HPLC法測定柏子養(yǎng)心膠囊中阿魏酸的含量

木書林，來國防，王云先

(1.麗江市食品藥品檢驗所，云南 麗江 674100;2.云南省食品藥品檢驗所，云南 昆明 650011)

柏子養(yǎng)心膠囊由柏子仁、黨參、黃芪(蜜炙)、川芎、當歸、茯苓、遠志(制)、酸棗仁、肉桂、五味子(蒸)、半夏曲、甘草(蜜炙)、朱砂 等13味中藥經(jīng)現(xiàn)代工藝制備而成，具有補氣、養(yǎng)血，安神的功效。用于心氣虛寒，心悸易驚，失眠多夢，健忘。其標準收載于國家食品藥品監(jiān)督管理局標準(試行)YBZ05612005，原標準是HPLC法測定五味子醇甲，而同系列品種柏子養(yǎng)心片(現(xiàn)收載《中國藥典》一部)是HPLC法測定阿魏酸，為保持系列品種標準的一致性，參照《中國藥典》一部及相關(guān)文獻建立了阿魏酸的測定方法［1～4］，經(jīng)試驗驗證，本方法操作可行，重現(xiàn)性好，能有效控制本產(chǎn)品的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

Agilent 1100高效液相色譜儀(美國 Agilent公司);AL204型電子天平(Mettler Toledo)。阿魏酸(批號:110772－9910)對照品由中國藥品生物制品檢定所提供，甲醇為色譜純，水為二次蒸餾水，其余為分析純。柏子養(yǎng)心膠囊由吉林省某藥品生產(chǎn)企業(yè)提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱 Watres Sunfire C18(4.6mm×150mm，5μm);流動相:甲醇 －0.8% 冰醋酸溶液(22∶78);檢測波長:320 nm;體積流量:1.0mL·min－1;進樣量:10μL。

2.2 供試品溶液的制備 取本品10粒，除去囊殼，精密稱定，研細，取細粉1 g，精密稱定，精密加入甲醇－甲酸(95∶5)溶液25mL，稱定重量，超聲處理(功率100 W，頻率40 kHz)30min，靜置30min，稱定重量，用甲醇－甲酸(95∶5)溶液補足減失重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。同法制備缺當歸和川芎的陰性樣品溶液。

2.3 對照品溶液的制備 取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解制成每1mL含0.01mg的溶液，即得。

2.4 線性關(guān)系考察 精密稱取阿魏酸對照品11.00mg置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1mL置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度搖勻，作為對照品溶液，精密量取 1、2、5、10、15、20μL 注入液相色譜儀，進行測定，以峰面積的積分值為縱坐標，質(zhì)量濃度為橫坐標，繪制標準曲線，并以最小二乘法計算得回歸方程:Y=58.892 X+13.78，表明阿魏酸在 0.011 ～0.022mg·mL－1間(r=0.9996)呈良好線性關(guān)系。

圖1 對照品色譜

圖2 陰性色譜

圖3 樣品色譜

2.5 重復性試驗 分別取6份相同濃度的柏子養(yǎng)心膠囊供試品溶液和阿魏酸對照品溶液，進樣，測定供試品溶液中阿魏酸峰面積及對照品溶液中阿魏酸峰面積，結(jié)果供試品中阿魏酸的峰面積RSD為2.10%，對照品中阿魏酸的峰面積RSD 為1.82%。

2.6 穩(wěn)定性試驗 取柏子養(yǎng)心膠囊供試品溶液于室溫下放置，分別于 0、2、4、6、8、10 h 精密吸取 10μL 進樣，測定阿魏酸峰面積，結(jié)果RSD為1.40%，顯示供試品溶液在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 回收率試驗 取同一批號(批號:20110103)的樣品9份，每份0.5 g，精密稱定，分別按其質(zhì)量分數(shù)的80%、100%、120%精密加入阿魏酸對照品適量，按“2.2”項下的方法制備供試品溶液，進行測定，計算加樣回收率，見表1。

表1 柏子養(yǎng)心膠囊加樣回收率試驗

2.8 樣品測定 取本品3批，按“2.2”項下的方法制備供試品溶液，進行測定，以外標法計算樣品中阿魏酸的含量，結(jié)果見表2。

表2 柏子養(yǎng)心膠囊樣品測定結(jié)果

3 討論

在供試品溶液制備過程中，作者曾采用回流法代替超聲提取法，結(jié)果回流2 h與超聲30min的樣品有效成分含量沒有顯著性差異。考慮目前超聲儀已普及，且省時，操作簡便，因此選擇超聲提取法;對不同的超聲提取時間(20min、30min、40min)考察發(fā)現(xiàn)，超聲30min樣品有效成分已提取較完全，因此選擇30min作為提取時間。

［1］李春花，嚴玉平，宋曉宇，等.反相高效液相色譜法測定鼻淵樞滴鼻劑中阿魏酸的含量［J］.時珍國醫(yī)國藥，2007，18(2):278 －279.

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［3］劉豐豐，青磊，王海寧，等.用高效液相色譜法測定阿歸養(yǎng)血顆粒中阿魏酸的含量［J］.貴陽醫(yī)學院學報，2004，29(3):232－233.

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