坎地沙坦酯片的處方工藝研究

包汝潑，左 鋒，陳 誠

(浙江省寧波市天衡制藥有限公司，浙江 寧波 315201)

坎地沙坦酯是一種新型血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)受體拮抗劑，可以選擇性地阻斷AngⅡ在人體組織中的作用，具有良好的降壓效果，并對心衰也有明顯治療作用，目前在抗高血壓市場上應用較廣[1-2]。本試驗采用原研廠家產品為參比制劑，通過篩選不同處方，考察不同制備工藝參數對雜質及溶出特性的影響，以獲得質量穩定的產品。

1 儀器和試藥

Agilent 1200型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);GL-5C型全自動干法制粒機(浙江明天機械有限公司);ZPS008型旋轉壓片機(上海天祥健臺制藥機械有限公司);GKZ快速整粒機(寧波市華拳機械有限公司);YPD-200C型片劑硬度儀(上海黃海藥檢儀器有限公司);RCZ-8M溶出試驗儀(天津天大天發科技有限公司)和激光粒度儀(英國Malvern公司)。坎地沙坦酯及有關物質A，B，E(寧波市天衡制藥有限公司);參比制劑必洛斯(天津武田藥品有限公司，批號為020B);乳糖(荷蘭DMV國際有限公司);玉米淀粉(法國羅蓋特公司);硬脂酸鎂(安徽山河輔料有限公司);羧甲基纖維素鈣(日本五德藥業);聚乙二醇(PEG6000，三洋化成工業株式會社);檸檬酸三乙酯(蚌埠豐原醫藥科技發展有限公司);甘油(浙江萬聯藥業有限公司);微晶纖維素PH-101(日本旭化成株式會社);乙腈等試劑為色譜純。

2 方法與結果

2．1 含量及有關物質測定方法[3]

色譜條件:色譜柱為diamonsil ODS柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);以乙腈-水-乙酸(57∶43∶1)為流動相A，以乙腈-水-乙酸(90∶10∶1)為流動相B，流動相梯度洗脫程序見表1;檢測波長254 nm;流速1.0 mL/min;柱溫30℃;進樣量10 μL;理論板數按主峰計不低于2 000，主峰與相鄰雜質峰的分離度大于1.5。上述色譜條件下，各輔料對主峰檢測無干擾，主峰峰形良好，保留時間約為19.8 min。主藥質量濃度在5.0～200.0 μg/mL范圍內與峰面積線性關系良好，日間和日內RSD均小于0.5%，回收率為98.3%～100.2%。

表1 梯度洗脫條件

樣品溶液制備與測定:精密稱取坎地沙坦酯和雜質對照品各25 mg，置于50 mL容量瓶中，加入乙腈適量試溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置100 mL容量瓶中，加入乙腈-水(3∶2)稀釋至刻度作為對照品溶液。另精密稱取坎地沙坦酯片細粉適量(約相當于坎地沙坦西酯10.0 mg)，置于100 mL容量瓶中，加入乙腈-水(3∶2)適量，超聲處理 10 min，并稀釋至刻度，搖勻，12 000 r/min轉速離心10 min，取上清液作為供試品溶液，精密量取對照品溶液和供試品溶液10 μL，分別注入液相色譜儀。

2．2 溶出曲線測定及相似因子f2計算[4]

參考美國食品和藥物管理局溶出數據庫，用槳法進行溶出曲線測定，具體試驗條件，溶出介質為0.35%吐溫20的0.05 mol/L磷酸鹽緩沖液(pH=6.8)，體積為900 mL，溫度為(37±0.5)℃，轉速為 50 r/min。分別在 5，10，15，20，30，45 min 時取樣，樣品溶液經過0.45 μm微孔濾膜過濾，移取一定體積，采用高效液相色譜法測定藥物的濃度，計算出藥物的溶出度。采用美國食品和藥物管理局推薦的相似因子f2比較自研制劑和參比制劑溶出曲線的匹配程度。相似因子f2計算公式，f2=50×log｛[1+1/n×Σ(Rt-Tt)2]-1/2×100｝。其中Rt和Tt分別表示自研制劑與參比制劑在第n個取樣點時的平均累積溶出度，f2大于50，可認為是溶出匹配，f2越大，匹配程度越好。

2．3 處方篩選

根據預試驗發現坎地沙坦酯本身不穩定，在壓片和貯藏過程中會分解，造成雜質易升高，添加一些低熔點的油性物質有助于其穩定，本試驗選擇3種油性物質組成不同處方，具體處方見表2。按表2稱取相應的原輔料，將油性物質先與坎地沙坦酯及部分乳糖混勻，過45目篩，再與除羧甲基纖維素鈣和硬脂酸鎂的其他輔料混勻，用干法制粒機制粒，過30目篩整粒，外加羧甲基纖維素鈣和硬脂酸鎂混合，壓片，將片劑分別用鋁袋包裝后放置在高溫高濕條件[60℃，RH(90 ±5)%]下，于 0，5，10 d 取樣，按 2.1 項下檢測含量及有關物質，統計含量及總雜的變化，結果見表3。從表3可見，相對不加油性物質的處方4，PEG6000、檸檬酸三乙酯和甘油的加入可提高坎地沙坦酯的穩定性，其中含PEG6000的處方在高溫、高濕條件下有關物質增幅最低，含量沒有明顯下降，與原研參比制劑穩定性相似。因此，以下處方采用含PEG6000的處方。

表2 處方組成

表3 影響因素條件下含量及雜質變化(%)

2．4 處方工藝優化

在預試驗時，發現羧甲基纖維素鈣單片用量、原料粒徑和片劑硬度對溶出影響比較大，原料粒徑系采用Malvern scirocco 2000型激光子粒度儀檢測所得。采用L9(34)正交設計法進行試驗，考察因素及水平設置見表4，片劑處方以2.3項下的處方1為基礎，因羧甲基纖維素鈣用量調整導致片重不足時以乳糖填充，采用2.3項下工藝，制成片劑后按2.2項下測定溶出曲線并計算f2值。結果見表5和表6。從表6可知，因素A與因素B對片劑的溶出特性有顯著的影響，主要原因是坎地沙坦酯在水及緩沖液中溶解度比較低，原料粒徑及崩解劑用量的變化對藥物崩解溶出影響比較敏感，考慮到原料粒徑是一范圍，根據補充試驗發現原料粒徑在1 μm≤D(V，0.9)≤15 μm之間對溶出曲線相似因子f2影響不明顯。綜合表5、表6得出最終確定最佳處方工藝參數，即原料粒徑在1 μm≤D(V，0.9)≤15 μm之間，羧甲基纖維素鈣單片用量為6 mg，片劑硬度為50 N。

2．5 驗證試驗

按2.4項下篩選出的最佳處方工藝制備3批坎地沙坦酯片(批號分別為111201，111202，111203)，測定3批樣品的溶出曲線，結果見表7，根據f2計算原則取小于30 min的5個點的累積溶出度計算f2值，與參比制劑比較，3批自研片的f2值分別為64，62，78，根據相似性判定，自研片和參比制劑的溶出行為一致。

表4 因素水平表

表5 正交試驗方案及結果

表6 方差分析結果

表7 自研片和參比制劑的累積溶出率(%，n=6)

3 討論

目前，口服固體制劑研發要求仿制藥與參比制劑在多種介質中溶出行為一致，本試驗篩選出的處方工藝在標準介質pH=6.8磷酸鹽緩沖液溶出曲線匹配好，但仍需進一步研究在pH=4.5醋酸緩沖液和pH=1.0鹽酸中的匹配性。

本試驗利用影響因素試驗篩選合適的輔料時，沒有按照《化學藥物穩定性研究技術指導原則》中對溫度、濕度、光線等的要求來做，而是選擇比較劇烈的高溫、高濕條件，主要考慮初步篩選處方時這樣既能節省一定的資源，又能放大原輔料之間的相互影響，在基本確定處方工藝后，再細致地按照相關規定進行研究。

[1]楊 綱.坎地沙坦的臨床研究[J].國外醫藥，2000，20(1):39-41.

[2]Easthope SE，Jarvis B.Candesartan cilexetil:an update of its use in essential hypertension[J].Drugs，2002，62(8):1 253-1 287.

[3]EDQM.European Pharmacopeia 7.3[M].Liguge:Aubin，2012:3 906-3 908.

[4]夏錦輝，劉昌孝.固體藥物制劑的體外溶出度的統計學評價分析[J].中國藥學雜志，2000，35(2):130-131.