多種梅毒檢測(cè)方法的比較

李鳳玉 黃建城

（河源市疾病預(yù)防控制中心，廣東 河源 517000）

梅毒螺旋體可侵犯全身各臟器，造成多器官病變，功能失常，組織破壞甚至死亡。早期梅毒有較強(qiáng)的傳染性。梅毒患者是唯一傳染源，目前檢測(cè)梅毒的方法主要有血清學(xué)檢測(cè)、病原學(xué)，其中血清學(xué)檢測(cè)又有多種不同的檢測(cè)方法。如何聯(lián)合或選擇檢測(cè)方法，各實(shí)驗(yàn)室不盡相同。為此，我們采集100例患者均為2008年4月至2010年3月來(lái)我單位對(duì)高危人群檢測(cè)（戒毒所）的梅毒患者，經(jīng)TP-ELISA檢測(cè)血清標(biāo)本都呈陽(yáng)性，其中女27例，男73例，年齡為18～68歲，平均年齡為43歲的實(shí)驗(yàn)組。150例非梅毒對(duì)照組，其中從業(yè)人員（從事餐飲業(yè)）體檢者50例，從業(yè)例員（從事娛樂(lè)業(yè)）體檢者50例，結(jié)核病患者20例，糖尿病患者10例，肝病患者20例，其中女53例，男97例，年齡為18～74歲，平均年齡為46歲。分別采用幾種檢測(cè)方法，并進(jìn)行結(jié)果比較分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料、方法與儀器

1.1 材料

TRUST試劑是上海榮盛生物藥業(yè)有限公司的，ACONSYP試劑是艾康生物技術(shù)（杭州）有限公司的，TP-ELISA試劑是珠海麗珠試劑股份有限公司的，TPPA試劑是上海天齊生物科技有限公司的。

1.2 方法

抽靜脈血3mL，分離血清后檢測(cè)，先用TP-ELISA檢測(cè)呈陽(yáng)性的標(biāo)本，再分別采用ACONSYP（SYP）、TRUST、TPPA這幾種方法檢測(cè)。試劑都在有效期內(nèi)使用，試驗(yàn)操作的步驟和結(jié)果的判斷都嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)來(lái)進(jìn)行。

1.3 儀器

儀器為上海迅達(dá)產(chǎn)的酶標(biāo)儀（XD-711），深圳匯松產(chǎn)的自動(dòng)洗板機(jī)（PW-812），姜堰市新康儀器廠的梅毒旋轉(zhuǎn)震蕩器（MM-1）及恒溫水浴箱（HH-S21-C18）。

2 結(jié)果與分析

對(duì)梅毒患者血清標(biāo)本先進(jìn)行TP-ELISA初篩測(cè)定，結(jié)果呈陽(yáng)性的分別同時(shí)進(jìn)行TPPA、SYP、TRUST測(cè)定，在100例梅毒患者血清中，這幾種方法均呈陽(yáng)性的有94例，其中SYP呈陽(yáng)性的96例、TRUST呈陽(yáng)性的94例，TPPA呈陽(yáng)性的98例。TRUST敏感性略低于TPPA，SYP和TPELISA。

120例非梅毒對(duì)照組中，經(jīng)TP-ELISA檢測(cè)呈陰性有114例，其特異性為95%。

3 討 論

當(dāng)身體感染梅毒螺旋體后可以產(chǎn)生非特異性抗類脂質(zhì)抗體和特異性抗螺旋體抗體。梅毒的特異性抗體出現(xiàn)的早、消失的遲，即使通過(guò)正規(guī)的治療，但是還可以檢出特異性抗體，甚至終生可檢出。因此，對(duì)梅毒的正確地評(píng)價(jià)及早期診斷，為臨床提供及時(shí)和準(zhǔn)確的依據(jù)尤為重要[1]。TP-Ab為診斷梅毒螺旋體感染的重要依據(jù)。TP-PA使用梅毒螺旋體毒株制成抗原，檢測(cè)血清中的梅毒特異性抗體，靈敏度高，是現(xiàn)在公認(rèn)的梅毒血清確證試驗(yàn)；但檢測(cè)時(shí)需將標(biāo)本作系列稀釋，且試劑較貴，不宜大批量標(biāo)本檢測(cè)，又肉眼判斷結(jié)果，所以原始數(shù)據(jù)沒(méi)法保存[2]。TP-ELISA有操作簡(jiǎn)便，結(jié)果客觀準(zhǔn)確，試劑成本又低的特點(diǎn)，可作為早期梅毒診斷的方法。但TP-ELISA本身也存在問(wèn)題，如標(biāo)本中一些血漿蛋白紊亂，類過(guò)氧化物酶樣物質(zhì)的增高等，會(huì)造成假陽(yáng)性[3]。SYP成本低，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果明了快速，但不適于批量檢測(cè)。ELISA試劑操作方便，成本低，可使用半自動(dòng)或全自動(dòng)酶標(biāo)儀，原始數(shù)據(jù)容易保存，是大批量標(biāo)本梅毒篩查的好方法。TRUST是以類脂質(zhì)為抗原，檢測(cè)血清中的抗類脂質(zhì)抗體，為梅毒非特異性抗體。當(dāng)標(biāo)本梅毒螺旋體抗體滴度低于試劑檢測(cè)限時(shí)，可呈假陰性。從上述結(jié)果中可看到，對(duì)于對(duì)照組的檢測(cè)，120例中有6例呈假陽(yáng)性。SYP采用純化重組基因的梅毒抗原，以膠體金作為指示標(biāo)記于硝酸纖維素膜上進(jìn)行反應(yīng)，以雙抗原夾心法原理快速定性檢測(cè)梅毒螺旋體抗體，靈敏度較高。但血漿或血清中濃度過(guò)低時(shí)，SYP會(huì)呈假陰性反應(yīng)。有資料表明[1]，TPPA對(duì)早期梅毒的檢出率比較低，有可能是梅毒患者血清梅毒螺旋體抗體滴度未達(dá)到試劑盒的檢測(cè)范圍，而呈假陰性反應(yīng)的原因。TPPA是梅毒確證試驗(yàn)，它的敏感性和特異性相當(dāng)高，可操作比較復(fù)雜，對(duì)操作人員水平要求也高。TRUST是采用牛心臟中提取的卵磷脂、膽固醇、心磷脂組成的性病研究室抗原重懸于含有特制的甲苯胺紅溶液制成，檢測(cè)血漿或血清中的抗類脂質(zhì)抗體，即反應(yīng)素。有資料顯示[4,5]，TRUST的特異性和敏感性都低于TP-ELISA、SYP和TPPA法，與本文的結(jié)果是一致的。TRUST對(duì)三期梅毒、早期梅毒、潛伏期及治療后梅毒易呈假陰性反應(yīng)，而受到傳染病影響如結(jié)核病、瘧疾、風(fēng)疹、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、猩紅熱、自身免疫性溶血、肺炎及一些原因不明的發(fā)熱性疾病影響時(shí)，都會(huì)產(chǎn)生生物學(xué)陽(yáng)性反應(yīng)，還會(huì)受到孕婦、年齡等的影響而呈假陽(yáng)性。因此TRUST的特異性和敏感性有一定局限性，同時(shí)結(jié)果為肉眼觀察，易出現(xiàn)誤判和漏檢。TRUST不適于梅毒的診斷，只適于篩選試驗(yàn)，這種非特異性抗體滴度與梅毒活動(dòng)病程都是有關(guān)的，可用于觀察療效、再感染和復(fù)發(fā)。因此，同時(shí)采用TP-ELISA和TPPA 或TRUST進(jìn)行梅毒血清學(xué)檢測(cè)，既能觀察其療效，又可以提高梅毒陽(yáng)性率的檢出，非常有利于梅毒的早期診斷。

[1]鄒黎.梅毒血清學(xué)試驗(yàn)幾種檢測(cè)方法比較[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2006,13(21):3788.

[2]薛曉光,陳丹玲.梅毒RPR、TRUST、TPHA、TPPA的試驗(yàn)對(duì)比分析[J].海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2000,6(2):47.

[3]馮燁.梅毒血清學(xué)三種檢測(cè)方法的比較[J].實(shí)用臨床醫(yī)學(xué),2004,5(2):106.

[4]陳春梅,曾志良.潛伏梅毒85人血清學(xué)檢測(cè)分析[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志,2004,14(5):329-330.

[5]王露楠,鄧巍,李金明.梅毒螺旋體感染不同血清學(xué)診斷方法的臨床評(píng)價(jià)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,25(6):352-353.