胃腸道間質瘤臨床病理及OCT3/4表達與意義

馬 琳 李貴柱(蚌埠醫學院病理生理學教研室，安徽 蚌埠 233030)

胃腸道間質瘤臨床病理及OCT3/4表達與意義

馬 琳 李貴柱1(蚌埠醫學院病理生理學教研室，安徽 蚌埠 233030)

目的探討本院49例胃腸道間質瘤臨床病理及干細胞因子OCT3/4在其中的表達及意義。方法回顧性研究蚌埠醫學院病理科2006～2009年三年間的存檔49例GIST病例的臨床病理學特征，免疫組化SP法檢測49例胃腸道間質瘤石蠟標本的OCT3/4表達狀況。結果61%病例OCT3/4表達陽性，表達于瘤細胞核，OCT3/4表達與生物學行為表現無相關性(P＞0.05)。結論OCT3/4可能參與了胃腸道間質瘤的發病機制但與生物學行為可能無關。

胃腸道間質瘤;OCT3/4;發生機制

胃腸道間質瘤(gastrointestinal stromal tumors，GIST)是消化道最常見的間葉源性腫瘤，組成了胃和小腸原發性非上皮性腫瘤的絕大部分，因KIT/PDGFRA基因突變所致，被認為可能起自原始的、具有多潛能分化的中胚葉間充質干細胞，由于分子靶向藥物對GIST的獨特療效使得準確評估GIST的發病機制及生物學行為越來越受到重視〔1～4〕。OCT-4也被稱為OCT3、POU5F1、OTF3或OTF4，是一個POU結構轉錄因子，位于染色體6p21.3上，OCT4和轉錄蛋白Sox2一起高表達于胚胎干細胞，但在所有分化后體細胞中減弱，作為胚胎干細胞的特異性基因，它們的過度表達對于維系未分化體細胞的多潛能性發揮關鍵作用，是維持未分化體細胞的多潛能性的信號網絡的關鍵調節點，因為胚胎干細胞與癌癥都具有自我更新這一關鍵特征，而GIST被認為可能起自原始的、具有多潛能分化的中胚葉間充質干細胞，因此我們設想OCT4在胃腸道間質瘤中也許可能會有高表達〔5，6〕。在本研究中，我們分析胃腸道間質瘤病例的臨床病理特征，用免疫組織化學方法檢測OCT3/4抗體在其中的表達狀況，為臨床GIST患者提供病理診斷和判斷預后，并為提高患者的生存提供重要的生物學檢測指標。

1 材料與方法

1.1 病人資料 我們回顧性分析蚌埠醫學院病理科2006～2009年存檔49例GIST病例。由兩位高年資病理醫師復習切片，鏡下形態學觀察，按每50個高倍視野計數核分裂相數，挑選合適蠟塊進行免疫組化染色。本組病例的病理診斷組織學符合典型GIST，CD117全部陽性。年齡20～85歲，平均57歲，男24例，女25例，局限性43例，其中胃部24例(49%)，直徑1～22 cm，平均8 cm;小腸11例(22%)，直徑2.5～19 cm，平均10 cm;結腸3例，平均直徑7 cm;十二指腸1例，徑2.8 cm;直腸部1例，直徑6.5 cm;腸系膜單發性1例，徑15 cm;腹膜后單發性1例，直徑24 cm;上腹部(具體部位不清)1例，直徑12.5 cm。多發性3例，均考慮為多灶性、區域性起源。考慮為網膜播散3例。

1.2 試劑與方法 抗體 CD117、CD34、desmin、SMA、S-100，鼠抗人OCT3/4免疫組化單克隆抗體(克隆號 C10，產品編號MAB-0618，形式:即用型)，即用型非生物素免疫組化 ElivisionTMPLUS檢測試劑盒，均購自福建福州邁新公司。按Fletcher等〔7〕推薦的GIST生物學行為評價表進行評估分級并進行分組。免疫組織化學方法采用SP兩步法檢測，連續切片，厚度4μm，OCT3/4抗體用pH9.0的EDTA修復液進行水煮加熱抗原修復。

1.3 結果判定 分陽性和陰性，OCT3/4抗體陽性為胞核呈棕黃色，染色強度明顯高于背景。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件進行χ2檢驗。

2 結果

2.1 GIST的鏡下觀察 GIST組織細胞學形態變化較大(圖1)，從梭形細胞到明顯的上皮樣細胞，惡性度較低者排列柵欄狀，梭形細胞有明顯的胞漿內空泡，上皮樣瘤細胞圓形、多角形或星狀，胞漿淡，小腸間質瘤細胞外骨樣纖維積聚成嗜伊紅小球，惡性度較高者有較多的核分裂相并可伴有壞死，細胞豐富致密，彌漫分布，與間質分界不清，腫瘤的間質結締組織少，血管較豐富。

圖1 GIST的病理學形態(HE，×200)

2.2 肉眼觀察 大體上，生物學行為評價惡性度較低者切面灰白灰黃色，質硬或韌，較干燥，呈膨脹性生長，而惡性度較高者結節狀或分葉狀腫塊，切面呈灰紅色或灰白色，質稚嫩或軟，濕潤，有的魚肉狀，易伴有出血壞死、囊性變，內含血性液及血塊，浸潤性生長，擠壓周圍組織形成假包膜。

2.3 GIST的免疫組化特征 CD117、CD34顯示于瘤細胞胞質和胞膜上，desmin、SMA、S-100顯示于胞質，CD117達100%陽性表達，CD34約80%陽性表達，desmin、SMA、S-100少量表達。OCT3/4表達于瘤細胞核，背景清晰(圖2)，總計約61%(30/49)病例OCT3/4表達陽性，按照生物學行為分組，OCT3/4表達各組間無相關性(P＞0.05)(見表1)。

表1 各組間OCT3/4表達狀況〔n(%)〕

圖2 GIST上皮型和梭型細胞核OCT3/4強陽性表達(SP法，×200)

3 討論

我們的研究發現GIST具有間葉性腫瘤的一般特征，大體上，生物學行為評價惡性度較低者切面灰白灰黃色，質硬或韌，較干燥，呈膨脹性生長，而惡性度較高者結節狀或分葉狀腫塊，切面呈灰紅色或灰白色，質稚嫩或軟，濕潤，有的魚肉狀，易伴有出血壞死、囊性變，內含血性液及血塊，浸潤性生長，擠壓周圍組織形成假包膜。組織學上惡性度較高者有較多的核分裂相并可伴有壞死，細胞豐富致密，彌漫分布，與間質分界不清，腫瘤的間質結締組織少，血管較豐富。

本研究發現胃腸道間質瘤病例OCT3/4總計約61%(30/49)表達陽性，強表達于瘤細胞的細胞核，OCT3/4表達提示GIST與胚胎干細胞一樣具有干細胞特性，也具有自我更新與多潛能的特征，OCT3/4可能參與了GIST的發生機制，在GIST的發生、發展中可能發揮著重要作用。

OCT3/4是迄今人們發現最早也是最重要的維持胚胎干細胞多潛能性和自我更新的關鍵基因，在具有多潛能的精原細胞瘤和胚胎性癌的原發性睪丸生殖細胞腫瘤中也可以檢測到。OCT3/4作為干細胞自我更新中重要的轉錄因子，在腫瘤發生發展中的作用也備受重視，其在低分化乳腺癌腫瘤組織中，表達水平顯著高于高分化乳腺癌腫瘤組織，Ⅳ級神經膠質瘤表達水平顯著高于Ⅱ級和Ⅲ級，轉移性肉瘤腫瘤組織OCT3/4的表達水平也顯著高于未轉移者〔5，8，9〕。但本研究發現 OCT3/4 表達與生物學行為間無統計學相關性，按照按Fletcher等〔7〕推薦的GIST生物學行為評價表進行評估分級分為極低度侵襲危險性全部強陽性表達，低度侵襲危險性陽性表達者也較高，而高度侵襲危險性者陽性表達只有50%。這與文獻報道的其他腫瘤中的表達不同，我們推測由于影響胃腸道間質瘤的生物學行為的因素很多，按現有文獻判斷指標應慎重，這些指標間可能存在良惡性交替的現象，通過臨床表現和形態學觀察遠遠不夠，有很多因素(特別是分子水平的改變)還知之甚少，OCT3/4有可能在將來成為分子水平的評估生物學行為的實用的指標。總之本研究對胃腸道間質瘤的生物學行為的評估有一定的參考價值，OCT3/4可能成為有用的分子水平評估指標。

1 侯英勇，朱雄增，王 堅，等.胃腸道間質瘤起源和分化的探討〔J〕.中華病理學雜志，2003;32(2):106-10.

2 楊其昌，季曉華，沈 屹，等.74例胃腸道間質瘤臨床病理與生物學行為評價〔J〕.中華病理學雜志，2005;34(1):6-10.

3 Yang J，Du X，Lazar AJ，et al.Genetic aberrations of gastrointestinal stromal tumors〔J〕.Cancer，2008;113(7):1532-43.

4 Dematteo RP，Gold JS，Saran L，et al.Tumor mitotic rate，size，and location independently predict recurrence after resection of primary gastrointestinal stromal tumors〔J〕.Cancer，2008;112(3):608-15.

5 王 育，肖世金，趙愛民.人重組OCT3/4真核表達載體構建及在卵巢癌細胞中的表達研究〔J〕.上海交通大學學報(醫學版)，2010;30(7):797-801.

6 Nakatake Y，Nobutaka F，Iwamatsu Y，et al.Klf4 cooperates with Oct3/4 and Sox2 to activate the Lefty1 core promoter in embryonic stem cells〔J〕.Mol Cell Biol，2006;26(20):7772-82.

7 Fletcher CD，Berman JJ，Corless C，et al.Diagnosis of gastrointestinal stromal tumors:a consensus approach〔J〕.Hum Pathol，2002;33:459-65.

8 Schoenhals M，Kassambara A，De Vos J，etal.Embryonic stem cellmarkers expression in cancers〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2009;383(2):157-62.

9 Abiko K，MandaiM，Hamanishi J，etal.Oct4 expression in immature teratoma of the ovary:relevance to histologic grade and degree of differentiation〔J〕.Am JSurg Pathol，2010;34(12):1842-8.

R735.2

A

1005-9202(2012)16-3421-03;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.16.029

蚌埠醫學院科研項目(No.BY0811)

1 合肥市第二人民醫院病理科

李貴柱(1975-)，男，碩士，醫師，主要從事腫瘤學研究。

馬 琳(1977-)，女，碩士，講師，主要從事腫瘤學研究。

〔2011-07-04收稿 2012-01-20修回〕

(編輯 曹夢園)