冷凝集素在交叉配血過程中的影響

郭大洪

（江西省上饒市江西鳳凰醫(yī)院，江西 上饒 334000）

交叉配血試驗是輸血前必不可少的，是保證輸血安全的重要措施。臨床上患者血清中冷凝素抗體滴度增高，會帶來交叉配血試驗困難，在對這些患者交叉配血試驗時，冷凝素抗體被發(fā)現(xiàn)就顯得尤為重要，得以進一步確保臨床用血安全[1-4]。

1 材料與方法

1.1 研究對象

25例患者均為我院2008年5月至2012年3月凝聚胺法交叉配血試驗出現(xiàn)凝集的住院患者，年齡在45～70歲不等，其中以血透患者、腫瘤患者、發(fā)熱患者為主，血紅蛋白在35g/L至69g/L之間，都達到了臨床輸血指征。

1.2 檢測方法與試劑

凝聚胺法交叉配血，凝聚胺試劑由珠海貝索生物技術有限公司生產(chǎn)，冷凝素抗體滴度測定。

1.3 操作步驟

1.3.1 交叉配血試驗

取干燥潔凈試管2只，標主、次管，主管加受血者血漿2滴，獻血者3%～5%的紅細胞懸液1滴；次管加獻血者血漿2滴，受血者3%～5%紅細胞1滴；每管各加低離子介質(zhì)溶液0.6mL，混勻，室溫孵育1min；每管各加1滴凝聚胺溶液，混勻后靜止15s；以3500r/min離心15秒，傾去上清液，不要瀝干，輕輕搖動試管，目測紅細胞有無凝集，有凝集每管加入1滴重懸液，并輕輕混合，肉眼觀察凝集是否散開，再以顯微鏡判定結果。

1.3.2 冷凝集素試驗

取患者靜脈血2mL，置37℃溫度中，凝固后分離血清；取患者抗凝血1mL，以溫生理鹽水洗滌紅細胞3次，最后配成2%的紅細胞懸液；取10支小試管，每管加生理鹽水0.2mL，第一管加血清0.2mL，逐管稀釋至第9管，混勻后棄去0.2mL，第10管作對照；每管加2%紅細胞懸液0.2mL，搖勻，置4攝氏度冰箱2～4h后看結果，記錄有明顯凝集的最后一管之滴度，如第9管仍凝集，可繼續(xù)稀釋觀察其最高滴度。

2 結 果

25例患者凝聚胺法交叉配血試驗，主、次管都有不同程度的凝集顆粒出現(xiàn)，部分較明顯，后放入37攝氏度水浴5～10min，輕輕搖動，顆粒慢慢散開，倒入玻片，顯微鏡下可見紅細胞散在、彌漫排列，可以排除其他亞型抗體導致免役反應影響結果，交叉配血成功。凝集素抗體滴度的測定結果，25例患者冷凝集素抗體滴度結果為1/64～1/512之間。

3 討 論

冷凝集素是一種自身IgM完全抗體，這種抗體在低溫時可使自身或同型紅細胞發(fā)生可逆性凝集。凝集反應的高峰在0～4℃，當溫度回升到37℃時凝集又消失。部分人群都存在一定濃度的冷凝集素抗體，但是一般情況下正常人血清中的冷凝集素效價都在1/16以，不會引起臨床癥狀，但在某些病理情況下，冷凝集素效價可異常增高而引起比較嚴重的臨床癥狀為冷凝集素綜合征。

冷凝集素的存在也經(jīng)常會造成一些常用檢驗項目的失真，最常見的影響就是對血常規(guī)，血型測定的影響，特別是對血交叉配血試驗影響尤為注意。

典型病例∶患者女，53歲，因人軟乏力伴發(fā)熱7d。患者自訴于3個月前患有帶狀皰癥疹史，治愈后感人軟乏力，患者一直未引起重視，7d前癥狀加重，并反復出現(xiàn)發(fā)熱，到我市一所三甲醫(yī)院就診，考慮感染性貧血，給予相關對癥治療，后由于血交叉試驗出現(xiàn)凝集反應現(xiàn)象，未經(jīng)輸血治療。轉(zhuǎn)來我院，門診擬貧血待查，收住入院。血常規(guī)化驗結果為WBC1.4×109/L，RBC0.52×1012/L，Hb33g/L，PLT46×109/L。經(jīng)過各項檢查，最終確定該患者血液內(nèi)有高度冷凝集素抗體存在，在臨床醫(yī)師提出輸血治療申請后，我科血庫工作人員用凝聚胺法進行交叉配血，嚴格按照冷凝集素抗體存在的情況下操作，患者血液最終交叉配血成功，最后用抗人球蛋白微柱凝膠法也交叉成功，先后成功輸入4個單位的懸紅濾白。

通過25例冷凝集素患者的臨床交叉配血病例分析，高效價的冷凝集素抗體導致血交叉試驗不合，雖主、次管都有不同程度的凝集顆粒存在，但經(jīng)過37℃水浴5～10min后，凝集顆粒會慢慢散開。對于臨床檢驗及血庫工作人員，在交叉配血試驗過程中，難免會碰到冷凝集素的干擾，只要在工作中仔細、認真，結果的判定客觀準確，這些問題還是比較容易解決的。

最后為了輸入冷凝集素抗體被激活出現(xiàn)血液凝集現(xiàn)象，建議血液在輸入之前在37℃水浴適當加溫，輸入過程中緩慢滴入，這樣可以使患者更安全用血。

[1] 周建月，韋喜敢，楊海燕.冷抗體對血型鑒定和交叉配血的干擾及處理方法[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2011，8(1)：55-57.

[2] 林國連，詹奕榮，劉紅杏，等.冷凝集素對血型鑒定和交叉配血的影響相關研究分析[J].河北醫(yī)學，2010，16(3)：302-304.

[3] 楊世明，曹麗妍，張勇萍，等.自身冷抗體對血型鑒定和交叉配血試驗的影響[J].第四軍醫(yī)大學學報，2009，30(8)：50.

[4] 姜燕娟，龐桂芝，張趁利.高效價冷自身抗體引起血型鑒定及配血困難1例[J].臨床血液學雜志：輸血與檢驗版，2008，21(5)：520-520.