鹽酸小檗堿結(jié)腸定位微丸的制備＊

賈少輝，張春燕，孫珊珊，王 汀，趙 穎

（濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 日照 276826）

鹽酸小檗堿為《中國藥典》收載的常用抗菌藥物，臨床主要用于治療腸炎，療效顯著。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)其還有抗病毒、抗腫瘤、抗糖尿病等作用[1]。但傳統(tǒng)的鹽酸小檗堿片劑或膠囊口服后，在胃內(nèi)崩解，藥物成分大多數(shù)被胃酸降解；而普通腸溶制劑藥物主要在小腸內(nèi)釋放，大部分藥物經(jīng)小腸吸收入血，且因首過效應(yīng)使藥物代謝失活，會(huì)使到達(dá)結(jié)腸段的藥物濃度降低，治療效果不理想。直腸給藥個(gè)體差異較大，藥物分布不均勻，僅限于直腸和乙狀結(jié)腸，達(dá)不到橫結(jié)腸和升結(jié)腸，且使用不便[2]。如果采用結(jié)腸靶向給藥，可使藥物集中在結(jié)腸內(nèi)釋放，藥物分布均勻，且結(jié)腸段血流量少，物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)速度緩慢，藥物在結(jié)腸滯留時(shí)間較長，有利于臨床治療。為了提高鹽酸小檗堿的生物利用度，有人曾以肉豆蔻酸異丙酯、聚氧乙烯蓖麻油、甘油等制備納米乳[3]，用薄膜蒸發(fā)法制備鹽酸小檗堿脂質(zhì)體[4]。本試驗(yàn)中選用歐巴代為包衣材料，以微丸為載體，采用擠出滾圓法制備鹽酸小檗堿微丸，旋轉(zhuǎn)包衣，紫外分光光度法測定微丸在不同釋放條件下的釋放度，探討微丸制備的最優(yōu)處方，旨在于開發(fā)出鹽酸小檗堿的定位給藥制劑。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

JBZ－300型多功能微丸包衣造粒機(jī)（遼寧醫(yī)聯(lián)新藥技術(shù)研究所）；ZRS－8G型智能溶出試驗(yàn)儀（天津大學(xué)無線電廠）；79HW－1型恒溫磁力攪拌器（江蘇金壇市榮華儀器制造有限公司）。鹽酸小檗堿（四川協(xié)力制藥有限公司，批號(hào)為20090405）；微晶纖維素（批號(hào)為20090810）、羧甲基淀粉納（批號(hào)為20101001）均來自安徽山河藥用輔料有限公司；磷酸二氫鈉（天津市廣成化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)為20090702）；磷酸氫二鈉（天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠，批號(hào)為20100608）；歐巴代（上海卡樂康包衣技術(shù)有限公司，批號(hào)為SH542283）。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備方法選擇

微丸的制備首先應(yīng)根據(jù)藥物性質(zhì)、臨床用藥的要求和設(shè)備條件等選擇輔料和具體制備方法。通常微丸的制備包括擠出滾圓法、流化床造粒、離心包衣制備、噴霧制備等方法[5]。由于擠出滾圓法是現(xiàn)在較成熟的微丸制備方法，具有操作簡單、快速，適合大規(guī)模生產(chǎn)、一次性成丸合格率高等特點(diǎn)。故本試驗(yàn)選擇擠出滾圓法制備鹽酸小檗堿結(jié)腸控釋微丸。

2.2 微丸制備

將鹽酸小檗堿、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉按處方量混合均勻，加入適量20％乙醇制軟材。制好的軟材經(jīng)過擠出機(jī)的篩孔擠出，擠出的條狀軟材進(jìn)入滾圓機(jī)滾圓，擠出速率為20 r/min，滾圓頻率為8～10hz，滾圓時(shí)間為30～45min。滾圓后置60℃烘箱干燥1h，篩選18～20目之間的微丸進(jìn)行包衣。

2.3 包衣液配制

將80％乙醇與水的混合溶劑適量置磁力攪拌器上，開動(dòng)攪拌器，攪拌溶液使其形成漩渦，同時(shí)避免卷入過多的空氣，將歐巴代粉末均勻地加入到漩渦中，避免有粉末漂浮在液體表面，待所有的歐巴代全部加入后，降低攪拌速率，使漩渦消失，繼續(xù)攪拌45min。

2.4 方法學(xué)考察

檢測波長選擇：精密稱取適量鹽酸小檗堿，用pH=7.6的磷酸鹽緩沖液定容，配制成質(zhì)量濃度為60μg/mL的溶液，以pH=7.6緩沖溶液作為空白對(duì)照液，按2010年版《中國藥典（二部）》附錄ⅣA中紫外分光光度法規(guī)定，在200～400 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿在263 nm波長處有最大吸收。

輔料干擾試驗(yàn)：將所用輔料按處方組成混合后，用pH=7.6的磷酸鹽緩沖液分別配制成相應(yīng)比例的空白輔料溶液，搖勻，0.45μm微孔濾膜過濾，濾液在263 nm波長處掃描。結(jié)果表明輔料在此波長處無吸收干擾。

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：精密稱取鹽酸小檗堿0.97mg，置50mL容量瓶中，用pH=7.6的磷酸鹽緩沖液溶解并定容，搖勻，作為對(duì)照品溶液備用。精密量取鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液1，2，5，10，20mL，置50 mL容量瓶中，加pH=7.6的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度。以pH=7.6的磷酸鹽緩沖液作為空白溶液，在最大吸收波長263 nm處測定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)對(duì)質(zhì)量濃度作圖，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程 A=0.08017C－0.125 36，r2=0.9999（n=5）。

2.5 釋放度測定

按2010年版《中國藥典（二部）》附錄ⅩD釋放度測定法第二法規(guī)定的槳法評(píng)價(jià)包衣微丸的體外釋藥性能。取包衣微丸6份，置溶出杯中，溶出介質(zhì)為 750 mL，轉(zhuǎn)速為 50 r/min，溫度為（37± 0.5）℃。首先以0.1 mol/L鹽酸溶液（人工胃液）為溶劑，轉(zhuǎn)速100 r/min，2h時(shí)檢查崩解情況，并立即棄去鹽酸溶液加入pH=7.6（人工腸液）的磷酸鹽緩沖液，繼續(xù)測定；在5，10，20，30，45min時(shí)各取溶出液6mL，并及時(shí)補(bǔ)充新介質(zhì)6mL。濾過，取濾液2mL，置50 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，照紫外分光光度法，在263nm波長處測定吸光度。結(jié)果見圖1。試驗(yàn)結(jié)果表明，在0.1mol/L鹽酸溶液中攪拌2h后微丸仍保持圓整，微丸在其中的釋放度小于10％，而在pH=7.6緩沖液中45 min累積釋放度（Q）大于90％。體外釋放結(jié)果表明，該微丸具有結(jié)腸控釋的特點(diǎn)。

圖1 微丸在pH=7.6緩沖液中的累積釋放度

3 討論

多次預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明，鹽酸小檗堿與微晶纖維素的比例會(huì)影響微丸在緩沖溶液中的崩解與釋放。曾考察了鹽酸小檗堿與微晶纖維素分別為1∶3，1∶5，1∶1，5∶1，2∶1，3∶1時(shí)的具體影響。為增強(qiáng)微丸的可塑性與圓整度，在初擬處方中，試圖增加微晶纖維素的比重，但對(duì)比不同處方的崩解時(shí)間，結(jié)果在鹽酸小檗堿與微晶纖維素比例為2∶1時(shí)，崩解時(shí)間最短。為改善崩解問題，在處方中又加入了適量羧甲基淀粉鈉，將崩解時(shí)限控制在5min之內(nèi)。

為準(zhǔn)確模擬胃腸道環(huán)境，實(shí)現(xiàn)微丸結(jié)腸定位的目的，在體外釋放度試驗(yàn)中，依次測試了3批包衣微丸（批號(hào)分別為20110301，20110302，20110303）在0.1mol/L鹽酸溶液以及pH=6.8，pH=7.0，pH=7.2，pH=7.4，pH=7.6的緩沖溶液中的崩解釋放情況。結(jié)果所得微丸在pH=7.6的緩沖液中45 min累積釋放度大于90％；在其他溶液環(huán)境中，微丸經(jīng)一定時(shí)間的攪拌后均保持圓整，且累積釋放度小于10％。

口服結(jié)腸定位給藥系統(tǒng)是指用適當(dāng)?shù)姆椒ǎ顾幬锟诜蟊苊庠谖浮⑹改c、空腸和回腸前端釋放藥物，運(yùn)送到回盲腸部后釋放藥物，發(fā)揮局部和全身治療作用的一種給藥系統(tǒng)。普通口服制劑藥物在胃和小腸釋放、吸收，但對(duì)結(jié)腸局部疾病由于在到達(dá)結(jié)腸時(shí)藥物已經(jīng)被吸收或降解，不能在病灶部位達(dá)到治療所需血藥濃度。采用結(jié)腸定位給藥技術(shù)將激素、抗感染等藥物直接運(yùn)送到回盲腸部位，可大大提高結(jié)腸炎、結(jié)腸癌、結(jié)腸性腸蟲病等結(jié)腸疾病的治療效果。

[1]李 波，朱維良，陳凱先.小檗堿及其衍生物的研究進(jìn)展[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2008，43（8）：773－787.

[2]劉 欣，薛紅梅，王建明，等.鹽酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片的制備工藝和體外釋放研究[J].世界科技研究與發(fā)展，2008，30（3）：347－351.

[3]孫紅武，歐陽五慶.鹽酸小檗堿納米乳的制備及其理化性質(zhì)研究[J].中草藥，2007，38（10）：1 476－1 480.

[4]蘇春梅，楊 紅，梁翠茵，等.鹽酸小檗堿脂質(zhì)體制備工藝研究[J].中國藥業(yè)，2009，18（21）：41－42.

[5]陸 彬.藥物新劑型與新技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1998：281－282.