散結化瘀膠囊提取工藝研究

張小莉，葛 莉，廉援朝

(1.陜西省咸陽市藥品檢驗所，陜西 咸陽 712000；2.陜西中醫學院2010級研究生，陜西 咸陽 712046；

3.長慶興隆園醫院，陜西 西安 710002)

1 儀器與試藥

散結化瘀膠囊(陜西省中醫藥研究院研制，批號為20110301)由丹參、紅曲、赤芍、丹皮、炙黃芪、法半夏、瓜蔞皮、水蛭粉、葛根、銀杏葉、三七粉、黃連、薤白13味藥組方，用于胸痹心痛病的預防和治療。為了研究其水提工藝的最佳條件，參照文獻[1－3]，筆者采用正交試驗法，以丹酚酸B為考察指標，對水提工藝條件進行優選，為進一步的新藥研究奠定基礎。

高效液相色譜儀(Waters966型恒流泵；Waters966二極管陣列檢測器，活德國際貿易＜上海＞有限公司；Millennium 32色譜工作站)；Kromasil C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；H66025T型超聲波清洗機；TGL－16G型離心機(上海安亭科學儀器廠)；HCTP11B10型托盤藥物天平(北京市宣武區天平廠)；四孔水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司)。丹酚酸B對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為110722－200309)；液相用試劑為色譜純(美國Fisher scintific)、水為超純水；其他試劑均為分析純。丹參、炙黃芪、法半夏、瓜蔞皮、葛根、銀杏葉、薤白等中藥均購自陜西省藥材公司，經陜西省中醫藥研究院副主任藥師王衛鋒鑒定為真品。

2 方法與結果

2.1 工藝設計

采取加熱回流提取法，提取時選擇了加水量(因素A)、提取時間(因素B)及提取次數(因素C)3個因素，每個因素選取3個水平設計了正交試驗方案，按L9(34)正交表安排試驗，平行操作，以丹酚酸B的含量和出膏量作為考察指標對工藝進行優選。試驗因素水平見表1。

表1 提取試驗水平因素

2.2 溶液制備

按處方比例量稱取水提工藝部分的藥材，共9份，按正交試驗表下設計的試驗條件以加熱回流方式進行提取，合并提取液。將上述提取液濃縮，定容至一定體積，制得樣品溶液。

2.3 收膏率測定

取各正交試驗號濾液50mL，于干燥蒸發皿中水浴蒸干，80℃烘箱干燥至干，取出，迅速置干燥器中放冷，稱重，計算。

2.4 丹酚酸B含量測定

色譜條件及系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇－乙腈－甲酸－水(30∶10∶1∶59)為流動相；檢測波長為286 nm。

溶液制備：取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含0.45mg的溶液，搖勻，即得對照品溶液。分別精密吸取各提取液5mL，置10mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，離心，取上清液，即得供試品溶液。

測定方法：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

2.5 正交試驗

結果見表2。

將表2的正交試驗結果進行方差分析，結果見表3。

試驗結果表明，煎煮次數對丹酚酸B的提取量影響較大。由正交試驗及方差分析結果得知，最佳工藝為A2B3C3。即加12倍量水煎煮提取3次，每次1.5 h。

2.6 驗證試驗

按1.5倍處方量稱取各藥材，共3份，按照所選提取條件試驗，分別精密吸取藥液5mL，按擬訂方法測定含量；再分別量取各溶液50mL，按照正交試驗出膏量測定方法測定出膏率。含量測定及出膏量結果見表4。3次驗證試驗折算成處方量結果后，檢測指標接近或高于正交表中最優值，說明優選的提取條件基本可行。

表2 水提工藝 L9(34)正交試驗表

表3 丹酚酸B含量(Ⅰ)和出膏量(Ⅱ)方差分析表

3 討論

通過本研究設計的提取工藝，優化了散結化瘀膠囊水煎提取工藝，其最佳提取工藝為：加12倍量水煮3次，每次1.5 h。根據本試驗優選的最佳工藝，經驗證性試驗表明，此法穩定，質量可控。在丹酚酸B含量測定過程中，考慮到本品是由多種藥味組方的復方制劑，有很多干擾成分，經多次摸索，選擇甲醇－乙腈－甲酸－水(30∶10∶1∶59)為流動相，目標成分達到了很好的分離效果。

表4 驗證試驗結果

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：230.

[2]商麗華，龍海東，方樂堯，等.骨仙片質量標準提高研究[J].中成藥，2010，32(2)：335－337.

[3]朱 軍，陳富超，李 鵬，等.正交實驗優選補虛顆粒水提工藝[J].醫藥導報，2010，29(2)：231－233.