死亡受體5和死亡誘騙受體2在腰椎間盤組織中的表達及意義

朱 宇 陳清漢 馬希峰 來秋山 張明生 張仲寧 邵 佳

(鄭州大學第二附屬醫院骨科，河南 鄭州 450014)

死亡受體5和死亡誘騙受體2在腰椎間盤組織中的表達及意義

朱 宇 陳清漢 馬希峰 來秋山 張明生 張仲寧 邵 佳

(鄭州大學第二附屬醫院骨科，河南 鄭州 450014)

目的 探討死亡受體5(DR5)、死亡誘騙受體2(DCR2)在腰椎間盤中的表達及意義。方法 選取腰椎間盤突出癥行椎間盤組織摘除術的患者73例作為觀察組;另外尋找非正常死亡成人15例取腰椎間盤32個。采用PV6000兩步免疫組織化學染色法對兩組腰椎間盤進行檢測。結果 觀察組髓核及纖維環內的DR5細胞陽性率明顯高于對照組，兩組比較差異明顯(P＜0.05);DCR2細胞陽性率兩組比較差異不明顯，無統計學意義(P＞0.05)。結論 DR5可能參與了腰椎間盤組織的細胞凋亡過程。

死亡受體5;死亡誘騙受體2;腰椎;椎間盤

腫瘤壞死因子(TNF)超家族的成員在細胞凋亡中發揮了重要作用〔1〕，TNF相關細胞凋亡誘導配體(TRAIL)是最近發現的TNF中的一員，與其他成員不同，TRAIL在體內的存在方式僅有膜結合一種。目前發現TRAIL在體內有5種受體〔2〕，死亡受體5(DR5)和死亡誘騙受體2(DCR2)為其中兩種。本研究探討分析腰椎間盤突出患者髓核幾纖維環內DR5和DCR2的表達水平及意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2009年3月至2012年2月我院收治的腰椎間盤突出癥并行椎間盤組織摘除術的患者73例，其中男38例，女 35例;年齡 21～28〔平均(23.85±8.24)〕歲;病程10 d～5年，平均(15.83 ±10.58)w;其中 L3～42 例，L4～541 例，L5～S130例;包含型突出椎間盤49例，非包含型突出椎間盤24例。另外，尋找非正常死亡成人15例作為對照組，均身體健康且無腰椎間盤突出癥病史，其中男8例，女7例;年齡19～25〔平均(24.10±7.76)〕歲;獲得腰椎間盤32個，其中 L3～41個，L4～518個，L5～S113個。所取標本包括纖維環和髓核，血水通過生理鹽水清洗干凈，并以石蠟包埋。

1.2 方法 兩組患者均在相同條件下采用PV6000兩步免疫組織化學染色法檢測DR5、DCR2，其中DR5以肺癌、DCR2以子宮頸癌作為陽性對照，用磷酸鹽緩沖液(PBS)作為陰性對照，胞質內出現棕黃色顆粒樣物質為陽性。每張切片于髓核、纖維環區域各隨機選取10個高倍鏡視野，分別計數陽性細胞以及總細胞數量。

1.3 統計學方法 應用SPSS13.0統計軟件進行分析，數據資料以±s表示，計量資料采用t檢驗。

2 結果

觀察組髓核及纖維環內的DR5細胞陽性率明顯高于對照組，差異有統計學意義(P＜0.05);DCR2細胞陽性率兩組比較差異不明顯，無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩組患者DR5及DCR2陽性率(±s，%)

表1 兩組患者DR5及DCR2陽性率(±s，%)

與對照組比較:1)P＜0.05

總體對照組 15 36.05±30.25 12.89±7.36 25.83±17.95 23.01組別 n DR5細胞陽性率髓核 纖維環 總體DCR2細胞陽性率髓核 纖維環±26.25 14.38±16.24 18.53±21.05觀察組 73 49.83±24.171) 27.92±12.411) 41.55±17.371)29.94±24.27 13.92±15.04 24.27±16.22

3 討論

近年來有研究認為椎間盤的退行性變與細胞凋亡密切相關，發生退變的椎間盤中存在著Fas介導的凋亡途徑〔3〕，且其中有TNFα-TNFR和Trail-TrailR〔4〕的表達。目前發現的TrailR共有5種，其中R1和R2被稱為死亡受體，又叫DR4和DR5;R3及R4雖然可以與TRAIL結合，但并不能傳導凋亡新航，因此被稱為誘騙受體，又叫DCR1和DCR2;此外還有可溶性受體骨保護性蛋白(OPG)。

DR5是配體依賴型受體，經TRAIL活化后與Fas的某一結構域相互耦聯而形成死亡誘導信號復合體，隨后經過一系列的反應致使細胞DNA斷裂，直至細胞凋亡〔5〕。而DCR2胞質內含有的DD被截短，因此并不能夠完成傳遞信號的作用。其實TRAIL在人體的很多組織均有表達，有研究發現正常腰椎間盤髓核、纖維環以及軟骨終板中均有TRAIL表達，其中髓核表達最高，而纖維環表達最低〔3〕，這也提示了TRAIL受體可能誘導了椎間盤細胞的凋亡途徑。

本研究發現，腰椎間盤突出癥患者髓核及纖維環內的DR5細胞陽性率明顯高于正常人，而DCR2細胞陽性率差別不明顯，因此認為腰椎間盤組織中DR5可能參與了細胞凋亡。

1 Park JB，Lee JK，Park SJ，et al.Mitchondrial involvement in fas-mediated apoptosis of human lumbar disc cells〔J〕.JBone Joint Surg(Am)，2005;87(6):1338-42.

2 Weiler C，Nerlich AG，Bachmeier BE，etal.Expression and distribution of tumor necrosis factor alpha in human lumbar intervertevral discs:a study in surgical specimen and autopsy controls〔J〕.Spine，2005;30(1):44-53.

3 王艷鴿，李燕杰.正常人群中DR5天然自身抗體的分布特點及與腫瘤患者的差異分析〔J〕.中國免疫學雜志，2010;26(9):797-800.

4 Cui M，Wang L，Liang X，etal.Blocking TRAIL-DR5 signalingwith soluble DR5 reduces delayed neuronal damage after transient global cerebral ischemia〔J〕.Neurobiol Dis，2010;39(2):138-47.

5 Pavet V，Beyrath J，Pardin C，et al.Multivalent DR5 peptides activate the TRAIL death pathway and exert tumoricidal activity〔J〕.Cancer Res，2010;70(3):1101-10.

R681.5+3

A

1005-9202(2012)16-3429-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.16.033

朱 宇(1978-)，男，主治醫師，主要從事脊柱外科疾病的臨床診治工作。

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〔2012-01-05收稿 2012-01-21修回〕

(編輯 袁左鳴)