2006年至2010年麗水地區腸球菌耐藥性分析

余王景璐，朱延焱，江麗莉，劉素霞

(浙江省麗水市中心醫院檢驗科，浙江 麗水 323000)

腸球菌(enterococcus)為圓形或橢圓形、呈鏈狀排列的革蘭陽性球菌，是臨床感染常見菌株，常引起呼吸道、泌尿生殖道、腹腔等部位的感染[1]。近年來，隨著臨床上廣譜抗生素、免疫抑制劑的廣泛應用，以及各種侵入性治療機會的增加，腸球菌耐藥率逐漸升高，已成為在需氧革蘭陽性球菌中僅次于葡萄球菌的重要院內感染致病菌[2]。尤其是耐萬古霉素腸球菌菌株的增多，給臨床治療帶來極大困難。為了解醫院常見腸球菌分布特征及耐藥特點，筆者對2006年1月至2010年12月從住院及門診送檢標本中分離到的腸球菌株973株進行菌種鑒定及藥物敏感性試驗，現報道如下。

1 材料與方法

1．1 儀器、試劑和菌株來源

采用VITEK－COMPACT2全自動微生物分析儀。標準抗菌藥物紙片氨芐西林(10 μg)、奎奴普丁達福普丁(15 μg)、利奈唑胺(30 μg)、鏈霉素(300 μg)、青霉素 G(10 U)、慶大霉素(120 μg)、四環素(30 μg)、萬古霉素(30 μg)、左氧氟沙星(5 μg)均為英國Oxoid公司產品。M－H瓊脂粉為英國Oxoid公司產品。菌株來自2006年1月至2010年12月麗水市中心醫院門診及住院各類臨床標本分離到的腸球菌973株(同一患者無重復株)。

1．2 藥敏培養基的制備

將M－H瓊脂粉19 g用500 mL蒸餾水溶解后，115℃高壓蒸汽滅菌15 min。瓊脂冷卻至約55℃后，在半封閉式工作臺上定量傾倒至直徑為90 mm的平皿，4℃保存。

1．3 細菌鑒定及藥物敏感性試驗

K－B法細菌的接種量根據VITEK比濁儀調整至0．5麥氏濁度，使細菌的濃度達108cfu/mL后，將無菌棉簽蘸濕，擠出多余水分后向3個方向均勻涂布于M－H瓊脂平皿上，貼上抗菌藥物紙片，置35℃的孵箱孵育18～20 h，根據美國臨床實驗室標準化委員會2007年指南M100－S17判讀結果。糞腸球菌的質控菌株為ATCC29212。

2 結果

各臨床科室菌株分離率最高為泌尿科(35．3%)，其次為監護室(19．4%)和呼吸科(12．2%)。具體統計結果見表 1至表4。

3 討論

腸球菌屬是人類和哺乳動物腸道的正常菌群，雖為低毒的革蘭陽性球菌，但多數學者認為它是造成嚴重感染的重要病原菌[3]。醫院從2006年至2010年送檢標本中共分離出腸球菌973株，以注:“－”表示無，下表同。糞腸球菌和屎腸球菌為主。各類感染性標本分離的腸球菌中以尿液標本最多，其次為痰液標本。由于生殖道和泌尿道與腸道的生理位置比較接近，因此腸球菌的感染可能以易位感染為主。另外，腸球菌的感染分布范圍已擴大，其原本不是引起呼吸道感染的主要致病菌，但此次有38．95%的標本來源于呼吸道痰液標本，說明腸球菌已逐漸成為了呼吸道感染的主要致病菌，使臨床治療難度加大，必須引起重視[4]。

表1 各年度臨床標本分離菌株統計[株(%)]

表2 973株腸球菌在臨床標本中的分布

表3 2006年至2010年醫院糞腸球菌的耐藥率(%)

表4 2006年至2010年醫院屎腸球菌的耐藥率(%)

腸球菌的感染以糞腸球菌所占比例最高，其次為屎腸球菌。通過對這兩種腸球菌耐藥現狀的分析，基本上可以反映腸球菌的整體耐藥情況[5]。腸球菌屬細胞壁堅厚，對許多抗菌藥物表現為固有耐藥，如對頭孢菌素天然耐藥。本次研究顯示，腸球菌屬對青霉素的耐藥率最高，2006年至2010年均達85%以上。目前，腸球菌引起的醫院感染最嚴重的為耐萬古霉素腸球菌。由于臨床醫師經常采用協同用藥來加強治療效果，如青霉素或萬古霉素與氨基苷類藥物進行聯合治療。高濃度氨基苷類藥物與青霉素或萬古霉素有協同作用，聯合用藥可加強對腸球菌屬的抗菌活性。同時要看腸球菌屬對高濃度慶大霉素是否敏感，若敏感則說明可發生協同作用[6]。因此實驗室對腸球菌屬應同時用高濃度慶大霉素和高濃度鏈霉素檢測耐氨基苷類腸球菌。我院藥物敏感性試驗結果顯示，糞腸球菌和屎腸球菌對高濃度慶大霉素的耐藥率較高，因此臨床上應根據藥物敏感性試驗結果選擇敏感的抗菌藥物進行治療，這對于控制耐氨基苷類腸球菌的產生非常重要。從2006年至2010年，檢出4株耐萬古霉素的屎腸球菌、3株耐萬古霉素的糞腸球菌。目前認為對萬古霉素耐藥的腸球菌是由質粒介導，并且傳導到其他細菌，引起耐藥性增多[7]。屎腸球菌的耐藥性普遍高于糞腸球菌[8]，對高濃度的慶大霉素也是一樣。

總之，近來不斷出現耐萬古霉素的腸球菌，給臨床用藥帶來了極大的困難。應加強對萬古霉素的用藥監測，避免造成耐藥菌株的廣泛傳播;加強院內感染控制，減少耐藥菌株引起的醫院環境污染;合理使用抗生素，嚴格使用原則，避免濫用，減少多重耐藥菌的產生。

[1]羅燕萍，白立彥，李俊玲，等．211株腸球菌屬細菌對18種抗生素的耐藥性特征[J]．中華醫院感染學雜志，2004，14(1):80－82．

[2]童照威，李曉峰，宋 群，等．常見革蘭陽性球菌分布特征及藥敏分析[J]．中國衛生檢驗雜志，2011，21(2):401 －403．

[3]劉淑梅，許淑珍，高向遠，等．1 000株腸球菌耐藥性分析[J]．中國抗生素雜志，2003，28(11):673 －675．

[4]郭衛真，劉 妮，盧東榮，等．457株腸球菌的分布及其耐藥性分析[J]．當代醫學雜志，2011，17(3):42 －43．

[5]楊其軍．腸球菌屬細菌對抗菌藥物的耐藥性分析[J]．中國藥業，2010，19(17):9 －10．

[6]姜梅杰，孫啟英，劉廣麗，等．2007－2009年屎腸球菌及糞腸球菌的耐藥性分析[J]．中華醫院感染學雜志，2011，21(9):1 889－1 891．

[7]郭玲嬌，狄云香，李秀麗．耐萬古霉素屎腸球菌耐藥基因的研究[J]．中華醫院感染學雜志，2011，21(9):1 747－1 748．

[8]ELsner HA，Sobottka I，Feucht HH，et al．In vitro susceptibilities of enterococcal blood culture isolates from the Hamburgarea to ten antibiotics[J]．Chemotherapy，2000，46(2):104．