復(fù)方益母膠囊的提取工藝研究

林凡友，王世禮

(山東翔宇健康制藥有限公司，山東 臨沂 276023)

復(fù)方益母膠囊是我公司獨(dú)家產(chǎn)品，現(xiàn)已批準(zhǔn)為國(guó)家中藥保護(hù)品種。該品種由益母草、當(dāng)歸、川芎、木香四味藥材組方而成，目前有關(guān)上述四味藥材的文獻(xiàn)資料很多，其提取工藝也是多種多樣。益母草為復(fù)方益母膠囊的君藥，其主要的有效成分為益母草堿、水蘇堿等生物堿類，其流浸膏均采用水提醇沉法，益母沖劑采用水提法，益母草制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究多采用鹽酸水蘇堿做質(zhì)控指標(biāo)，在八十年代多采用測(cè)定總生物堿含量。當(dāng)歸化學(xué)成分為揮發(fā)油、有機(jī)酸、糖類及氨基酸等，提取方法有蒸餾法、醇提法及水提法;川芎主含生物堿、阿魏酸等有機(jī)酸及揮發(fā)油等成分，多采用醇提工藝;木香化學(xué)成分為揮發(fā)性成分，多采用醇提法、水煎法。為探索復(fù)方益母膠囊各藥材有效成分的分離提取，保證產(chǎn)品質(zhì)量，我們對(duì)復(fù)方益母膠囊的提取工藝進(jìn)行了研究，確定了最佳提取工藝，研究結(jié)果表明，該提取方法操作簡(jiǎn)單，實(shí)用性強(qiáng)，能充分保證該產(chǎn)品有效成分的提取，進(jìn)一步提升了該產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 CS－9301型薄層掃描儀(日本島津公司)，定量毛細(xì)管(日本島津公司)，939全自動(dòng)薄層制板器。

1.2 試藥 試驗(yàn)用藥材益母草、當(dāng)歸、川芎、木香均購(gòu)于當(dāng)?shù)刂兴幉墓?yīng)站，經(jīng)鑒定均為藥典正品，試驗(yàn)用中性氧化鋁購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。硅膠G，甲醇、丙酮、無(wú)水乙醇、鹽酸、三氯化鐵等所用試劑均為分析純。鹽酸水蘇堿(批號(hào)為110712－200306)由中檢所提供，供含量測(cè)定用。

2 方法與結(jié)果

2.1 益母草提取工藝的研究

2.1.1 樣品溶液的制備 水提取工藝:取益母草250g，加水煎煮二次，第1次3 h，第2次2 h，均加8倍量水，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.12～1.14(60℃)，冷藏24 h，濾過(guò)，濾液濃縮至每mL含2.5 g原藥材的濃縮液，備用。

水提醇沉工藝:取益母草250g，同水提取的工藝方法制成水提取濃縮液加入乙醇，使含醇量達(dá)60%，冷藏24 h，濾過(guò)，濾液回收乙醇，并濃縮至每mL含2.5 g原藥材的濃縮液，備用。

樣品液的制備:上述水提取工藝及水提醇沉工藝制備的濃縮液，分別取1mL，蒸干，殘?jiān)眉状?mL使溶解，并分次轉(zhuǎn)移至已處理好的氧化鋁柱(內(nèi)徑約0.9 cm，中性氧化鋁2g，濕法裝柱，用乙醇10mL預(yù)洗)上，用70%的乙醇50mL洗脫，收集洗脫液，揮干乙醇，殘?jiān)蛹状际谷芙獠⒍ㄈ萦?mL量瓶中，搖勻，備用。

對(duì)照品溶液的制備:取鹽酸水蘇堿對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，備用。

含量測(cè)定方法:照薄層色譜法［1］(《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液5～12μL、對(duì)照品溶液2μL與6μL，分別交叉點(diǎn)于同一以0.2%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以丙酮－無(wú)水乙醇－鹽酸(10∶10∶1)為展開(kāi)劑，預(yù)飽和1 h后展開(kāi)，展距10 cm，取出，晾干，100℃烘約10min，取出，放冷，噴以新鮮配制的稀碘化鉍鉀與1%三氯化鐵無(wú)水乙醇溶液(2∶1)的混合溶液，冷風(fēng)吹干，至斑點(diǎn)清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B薄層掃描法)進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)λs=517 nm，λr=700 nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品積分值，計(jì)算，即得。

2.1.2 不同工藝樣品液的含量測(cè)定 見(jiàn)表1。

表1 水提法及水提醇沉法水蘇堿含量比較(mg·mL－1)

由此可表明，水提法及水提醇沉法兩種工藝水蘇堿含量無(wú)明顯的差異。經(jīng)藥材測(cè)定，水蘇堿提取率均在50%以上。但水提法樣品液粘稠，測(cè)定誤差較大;且出膏率較高，含無(wú)效物質(zhì)多，故應(yīng)采用水提醇沉法。

2.2 不同醇沉濃度對(duì)水蘇堿含量的影響

2.2.1 樣品溶液的制備 取益母草750g，按水提醇沉法工藝進(jìn)行提取，將水提取的濃縮液分為3份，分別以50%、60%、70%乙醇進(jìn)行醇沉，冷藏24 h，按水提醇沉法工藝回收乙醇制成每mL含2.5 g原藥材的濃縮液，備用。將不同醇濃度的藥液，按含量測(cè)定方法制備供試品溶液。

2.2.2 不同工藝樣品的含量測(cè)定 按上述含量測(cè)定方法測(cè)定樣品液中水蘇堿的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 不同醇濃度對(duì)水蘇堿含量的影響(mg·mL－1)

測(cè)定的結(jié)果表明，不同醇沉濃度對(duì)水蘇堿含量無(wú)明顯的影響。考慮抽濾順利及成品的澄明度等因素，確定采用60%醇沉濃度。

2.3 當(dāng)歸、川芎、木香提取工藝的確定 當(dāng)歸、川芎、木香三味藥，考慮其有效成分和作用部位多為揮發(fā)油、內(nèi)酯、生物堿等醇溶性的成分，且當(dāng)歸還含有大量的糖類，約占40%，提取液含粘稠物質(zhì)，過(guò)濾困難，烘干，過(guò)篩，裝膠囊均受影響，成品吸潮性較大，為此考察了不同醇濃度的提取工藝對(duì)出膏率及干膏粉吸潮性的影響。

2.3.1 不同醇濃度樣品的制備 按處方量取當(dāng)歸136 g、川芎68 g、木香25 g，共取3份，分別以50%、60%、70%乙醇(均加入8倍量的乙醇)回流提取3 h，濾過(guò)，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏，烘干，備用。

2.3.2 不同醇濃度樣品質(zhì)量比較 取上述3種醇濃度提取的干膏粉稱重，計(jì)算烘干所需的時(shí)間，并將1 g干膏粉室溫(濕度50%)放置1 d，測(cè)定水分，觀察干膏粉吸潮性，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 不同工藝出膏率、烘干時(shí)間及吸潮性

結(jié)果表明，不同醇濃度提取對(duì)干膏粉出膏率(去除水分)稍有影響，但50%及60%醇濃度提取的稠膏由于提取糖類較多，烘干時(shí)間長(zhǎng)，干膏粉吸潮性較大，給下一步膠囊工藝帶來(lái)了很大的困難，因此，考慮節(jié)省工時(shí)以及操作方便，成品的穩(wěn)定性好等諸因素，確定了采用70%乙醇提取。

3 結(jié)論

通過(guò)以上的試驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方益母膠囊中的益母草采用水提醇沉法及60%濃度的乙醇進(jìn)行提取，當(dāng)歸等三味藥材采用70%濃度的乙醇進(jìn)行提取，可以有效控制復(fù)方益母膠囊中有效成分的分離提取，保證該制劑產(chǎn)品質(zhì)量。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版(一部)［S］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:172.