多種梅毒檢測方法的比較

李鳳玉 黃建城

（河源市疾病預防控制中心，廣東 河源 517000）

梅毒螺旋體可侵犯全身各臟器，造成多器官病變，功能失常，組織破壞甚至死亡。早期梅毒有較強的傳染性。梅毒患者是唯一傳染源，目前檢測梅毒的方法主要有血清學檢測、病原學，其中血清學檢測又有多種不同的檢測方法。如何聯(lián)合或選擇檢測方法，各實驗室不盡相同。為此，我們采集100例患者均為2008年4月至2010年3月來我單位對高危人群檢測（戒毒所）的梅毒患者，經(jīng)TP-ELISA檢測血清標本都呈陽性，其中女27例，男73例，年齡為18～68歲，平均年齡為43歲的實驗組。150例非梅毒對照組，其中從業(yè)人員（從事餐飲業(yè)）體檢者50例，從業(yè)例員（從事娛樂業(yè)）體檢者50例，結核病患者20例，糖尿病患者10例，肝病患者20例，其中女53例，男97例，年齡為18～74歲，平均年齡為46歲。分別采用幾種檢測方法，并進行結果比較分析，現(xiàn)報道如下。

1 材料、方法與儀器

1.1 材料

TRUST試劑是上海榮盛生物藥業(yè)有限公司的，ACONSYP試劑是艾康生物技術（杭州）有限公司的，TP-ELISA試劑是珠海麗珠試劑股份有限公司的，TPPA試劑是上海天齊生物科技有限公司的。

1.2 方法

抽靜脈血3mL，分離血清后檢測，先用TP-ELISA檢測呈陽性的標本，再分別采用ACONSYP（SYP）、TRUST、TPPA這幾種方法檢測。試劑都在有效期內使用，試驗操作的步驟和結果的判斷都嚴格按照說明書來進行。

1.3 儀器

儀器為上海迅達產(chǎn)的酶標儀（XD-711），深圳匯松產(chǎn)的自動洗板機（PW-812），姜堰市新康儀器廠的梅毒旋轉震蕩器（MM-1）及恒溫水浴箱（HH-S21-C18）。

2 結果與分析

對梅毒患者血清標本先進行TP-ELISA初篩測定，結果呈陽性的分別同時進行TPPA、SYP、TRUST測定，在100例梅毒患者血清中，這幾種方法均呈陽性的有94例，其中SYP呈陽性的96例、TRUST呈陽性的94例，TPPA呈陽性的98例。TRUST敏感性略低于TPPA，SYP和TPELISA。

120例非梅毒對照組中，經(jīng)TP-ELISA檢測呈陰性有114例，其特異性為95%。

3 討 論

當身體感染梅毒螺旋體后可以產(chǎn)生非特異性抗類脂質抗體和特異性抗螺旋體抗體。梅毒的特異性抗體出現(xiàn)的早、消失的遲，即使通過正規(guī)的治療，但是還可以檢出特異性抗體，甚至終生可檢出。因此，對梅毒的正確地評價及早期診斷，為臨床提供及時和準確的依據(jù)尤為重要[1]。TP-Ab為診斷梅毒螺旋體感染的重要依據(jù)。TP-PA使用梅毒螺旋體毒株制成抗原，檢測血清中的梅毒特異性抗體，靈敏度高，是現(xiàn)在公認的梅毒血清確證試驗；但檢測時需將標本作系列稀釋，且試劑較貴，不宜大批量標本檢測，又肉眼判斷結果，所以原始數(shù)據(jù)沒法保存[2]。TP-ELISA有操作簡便，結果客觀準確，試劑成本又低的特點，可作為早期梅毒診斷的方法。但TP-ELISA本身也存在問題，如標本中一些血漿蛋白紊亂，類過氧化物酶樣物質的增高等，會造成假陽性[3]。SYP成本低，操作簡便，結果明了快速，但不適于批量檢測。ELISA試劑操作方便，成本低，可使用半自動或全自動酶標儀，原始數(shù)據(jù)容易保存，是大批量標本梅毒篩查的好方法。TRUST是以類脂質為抗原，檢測血清中的抗類脂質抗體，為梅毒非特異性抗體。當標本梅毒螺旋體抗體滴度低于試劑檢測限時，可呈假陰性。從上述結果中可看到，對于對照組的檢測，120例中有6例呈假陽性。SYP采用純化重組基因的梅毒抗原，以膠體金作為指示標記于硝酸纖維素膜上進行反應，以雙抗原夾心法原理快速定性檢測梅毒螺旋體抗體，靈敏度較高。但血漿或血清中濃度過低時，SYP會呈假陰性反應。有資料表明[1]，TPPA對早期梅毒的檢出率比較低，有可能是梅毒患者血清梅毒螺旋體抗體滴度未達到試劑盒的檢測范圍，而呈假陰性反應的原因。TPPA是梅毒確證試驗，它的敏感性和特異性相當高，可操作比較復雜，對操作人員水平要求也高。TRUST是采用牛心臟中提取的卵磷脂、膽固醇、心磷脂組成的性病研究室抗原重懸于含有特制的甲苯胺紅溶液制成，檢測血漿或血清中的抗類脂質抗體，即反應素。有資料顯示[4,5]，TRUST的特異性和敏感性都低于TP-ELISA、SYP和TPPA法，與本文的結果是一致的。TRUST對三期梅毒、早期梅毒、潛伏期及治療后梅毒易呈假陰性反應，而受到傳染病影響如結核病、瘧疾、風疹、類風濕關節(jié)炎、猩紅熱、自身免疫性溶血、肺炎及一些原因不明的發(fā)熱性疾病影響時，都會產(chǎn)生生物學陽性反應，還會受到孕婦、年齡等的影響而呈假陽性。因此TRUST的特異性和敏感性有一定局限性，同時結果為肉眼觀察，易出現(xiàn)誤判和漏檢。TRUST不適于梅毒的診斷，只適于篩選試驗，這種非特異性抗體滴度與梅毒活動病程都是有關的，可用于觀察療效、再感染和復發(fā)。因此，同時采用TP-ELISA和TPPA 或TRUST進行梅毒血清學檢測，既能觀察其療效，又可以提高梅毒陽性率的檢出，非常有利于梅毒的早期診斷。

[1]鄒黎.梅毒血清學試驗幾種檢測方法比較[J].實用醫(yī)技雜志,2006,13(21):3788.

[2]薛曉光,陳丹玲.梅毒RPR、TRUST、TPHA、TPPA的試驗對比分析[J].海峽預防醫(yī)學雜志,2000,6(2):47.

[3]馮燁.梅毒血清學三種檢測方法的比較[J].實用臨床醫(yī)學,2004,5(2):106.

[4]陳春梅,曾志良.潛伏梅毒85人血清學檢測分析[J].中國皮膚性病學雜志,2004,14(5):329-330.

[5]王露楠,鄧巍,李金明.梅毒螺旋體感染不同血清學診斷方法的臨床評價[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2006,25(6):352-353.