二氧化碳超臨界流體萃取兩面針根揮發(fā)油成分的氣相色譜－質(zhì)譜分析＊

周勁帆，覃富景，馮 潔，賴茂祥

(1.廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣西 南寧 530021;2.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022)

兩面針為廣西特色大宗中藥材之一，為蕓香科花椒屬植物兩面針 Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.的干燥根，被廣泛應(yīng)用于中醫(yī)處方、中成藥及精細(xì)化工產(chǎn)品中，為數(shù)十種中成藥的原料藥材，歷代本草及中國(guó)藥典均有收載，具有行氣止痛、活血散瘀、祛風(fēng)通絡(luò)之功效[1]，主要用于氣滯血瘀引起的跌撲損傷、風(fēng)濕痹痛、胃痛、牙痛、毒蛇咬傷、外治湯火燙傷等，近年研究發(fā)現(xiàn)其還有抗腫瘤作用[2－4]。關(guān)于兩面針?biāo)幉膿]發(fā)油化學(xué)成分分析的研究已有文獻(xiàn)報(bào)道[5]。筆者應(yīng)用二氧化碳超臨界流體萃取(SFE－CO2)兩面針根揮發(fā)油，并應(yīng)用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(GC－MS)技術(shù)對(duì)揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行分析，鑒定其化學(xué)成分結(jié)構(gòu)，報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

HL－(2+1)L/50Mpa－UBQ型超臨界流體二氧化碳萃取儀(杭州華黎泵業(yè)有限公司);Tracems 2000型氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Finnigan公司)。兩面針根于2010年10月采自廣西南寧市邕寧縣，自然涼干后再經(jīng)微波烘干，粉碎過(guò)篩，生藥標(biāo)本由廣西醫(yī)科大學(xué)馮潔副教授鑒定為蕓香科(Rutaceae)花椒屬植物兩面針Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.植物的根，憑證樣本存放于廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院。

2 方法與結(jié)果

2.1 揮發(fā)油的制備

采用SFE－CO2技術(shù)，萃取釜壓力25 MPa，溫度47℃，分離釜1壓力7 MPa，分離釜2壓力5 MPa，釜1和釜2溫度均為室溫，萃取時(shí)間 3.5 h(靜態(tài)時(shí)間 1 h，動(dòng)態(tài)時(shí)間 2.5 h)，流速 20 L/h。用無(wú)水硫酸鈉干燥后得淡黃色油狀物，備用。

2.2 GC－MS聯(lián)用分析

色譜柱為 DB－5 MS石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm);氣化溫度270℃;程序升溫初始溫度為60℃，維持2 min，以10℃ /min升溫速率升至120℃，再以5℃ /min升至180℃，接著以3℃ /min升至180℃，維持10 min;載氣為高純氦氣，流量為1.0 mL/min。取2.1項(xiàng)制得的淡黃色油狀物，用氯仿溶解，制成 5.0 g/L 的溶液，0.45 μL 微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣量為0.8 μL，分流比 40 ∶1，溶劑延遲時(shí)間 2 min，EI電離源 70 eV，離子源溫度200℃，加速電壓200 eV，掃描質(zhì)量范圍 m/z 35～650。對(duì)總離子流圖中各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得到質(zhì)譜圖，通過(guò)Xcalibur工作站NIST標(biāo)準(zhǔn)圖庫(kù)進(jìn)行檢索，確認(rèn)各化合物;通過(guò)Xcalibur工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法計(jì)算各化合物在揮發(fā)油中的相對(duì)百分含量。

結(jié)果從兩面針根的揮發(fā)油中檢出34個(gè)化合物，GC－MS圖見(jiàn)圖1;鑒定了其中23個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，占揮發(fā)油總量的95.12%，見(jiàn)表1。

圖1 兩面針根揮發(fā)油的GC－MS總離子流圖

表1 兩面針根揮發(fā)油化學(xué)成分及其含量

3 討論

應(yīng)用GC－MS聯(lián)用法分析兩面針根化學(xué)成分，結(jié)果表明其主要化學(xué)成分為萜類，其中蓽澄茄烯醇相對(duì)含量高達(dá)49.96%，其次是亞麻油酸和油酸，含量分別為14.34%和10.16%。橙花叔醇有不尋常的鮮蘋(píng)果香，可賦有趣的、持久的花香氣味，有一定的協(xié)調(diào)性能和定香作用;亞麻油酸為人體必需脂肪酸，在降低血液膽固醇和血脂、預(yù)防心血管疾病、清除人體過(guò)氧化物、增強(qiáng)免疫力、預(yù)防糖尿病等方面有著十分重要的生理意義[6];油酸同樣為人體所必需的不飽和脂肪酸，有多種生物活性，可以減少小鼠胰島細(xì)胞CCKAR mRNA的表達(dá)以及降低胰島素的分泌量[7]。文獻(xiàn)[5]中，斯杷土烯醇[(－)－spathulenol]的含量最高，達(dá) 55.21% ，其次為異斯杷土烯醇(isospathulenol，6.35%)和異香樹(shù)素環(huán)氧化物(isoaromadendrine epoxide，3.88%)。本研究報(bào)道的 SFE－CO2法萃取兩面針根揮發(fā)油的主要成分與文獻(xiàn)[5]的主要成分有別，可能是與產(chǎn)地、采收期、提取方法等因素有關(guān)。

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[2]劉麗敏，劉華鋼，羅 丹.氯化兩面針堿體外和體內(nèi)的抗腫瘤作用[J].中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2009，23(3):214－218.

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