注射用脂溶性維生素（I）細菌內毒素檢查法研究

2012-05-12 06:33:46潘衛松周永標張訥敏

亞太傳統醫藥 2012年6期

潘衛松，肖瑛，周永標，張訥敏

（1.廣州市藥品檢驗所，廣東廣州 510610；2.暨南大學藥學院，廣東廣州 510632；3.暨南大學中藥藥效物質基礎及創新藥物研究廣東省高校重點實驗室，廣東廣州 510632）

注射用脂溶性維生素（I）是由維生素A棕櫚酸酯、維生素D2、E、K1等多種維生素成分制成的無菌凍干粉針，臨床上用于各種內、外科手術、嚴重傳染性疾病、昏迷等癥的腸外維生素補充劑，是各種外科手術后必用的藥物。我所承擔了其國家評價性抽檢的任務。其現行標準共有3個，分別為國家食品藥品監督管理局標準（試行）YBH09722008，國家食品藥品監督管理局標準（試行）YBH05222009，國家食品藥品監督管理局標準YBH38402005，其中，前兩個標準都是使用細菌內毒素檢查法對熱原進行控制，限度均為10EU／瓶，最后一個標準則采用了家兔熱原檢查法對熱原進行控制。我們按2010年版《中國藥典》（二部）“細菌內毒素檢查法”對實施國家食品藥品監督管理局標準YBH38402005的本品種進行了干擾試驗，以考察對其進行細菌內毒素檢查的可行性，并提出將其限度提高到5EU／瓶。現將結果報道如下。

1 儀器與試藥

SUB14恒溫水浴（英國GRANT公司）；MSI旋渦混合器（廣州IKA公司）。

細菌內毒素工作標準品（規格：每支160EU，批號：150601－201174；）及細菌內毒素檢查用水（BET水，規格：每支50mL，批號：1105060）均購自中國藥品生物制品檢定所；鱟試劑（TAL）A（湛江安度斯生物有限公司，規格：每支0.1mL，批號：1105101，靈敏度：0.25EU·mL－1）；TAL B（廈門市鱟試劑實驗廠有限公司，規格：每支0.1mL，批號：110603，靈敏度：0.25EU·mL－1；TAL C（湛江安度斯生物有限公司，規格：每支0.1mL，批號：1103242，靈敏度：0.06EU·mL－1）；TAL D（廈門市鱟試劑實驗廠有限公司，規格：每支0.1mL，批號：100915，靈敏度：0.06EU·mL－1；注射用脂溶性維生素（I）（規格：復方制劑，批號：110102（II）206，110201（II）57，101201（II）52，10100704，10050694，101202（II）174，110101（II）41，10100787，110201（II）150，10100731，10030389，110401（II）83，110202（II）33，110203（II）89，110201（II）73）。

2 方法與結果

2.1 細菌內毒素限值的確定

根據藥品使用說明書和規格，注射用脂溶性維生素（I）細菌內毒素限值擬定為5EU／瓶。

2.2 鱟試劑靈敏度復核試驗

按照2010年版《中國藥典》（二部）附錄細菌內毒素檢查法規定，進行鱟試劑的標示靈敏度（λ）復核。結果見表1。

表1 鱟試劑靈敏度復核試驗結果

由表1可見，2批鱟試劑經用細菌內毒素工作標準品檢查，λc均在0.5λ～2.0λ之間，結果均符合規定。

2.3 預干擾試驗

注射用脂溶性維生素（I）有效稀釋濃度（MVC）的計算：根據公式MVC＝λ／L，其中L為注射用脂溶性維生素（I）的細菌內毒素限值5EU／瓶，每瓶先加入2mL BET檢查用水，溶解充分后，其限度可認為2.5EU／mL，λ為鱟試劑標示靈敏度，目前市售鱟試劑靈敏度λ通常在0.25～0.03EU／mL，則注射用脂溶性維生素（I）的對應有效稀釋倍數為：

C0.25＝2.5／0.25＝10倍；C0.125＝2.5／0.125＝20倍；C0.06＝2.5／0.06＝40倍；C0.03＝2.5／0.03＝80倍

預干擾試驗：

將上述系列濃度溶液記為NPC。同時在上述NPC液中加入細菌內毒素標準溶液，使每一濃度的試驗液中均含有2λ濃度的細菌內毒素，記此系列溶液為PPC。取兩個不同廠家的鱟試劑，分別與上述PPC和NPC進行反應，每一濃度重復兩管，并設陽性和陰性對照。

由預干擾試驗結果可以初步了解：兩個廠家的鱟試劑對注射用脂溶性維生素（I）的細菌內毒素的試驗結果在進行40倍稀釋后均無干擾。