 in non-small cell lung carcinoma before operation

HU Tianjun

Department of Thoracic Surgery， Ningbo No.2 Hospital， Zhejiang Province， Ningbo 315010， China

[Abstract] Objective To investigate the expressions of MMP-3 and MMP-7 in 120 cases with non-small cell lung carcinoma and 120 cases normal adults for observing their clinical significance in neoplasm. Methods We detected the serum expressions of MMP-3 and MMP-7 by ELISA in the non-small cell lung carcinoma before opeartion and normal adults. Their expressions and clinical significance were analyzed in the non-small cell lung carcinoma. Results The serum expressions of MMP-3 and MMP-7 were higher in the neoplasm than in normal adults. Their expressions were correlated with differentiation， clinical stage and lymph node metastasis. Positive correlation between MMP-3 and MMP-7 was found in neoplasm before operation. Conclusion The higher serum expressions of MMP-3 and MMP-7 were found in non-small cell lung carcinoma before operation. The synergistic effect of MMP-3 and MMP-7 may promote the development of neoplasm. The expressions of MMP-3 and MMP-7 may be helpful to judge the prognosis in non-small cell lung carcinoma.

[Key words] Non-small cell lung carcinoma; MMP-3; MMP-7; ELISA

非小細胞肺癌是危害人類健康的重要疾病，近年來患者血清中相關蛋白的表達逐漸引起學者的關注。基質金屬蛋白酶-3（MMP-3）和基質金屬蛋白酶-7（MMP-7）是基質金屬蛋白家族的重要成員，對腫瘤細胞外基質具有較強的降解作用，對腫瘤的進展具有促進作用[1，2]。本實驗關注非小細胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的檢測情況，探討二者的表達與腫瘤生物學行為的關系，旨在為術前非小細胞肺癌臨床情況提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年1月～2010年12月在我院確診為非小細胞肺癌的術前患者作為觀察組。納入標準：①均經病理學確診，并符合WHO關于非小細胞肺癌的診斷標準；②術前未進行放化療；③臨床資料完整。本組共觀察120例，其中男70例，女50例，患者年齡37～79歲，平均（57.9±7.9）歲。同時選取同期在我院進行體檢并證實為健康的成人血清120例作為對照組。其中男69例，女51例，年齡36～78歲，平均（57.3±7.6）歲。兩組資料的性別、年齡構成等比較，差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 血清中MMP-3和MMP-7的檢測

觀察組術前清晨抽取空腹靜脈血5 mL，分離血清后，置于-20℃的冰箱中待檢。對照組采血及保存方法同上。兩組血清標本均在3 d內集中檢測，檢測方法為酶聯免疫吸附實驗，操作均由同一主管技師完成，嚴格操作過程，努力避免誤差。

1.3 統計學處理

結果均經SAS 6.12軟件進行分析，兩組間的比較采用t檢驗，并應用線性相關分析計算其相關性，P ＜ 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組中MMP-3和MMP-7的表達

兩組中觀察組患者血清中MMP-3和MMP-7的表達量明顯高于對照組，見表1。

2.2 觀察組患者不同臨床特征中MMP-3和MMP-7的表達比較

MMP-3和MMP-7在低分化組中的表達量明顯高于高、中分化組，在有淋巴結轉移組中的表達量明顯高于無淋巴結轉移組，在臨床分期Ⅲ、Ⅳ期患者中的表達量明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者。見表2。

2.3 非小細胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7表達的相關性分析

對非小細胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的表達進行線性相關分析，結果顯示MMP-3和MMP-7的表達呈正相關（r = 0.43，P ＝ 0.03）。

3 討論

非小細胞肺癌的生長、侵襲、轉移是一個復雜的過程[3]。MMPs是一組結構上具有極大同源性蛋白的內肽酶的總和，可降解細胞外基質中的多種成分[4]。MMP-3是基質金屬蛋白酶家族的重要成員，主要通過降解絕大多數的細胞外基質，使腫瘤細胞沿受損的基底膜向周圍組織浸潤和轉移。MMP-7屬于基質溶解素，其基因定位于11q21-q22，其DNA長1.6 kb，編碼267個氨基酸，由于其缺乏與血紅素結構蛋白同源序列而成為金屬蛋白酶家族的最小成員，具有強大的基質降解活性和廣泛的底物特異性[5，6]，包括Ⅳ型膠原、纖維蛋白結合素、層黏連蛋白和可溶性彈性蛋白等底物，同時受基質金屬蛋白酶抑制劑的調節較小，而且在研究中顯示其能有效地激活MMPs家族的其他成員，對基底膜及相關的屏障有廣譜的降解功能。同時也有觀點認為其能破壞局部組織結構，增加腫瘤誘導的血管形成[3，7]，而起到促進腫瘤發展的作用。

本實驗通過對120例非小細胞肺癌患者術前的血清進行ELISA法檢測，結果顯示MMP-3和MMP-7高表達，提示MMP-3和MMP-7在血清中的表達與組織中的表達具有一致性，MMP-3和MMP-7在肺癌的進展中具有重要促進作用。實驗結果顯示，術前血清中MMP-3和MMP-7的含量均與非小細胞肺癌的分化程度、淋巴結轉移及臨床分期密切相關，提示MMP-3和MMP-7在腫瘤進展中具有直接作用，由于分化程度、淋巴結轉移及臨床分期均與非小細胞肺癌的預后相關，因此，術前聯合檢測MMP-3和MMP-7的表達可能對判斷患者的預后及指導治療有一定價值。相關分析顯示非小細胞肺癌血清中MMP-3和MMP-7的含量呈正相關，這不僅提示二種蛋白在非小細胞肺癌的發展中起重要作用，又提示MMP-3和MMP-7具有正向協同效應。當MMP-3和MMP-7在細胞外基質發生溶解時，可以引起黏附功能下降，使腫瘤細胞脫離原發灶，進而發生轉移[8]。MMP-7還可能通過調節細胞質內NF-κB蛋白的活性，使其與MMP的啟動子的結合增強[9]，增加其合成，從而促進腫瘤細胞的機動性、趨化性及侵襲性。非小細胞肺癌術前血清中檢測MMP-3和MMP-7的表達，由于血液標本較組織標本取材容易，且檢測方法簡便可行，對患者的指導意義大，因此，臨床診斷和治療中可以積極應用。

總之，MMP-3和MMP-7在非小細胞肺癌患者血清中高表達，提示二者可能在非小細胞肺癌的發生發展中起重要作用；術前聯合檢測MMP-3和MMP-7可能對判斷患者的預后及指導治療提供重要價值。

[參考文獻]

[1] Kren L，Goncharuk VN，Krenová Z，et al. Expression of matrix metalloproteinases 3， 10 and 11 (stromelysins 1， 2 and 3) and matrix metalloproteinase 7 (matrilysin) by cancer cells in non-small cell lung neoplasms. Clinicopathologic studies[J]. Cesk Patol，2006，42（1）：16-19.

[2] Safranek J，Pesta M，Holubec L，et al. Expression of MMP-7， MMP-9， TIMP-1 and TIMP-2 mRNA in lung tissue of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) and benign pulmonary disease[J]. Anticancer Res，2009，29（7）：2513-2517.

[3] Salgia R. Prognostic significance of angiogenesis and angiogenic growth factors in nonsmall cell lung cancer[J]. Cancer，2011，117（17）：3889-3899.

[4] 宋寶輝，楊清波，張金濤，等. MMP-7和uPAR在非小細胞肺癌的表達及其意義[J]. 臨床腫瘤學雜志，2009，14（12）：1069-1072.

[5] Liu H，Zhang T，Li X，et al. Predictive value of MMP-7 expression for response to chemotherapy and survival in patients with non-small cell lung cancer[J]. Cancer Sci，2008，99（11）：2185-2192.

[6] Liu D，Nakano J，Ishikawa S，et al. Overexpression of matrix metalloproteinase-7 (MMP-7) correlates with tumor proliferation， and a poor prognosis in non-small cell lung cancer[J]. Lung Cancer，2007，58（3）：384-391.

[7] 肖敏，黃孫卉. MMP-3和P53蛋白在乳腺癌組織中的表達及其與腫瘤轉移的關系[J]. 實用腫瘤學雜志，2008，22（6）：514-515.

[8] Safranek J，Holubec L Jr，Topolcan O，et al. Expression of mRNA MMP-7 and mRNA TIMP-1 in non-small cell lung cancer[J]. Anticancer Res，2007，27（4C）：2953-2956.

[9] 曲光瑾，安牧爾，趙璐，等. Survivin與MMP-9、NF-kB65在卵巢上皮性腫瘤中的表達及相關性研究[J]. 中國現代實用醫學雜志，2008，7（5）：14-18.

（收稿日期：2011-11-09）