何首烏藥材中蒽醌類成分的提取工藝研究

董金香，賈艾玲，董雪蓮，邱智東

(長春中醫藥大學，吉林 長春 130117 )

何首烏為臨床常用中藥,其入藥部位為干燥塊根，具有潤腸、解毒和截瘧之功,制首烏則有補肝腎、益經血、壯筋骨、烏須發之效。現代藥理研究證明,何首烏具有抗衰老、降血脂等多種藥理活性，主要活性成分為蒽醌及二苯乙烯甙。傳統工藝，何首烏中蒽醌類成分一般采用乙醇回流或煎煮法提取，但蒽醌類成分轉移率較低，本實驗對何首烏中蒽醌類成分的提取方法和提取工藝條件進行了優選。

1 儀器與試藥

HA221-50-06型超臨界萃取裝置；TU-1810紫外可見分光光度計；大黃素對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號:110756-200110，供含量測定用)。所用試劑均為色譜純和分析純。

2 方法與結果

2.1 總蒽醌的含量測定方法 按藥典要求及相關文獻[1-3]報道，以大黃素為對照品，采用紫外-可見分光光度法。

2.2 CO2-超臨界流體萃取法提取工藝條件的優選

2.2.1 萃取溫度、壓力、時間的確定 采用正交試驗法,因素水平確定為萃取溫度(40、50、60 ℃)，萃取壓力(20、30、40 mpa)，萃取時間(1、2、3 h)，稱取破碎后的何首烏藥材各100 g，置于1L萃取釜內,按L9(34)表進行試驗，提取物用乙醇作為吸收劑，定容于50 mL量瓶中，以大黃素為檢測指標,測量提取物中總蒽醌的含量，優選最佳提取條件。正交試驗表及試驗結果見表1，方差分析見表2。

表1 正交試驗表及實驗結果

表2 正交實驗方差分析表

根據上述結果，A因素對萃取影響最大，C因素影響最小，綜合分析確定最佳萃取條件為：溫度40 ℃，壓力20 mPa，時間1 h。

2.2.2 夾帶劑的選擇 何首烏中蒽醌類成分極性較大，在提取時應加入夾帶劑，目前常用乙醇，我們分別考察了不同濃度乙醇及不同加入量對蒽醌提取量的影響。取粉碎后的何首烏藥材各100 g，按上述優選出的最佳萃取條件，分別加入夾帶劑進行實驗。結果見表3。

表3 夾帶劑對總蒽醌提取量的影響

結果表明，加夾帶劑(乙醇)總蒽醌提取量明顯高于未加夾帶劑提取量，加入75%乙醇180 mL提取量最多。

2.3 何首烏藥材中總蒽醌提取方法的優選 水煎煮法：取何首烏100 g，加8倍于藥材量的水，煎煮3次，每次1 h，濾液濃縮、干燥，測定干膏中總蒽醌含量為126.91 mg。 乙醇加熱回流法：取何首烏100 g，加8倍于藥材量的95%乙醇，提取3次，每次1 h，回收乙醇，濃縮、干燥，測定干膏中總蒽醌含量為141.95 mg。 CO2-超臨界流體萃取法：取何首烏100 g,按上述優選的最佳工藝條件進行超臨界提取，測定提取物中總蒽醌含量為190.53 mg。結果表明，采用CO2-超臨界流體萃取得到的總蒽醌含量明顯高于煎煮法和回流法。

3 討論

CO2-超臨界流體萃取法是利用CO2處于超臨界狀態下具有的高密度、低黏度和擴散系數大的性質提取有效成分，具有提取溫度低，有效成分提取率高，操作周期短等優點。應用該技術從藥材中提取有效成分具有良好的應用前景。 本研究結果表明，何首烏藥材中蒽醌類成分采用CO2-超臨界流體萃取最佳工藝條件為:溫度40 ℃，壓力20 mPa，時間1 h，以75%乙醇為夾帶劑，加入量為藥材量的1.8倍。采用該方法提取，有效成分的提取率明顯高于傳統的煎煮法和回流法。

[1]中華人民共和國藥典委員會.中國藥典[S].北京:化學工業出版社,2010:附錄30.

[2]曹東東,徐雅娟.CO2-超臨界流體萃取漆大姑活性成分最佳工藝研究[J].長春中醫藥大學學報,2008,24(1):31-32.

[3]劉臘娥,陳鋮.紫外分光光度法測定肛疾舒洗劑中大黃總蒽醌含量[J].中國藥業,2005,14(3):39-40.