抗中性粒細胞胞漿抗體與狼瘡性腎炎的相關性研究

張小蓮,鮑 琳,崔江龍,徐 榮，謝 璟

(1、宜春市人民醫院檢驗科;2、宜春市中心血站,江西 宜春 336000)

抗中性粒細胞胞漿抗體與狼瘡性腎炎的相關性研究

張小蓮1,鮑 琳2,崔江龍1,徐 榮1，謝 璟1

(1、宜春市人民醫院檢驗科;2、宜春市中心血站,江西 宜春 336000)

目的探討抗中性粒細胞胞漿抗體(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)對狼瘡性腎炎(lupus nephritis,LN)診斷、病理分型和病情評估等方面的價值。方法采用間接免疫熒光法對42例無LN的SLE患者、36例LN患者和20例健康體檢者的血清ANCA進行檢測。對78例SLE患者的腎功能指標進行檢測。將LN患者分為ANCA陽性和陰性組，無LN的SLE患者為正常對照，進行腎功能指標的檢測與比較。結果LN患者和無LN的SLE患者的ANCA陽性率分別為55.6%(20/36)和7.1%(3/42)，差異有統計學意義(P<0.01)。ANCA陽性和陰性組的腎小球濾過率、嚴重血尿(鏡檢紅細胞≥++/HP)和管型陽性率間的差異有統計學意義(P<0.05)。結論血清ANCA可作為LN的輔助診斷指標，并與其腎功能損害程度有一定的相關性。ANCA陽性可能更易出現在ClassⅢ和Ⅳ型的LN當中。

抗中性粒細胞胞漿抗體；狼瘡性腎炎

系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種自身免疫性結締組織病，可累及多個器官和系統，約50%患者會繼發腎臟損害，稱為狼瘡性腎炎(lupus nephritis,LN)[1]。LN的病理機制非常復雜，其中免疫復合物介導的補體激活、白細胞浸潤、炎癥因子釋放、組織增生、壞死以及新月體和腎小球瘢痕形成等過程極為重要，腎小球的損害程度大多與免疫復合物的沉積量相關[2]。一種中性粒細胞依賴、抗中性粒細胞胞漿抗體(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)相關的壞死性新月體性腎小球腎炎形成機制則很可能在部分免疫復合物缺乏(pauci-immune)的LN如ClassⅣ-S型中發揮著關鍵作用[2-4]。ANCA檢測對于LN的診斷、病理分型和病情評估等方面的價值仍有待廣泛深入研究[3-5]。本研究檢測并分析了36例LN患者和42例無LN的SLE患者的血清ANCA，并對ANCA陽性和陰性LN患者的腎功能指標進行了比較，報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病例資料 收集2008年1月至2012年3月間宜春市人民醫院收治的LN患者36例，其中男4例，女32例，年齡34.4±8.5歲。無LN的SLE患者42例，男6例，女36例，年齡32.8±9.2歲。78例患者均符合國際臨床協作組 (SLICC)新修訂的分類診斷標準[6]。選取健康體檢者20例做正常對照組，男3例，女17例，年齡35.2±6.7歲。

1.1.2 試劑和儀器 ANCA間接免疫熒光法(indirect immunofluorescence,IIF)檢測試劑盒購自德國EUROIMMUN公司，包括甲醛固定的粒細胞、乙醇固定的粒細胞、HEp-2細胞和猴肝細胞4種基質組成的生物薄片，FITC標記羊抗人IgG等。ECLIPSE 80i熒光顯微鏡購自日本NIKON公司。

1.2 方法 SLE患者和健康體檢者的ANCA檢測嚴格按試劑說明書進行。陽性標本可能有胞漿型(cytoplasmic pattern,c-ANCA)、核周型(perinuclear pattern,p-ANCA)和非典型(atypical pattern,a-ANCA)三種表型。將LN患者分為ANCA陽性和陰性組，無LN的SLE患者為正常對照，進行腎功能指標的檢測。留取24h尿做尿蛋白定量和腎小球濾過率(glomerular filtration rate,GFR)檢測，留取晨尿做尿沉渣分析。

1.3 統計方法 采用SPSS 13.0統計軟件統計分析，兩組計量資料采用兩獨立樣本t檢驗，兩組計數資料采用四格表卡方檢驗或Fisher確切概率檢驗。P<0.05差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ANCA檢測 ANCA的檢測結果顯示，78例SLE患者中檢出23例ANCA陽性，表型均為p-ANCA，未見c-ANCA或a-ANCA，20例健康體檢者的ANCA檢測均為陰性。兩組樣本陽性率間的差異有統計學意義 (P<0.01)。36例LN患者中，ANCA陽性的有20例，陽性率為55.6%，42例無LN的SLE患者中，ANCA陽性的只有3例，陽性率為7.1%。兩組樣本ANCA陽性率間的差異有統計學意義(P<0.01)。

2.2 腎功能指標檢測 將36例LN患者分為ANCA陽性和陰性組。ANCA陽性LN患者和ANCA陰性LN患者及無LN的SLE患者的尿蛋白和GFR檢測結果見表1，尿沉渣分析結果見表2。表1兩獨立樣本t檢驗結果顯示，與無LN的SLE患者相比，LN患者的尿蛋白水平顯著升高，GFR顯著降低(P<0.01)。ANCA陽性和陰性LN患者比較，尿蛋白水平間的差異無統計學意義(P>0.05)，但GFR間的差異有統計學意義 (P<0.01)。表2四格表Fisher確切概率檢驗結果顯示，與無LN的SLE患者相比，LN患者的鏡下血尿、嚴重血尿 (紅細胞≥++/HP)和管型陽性率顯著升高(P<0.01)。ANCA陽性和陰性LN患者比較，鏡下血尿陽性率間的差異無統計學意義(P>0.05)，但嚴重血尿(紅細胞≥++/HP)和管型陽性率間的差異有統計學意義 (P<0.05)。ANCA陽性LN患者的6例管型包括2例紅細胞管型和4例顆粒管型。

表1 SLE患者的尿蛋白和GFR檢測結果

表2 SLE患者的尿沉渣分析結果

3 討論

SLE相關的自身抗體有很多，如抗核抗體(antinuclear antibodies,ANA)、ANCA和抗磷脂抗體等，大概約20%的SLE患者血清中可檢出ANCA陽性，ANA的陽性率則超過90%，IIF中ANA很容易造成ANCA檢測的假陽性[8]。EUROIMMUN公司的生物薄片使用HEp-2細胞和猴肝細胞作為對照，可以在很大程度上降低ANA可能造成的干擾。本研究中SLE的ANCA總陽性率為29.5%(23/78)，與葉荻慶等[7]報道的27.1%的陽性率較為接近。

ANCA檢測對于LN的診斷價值仍存在一定的爭議，Sen等認為ANCA陽性與SLE的器官損害間沒有明顯聯系，而楊玉芹等認為血清ANCA檢測可以作為LN診斷的參考指標[5,8]。本研究發現，36例LN患者的ANCA陽性率為55.6%，顯著高于42例無LN的SLE患者7.1%的陽性率(P<0.01)，支持ANCA作為一種血清標記物用于輔助診斷LN。

本研究對無LN的SLE患者、ANCA陽性LN患者和ANCA陰性LN患者的腎功能指標進行了比較，結果顯示，與ANCA陰性組相比，ANCA陽性組的GFR降低幅度更大，出現鏡下嚴重血尿(鏡檢紅細胞≥++/HP)和管型的比例也更高(P<0.05)。病理上，LN通常表現為系膜內(mesangial)、毛細血管內(endocapillary)和膜內(membranous)病變3種，其中以急性GFR降低和血尿為顯著特征的主要是毛細血管內病變型，而依據LN分型標準，牽涉到毛細胞血管內病變的主要有ClassⅢ和Ⅳ型[2]。綜上說明，ANCA與LN的腎功能損害程度有一定相關性，同時ANCA陽性可能更易出現在ClassⅢ和Ⅳ型的LN當中。

[1]Frutos MA,Praga M,Quereda C,et al.Lupus nephritis:in search of a better future[J].Nefrologia,2012,32(2):136-138.

[2]Weening JJ,D'Agati VD,Schwartz MM,et al.The classification of glomerulonephritis in systemic lupus erythematosus revisited [J].J Am Soc Nephrol,2004,15(2):241-250.

[3]Nasr SH,D'Agati VD,Park HR,et al.Necrotizing and crescentic lupus nephritis with antineutrophil cytoplasmic antibody seropositivity[J].Clin J Am Soc Nephrol,2008,3(3):682-690.

[4]Nasr SH,Said SM,Valeri AM,et al.Membranous glomerulonephritis with ANCA-associated necrotizing and crescentic glomerulonephritis[J].Clin J Am Soc Nephrol,2009,4(2):299-308.

[5]楊玉芹,張迎梅,王 兵.狼瘡性腎炎患者抗中性粒細胞胞漿抗體的檢測及臨床意義[J].現代檢驗醫學雜志,2009,24(5):130-131.

[6]Petri M.Systemic Lupus International Collaborating Clinic(SLICC),SLICC Revision of the ACR Classification Criteria for SLE[J].Arthritis Rheum 2009,60(Suppl 10):895.

[7]葉荻慶,向 瑜,張莉萍.系統性紅斑狼瘡患者抗中性粒細胞胞漿抗體的臨床相關性及其意義[J].重慶醫學,2011,40(3):246-247.

[8]Sen D，Isenberg DA.Antineutrophil cytoplasmic autoantibodies in systemic lupus erythematosus[J].Lupus,2003,12(9):651-658.

R446.62，R593.24+2

A

1674-1129(2012)05-0439-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.05.007

宜春市科技局計劃項目(編號:JXYC2012KSA013)

張小蓮,女,1977年生,主要從事臨床免疫學檢驗研究。