神黃豆化學成分研究

黃 波，黃振元，武拉斌，李 雯，姜 北*，黎勝紅

1大理學院藥學院，大理671000;2中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室，昆明650204

神黃豆化學成分研究

黃 波1，黃振元1，武拉斌1，李 雯1，姜 北1*，黎勝紅2*

1大理學院藥學院，大理671000;2中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室，昆明650204

對神黃豆Cassia agnes Brenan莖部的化學成分進行了研究。從其甲醇提取物的乙酸乙酯萃取部分分離得到了10個化合物，根據理化性質和波譜數據鑒定其結構分別為：(-)-表阿夫兒茶精(1)、12，13-dihydromicromeric acid(2)、白樺脂醇(3)、8(17)，12E，14-labdatrien-19-ol(4)、β-谷甾醇(5)、胡蘿卜苷(6)、二十四烷酰單甘油酯(7)、sitoindoside I(8)、9Z，12Z-octadecadienoic acid(9)和間苯三酚(10)。以上化合物均為首次從神黃豆中發現。

神黃豆;化學成分;結構分析

神黃豆(Cassia agnes Brenan)系豆科(Leguminosae)決明屬喬木植物，生山地林中，產云南、廣西等省區以及中南半島。果有類似興奮劑作用，種子入藥，可治胃痛、感冒、瘧疾、麻疹、水痘、便泌等［1］，目前還未有對神黃豆化學成分研究的文獻報道。為開發利用神黃豆植物資源，近來我們對神黃豆化學成分進行了研究，共計從該植物莖粗提物的乙酸乙酯部位分離、鑒定了10個化學成分，這些化合物均為首次從神黃豆中分離得到。

1 儀器與材料

VG Auto Spec-3000質譜儀;BrukerAM-400、Bruker DRX-500、Avance III-600核磁共振儀。柱色譜硅膠(200～300目)和薄層色譜硅膠GF254均為青島海洋化工廠生產;凝膠為Sephadex LH-20(Amersham Biosciences，Sweden)。所用試劑均為工業重蒸。神黃豆(Cassia agnes Brenan)莖于2011年1月采自云南省西雙版納，由中國科學院昆明植物研究所黎勝紅研究員鑒定，植物標本存放于昆明植物研究所黎勝紅研究員實驗室。

2 提取分離

神黃豆植物干燥莖10 kg，粉碎后用工業甲醇冷浸提取4次，減壓濃縮得浸膏;用水分散浸膏，再用乙酸乙酯萃取，蒸干得浸膏260 g。浸膏用硅膠(200～300目，2.6 kg)柱層析，氯仿-丙酮梯度洗脫(1∶0，9∶1，8∶2，7∶3，5∶5，0∶1)，在TLC檢測下合并相似流分得9個組分。將各組分再次硅膠柱層析，組分1 (3 g)經石油醚-乙酸乙酯(15∶1)和石油醚-丙酮(10∶1與3∶1)反復洗脫得化合物4(11 mg)，相應組分再經Sephadex LH-20(氯仿-甲醇1∶1)純化得化合物3(50 mg)和9(20 mg)。組分2(10 g)經石油醚-丙酮(10∶1)反復洗脫后，重結晶得化合物5(3 g)。組分3(2 g)經反復硅膠柱層析(石油醚-丙酮10∶1)，再經Sephadex LH-20(氯仿-甲醇1∶1)純化得到化合物2(7 mg)。組分4(5 g)經硅膠柱色譜，用氯仿-甲醇(50∶1)洗脫，再經Sephadex LH-20(甲醇)純化得化合物7(200 mg)。組分5(3 g)經氯仿-甲醇(10∶1)洗脫，得化合物10(10 mg)。組分6(10 g)經氯仿-甲醇(10∶1)洗脫，重結晶得化合物1(1 g)。組分7(3 g)經氯仿-甲醇(10∶1)洗脫，再經Sephadex LH-20(甲醇)反復純化得化合物6(201 mg)和8(20 mg)。

3 結構鑒定

化合物1 針狀結晶(甲醇);C15H14O5;EI-MS m/z 274［M］+。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ∶7.23(2H，d，J=8.5 Hz，H-2'，6')，6.72(2H，d，J= 8.5 Hz，H-3'，5')，5.90(1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，5.72(1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，4.80(1H，s，H-2)，4.02(1H，m，H-3)，2.70(1H，dd，J=16.4，4.5 Hz，CH2)，2.48(1H，dd，J=16.2，3.4 Hz，CH2)。13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ：77.9(d，C-2)，64.8 (d，C-3)，28.2(t，C-4)，156.2(s，C-5)，94.1(d，C-6)，156.4(s，C-7)，95.1(d，C-8)，156.2(s，C-9)，98.4(s，C-10)，130.0(s，C-1')，128.2(d，C-2'，C-6')，114.4(d，C-3'，C-5')，155.7(s，C-4')。由以上數據分析與文獻［2］報道一致，故化合物1鑒定為(-)-表阿夫兒茶精。

化合物2 白色晶體(丙酮);C30H48O3;EI-MS m/z 456［M］+。1H NMR(CD3COCD3，400 MHz)δ：5.23(1H，d，J=10.8 Hz，H-30α)，4.71(1H，d，J= 10.8 Hz，H-30β)，3.28(1H，dd，J=11.0，4.6 Hz，H-3)，1.69，1.16，0.97，0.91，0.79，0.74(各3H，s，H-23，24，25，26，27，29)。13C NMR(CD3COCD3，150 MHz)δ：39.4(t，C-1)，28.0(t，C-2)，78.5(d，C-3)，39.7(s，C-4)，56.1(d，C-5)，18.9(t，C-6)，31.3(t，C-7)，41.2(s，C-8)，47.9(d，C-9)，37.6 (s，C-10)，21.3(t，C-11)，37.6(t，C-12)，51.1(d，C-13)，43.0(s，C-14)，30.4(t，C-15)，26.2(t，C-16)，56.8(s，C-17)，38.7(d，C-18)，49.9(d，C-19)，151.6(s，C-20)，35.0(t，C-21)，33.0(t，C-22)，28.8(q，C-23)，15.1(q，C-24)，16.5(q，C-25)，16.6(q，C-26)，16.6(q，C-27)，177.5(s，C-28)，19.6(q，C-29)，110.1(t，C-30)。以上波譜數據與文獻［3］報道基本一致，故化合物2鑒定為12，13-dihydromicromeric acid。

化合物3 無色針晶(氯仿);C30H50O2;EI-MS m/z 442［M］+。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ：4.68 (1H，s，H-29α)，4.56(1H，s，H-29β)，3.18(1H，dd，J=10.9，4.8 Hz，H-3)，2.36(2H，m，H-28)，1.90(3H，s，H-30)，1.33，1.02，0.93，0.78，0.66 (各3H，s，5×CH3)。13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ：38.7(t，C-1)，27.4(t，C-2)，78.9(d，C-3)，38.8 (s，C-4)，55.3(d，C-5)，18.3(t，C-6)，34.3(t，C-7)，41.0(s，C-8)，50.5(d，C-9)，37.3(s，C-10)，20.9(t，C-11)，25.2(t，C-12)，37.2(d，C-13)，42.8(s，C-14)，27.1(t，C-15)，29.2(t，C-16)，47.9(s，C-17)，47.9(d，C-18)，48.8(d，C-19)，150.9(s，C-20)，29.8(t，C-21)，34.0(t，C-22)，28.1(q，C-23)，15.4(q，C-24)，16.1(q，C-25)，16.1(q，C-26)，14.8(q，C-27)，60.6(t，C-28)，109.3(t，C-29)，19.1(q，C-30)。以上波譜數據與文獻［4］報道基本一致，故化合物3鑒定為白樺脂醇。

化合物4 油狀物(氯仿);C20H32O。1H NMR (CDCl3，500 MHz)δ：6.32(1H，dd，J=15.0，11.0 Hz，H-14)，5.39(1H，t，J=6.3 Hz，H-12)，5.03 (1H，d，J=15.0 Hz，H-15β)，4.87(1H，d，J=11.0 Hz，H-15α)，4.80(1H，s，H-17α)，4.45(1H，s，H-17β)，3.76(1H，d，J=10.5 Hz，H-19β)，3.39(1H，d，J=10.5 Hz，H-19α)，1.76(3H，s，H-16)，1.34 (3H，s，H-18)，0.98(3H，s，H-20)，0.69(3H，s，H-19)。13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ：38.8(t，C-1)，23.2(t，C-2)，38.3(t，C-3)，39.4(s，C-4)，57.1 (d，C-5)，27.0(t，C-6)，35.3(t，C-7)，148.0(s，C-8)，56.1(d，C-9)，39.0(s，C-10)，24.1(d，C-11)，133.9(d，C-12)，133.4(s，C-13)，141.6(d，C-14)，107.7(t，C-15)，15.2(q，C-16)，109.9(t，C-17)，19.0(q，C-18)，65.0(t，C-19)，11.8(q，C-20)。以上波譜數據與文獻［5］報道基本一致，故化合物4鑒定為8(17)，12E，14-labdatrien-19-ol。

化合物5 無色晶體(丙酮);C29H50O;EI-MS m/z 414［M］+(100)，396(56)，381(25)，369 (8)，351(9)，329(33)，314(8)，303(45)，289 (8)，273(31)，255(44)，231(21)，213(31)。在TLC上多種不同溶劑系統展開時，與β-谷甾醇標準品Rf值一致，MS數據與文獻［6］報道相符，故化合物5鑒定為β-谷甾醇。

化合物6 白色粉末(丙酮);在多種不同溶劑系統中，化合物6與胡蘿卜苷標準品共薄層色譜，Rf完全一致，故確定為胡蘿卜苷。

化合物7 白色無定形粉末(甲醇);C27H54O4; EI-MS m/z 443［M+H］+;368，351，134，112，98，57。1H NMR(C5H5N，400 MHz)δ：4.70(1H，dd，J =11.0，4.5 Hz，H-1α)，4.64(1H，dd，J=11.0，7.5 Hz，H-1β)，4.44(1H，m，H-2)，4.11(2H，m，H-3)，2.34(2H，t，J=7.5 Hz，H-2')，1.62(2H，m，H-23')，1.29-1.99(40H，m，H3'-22')，0.84(3H，t，J =6.5 Hz，H-24')。以上數據與文獻［7］報道基本一致，故化合物7鑒定為二十四烷酰單甘油酯。

化合物8 白色粉末(氯仿-甲醇);C51H90O7。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ：5.32(1H，d，J= 4.7 Hz，H-6)，4.35(1H，d，J=7.5 Hz，H-1')，4.30 (2H，m，H-6')，3.52(2H，m，H-3'，H-4')，3.45 (1H，m，H-3)，3.40(2H，m，H-2'，H-5')，0.96(3H，s，H-19)，0.90(3H，d，J=6.0 Hz，H-21)，0.85 (3H，d，J=6.6 Hz，H-27)，0.82(3H，t，J=7.8 Hz，H-29)，0.81(3H，d，J=6.8 Hz，H-26)，0.65(3H，s，H-18)。13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ：36.6(t，C-1)，27.2(t，C-2)，73.7(d，C-3)，38.9(t，C-4)，140.3(s，C-5)，122.0(d，C-6)，31.9(t，C-7)，31.8 (d，C-8)，50.1(d，C-9)，36.4(s，C-10)，21.1(t，C-11)，29.6(t，C-12)，42.3(s，C-13)，56.1(d，C-14)，24.3(t，C-15)，38.2(t，C-16)，56.2(d，C-17)，11.9(q，C-18)，19.3(q，C-19)，36.6(d，C-20)，18.8(q，C-21)，34.0(t，C-22)，28.3(t，C-23)，45.7(d，C-24)，29.3(d，C-25)，19.3(q，C-26)，19.8(q，C-27)，23.2(t，C-28)，11.8(q，C-29)，101.2(d，C-1')，76.1(d，C-2')，79.7(d，C-3')，73.3(d，C-4')，70.3(d，C-5')，63.4(t，C-6')，174.2(s，RCOO)，29.1(t，CH2'')，14.1(q，CH3'')。以上波譜數據與文獻［8］報道基本相符，故化合物8鑒定為sitoindoside I。

化合物9 黃色油狀物(氯仿);C18H32O2。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ：5.30～5.42(4H，m，H-9，10，12，13)，2.76(2H，m，H-11)，2.37(2H，t，J= 7.5 Hz，H-2)，2.05(4H，m，H-8，H-14)，1.63(2H，m，H-3)，1.25-1.31(14H，overlap，H-4 to H-7，H-15 to H-17)，0.86(3H，t，J=7.0 Hz，H-18)。以上數據與文獻［9］報道基本一致，故化合物9鑒定為9Z，12Z-octadecadienoic acid。

化合物 10 黃色粉末;C6H6O3。1H NMR (CD3COCD3，500 MHz)δ：8.24(3H，s，OH-1，3，5)，5.85(3H，d，J=3.0 Hz，H-2，4，6)。13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ：160.0(s，C-1，3，5)，95.3 (d，C-2，4，6)。以上數據與文獻［10］報道基本一致，故化合物10鑒定為間苯三酚。

致謝：所有光譜數據均由中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室分析測試中心測定。

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Chemical Constituents from Cassia agnes Brenan

HUANG Bo1，HUANG Zhen-yuan1，WU La-bin1，LI Wen1，JIANG Bei1*，LI Sheng-hong2*1College of Pharmacy，Dali University，Dali 671000，China;2Kunming Institute of Botany，Kunming 650204，China

Ten compounds were isolated from ethyl acetate fraction of the methanolic extract of Cassia agnes Brenan and by means of spectroscopic analysis，their structures were identified as(-)-epiafzelechin(1)，12，13-dihydromicromeric acid(2)，betulin(3)，8(17)，12E，14-labdatrien-19-ol(4)，β-sitosterol(5)，daucosterol(6)，tetracosanoic acid 2，3-dihydroxypropyl ester(7)，sitoindoside I(8)，9Z，12Z-octadecadienoic acid(9)and phloroglucinol(10).All compounds were isolated from this plant for the first time.

Cassia agnes Brenan;chemical constituents;structural analysis

1001-6880(2012)04-0437-03

2011-10-08 接受日期：2012-01-16

*通訊作者 Tel：86-872-2257316;E-mail：northjiang@yahoo.com;shli @mail.kib.ac.cn

R284.2

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