血清CXC趨化因子配體16水平與冠心病的相關(guān)性研究

陳秀麗 鄧 兵

1.同濟(jì)大學(xué)醫(yī)學(xué)院，上海 200092；2.浙江省寧波市南門街道社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，浙江寧波 315010；3.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院心內(nèi)科，上海 200032

CXC趨化因子配體16（CXC-chemokine ligand 16，CXCL16）是近年在人的動脈硬化損傷部位的巨噬細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種趨化因子，既是一種膜結(jié)合蛋白，又具有清道夫受體作用和炎癥屬性[1]。趨化因子及其受體在動脈粥樣硬化發(fā)生、斑塊形成過程中的重要作用已被大家逐步認(rèn)識到，但目前的研究大部分集中在動物實驗中，冠狀動脈粥樣硬化與CXCL16關(guān)系的臨床研究目前國內(nèi)外報道較少。本研究旨在了解血清CXCL16水平與冠狀動脈粥樣硬化程度的相關(guān)性，利用酶標(biāo)法檢測血清CXCL16水平，比較正常人與不同類型冠心病患者血清CXCL16水平差異。根據(jù)冠脈造影檢查結(jié)果，分析血清CXCL16水平與冠狀動脈粥樣硬化程度的相關(guān)性，討論血清CXCL16對冠狀動脈粥樣硬化預(yù)測作用和作為冠心病危險分層的指標(biāo)的可行性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年4月～2012年3月同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院和上海市龍華醫(yī)院心血管內(nèi)科病房行冠狀動脈造影（CAG）的患者。連續(xù)入選233例。所有研究對象入院后詳細(xì)采集病史，行常規(guī)實驗室和器械檢查，記錄吸煙、糖尿病、高血壓史。根據(jù)病史、體檢和檢查資料，將233例研究對象根據(jù)臨床診斷分為三組，急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）（ACS組）163例，其中不穩(wěn)定性心絞痛（unstable angina pectoris，UAP）56 例，急性心梗（acute myocardial infaction，AMI）107 例；穩(wěn)定性心絞痛（stable angina pectoris，SAP）（SAP 組）36例，經(jīng)冠狀動脈造影排除冠心病且無其他疾病的正常對照組34例。所有研究對象根據(jù)主訴，病史，體檢及心臟超聲等檢查，排除先天性心臟病、合并心肌炎、嚴(yán)重心功能不全、嚴(yán)重肝腎疾病、自身免疫性疾病、血液病、炎癥感染、血栓栓塞性疾病、近期（至少1個月）有手術(shù)、外傷史、嚴(yán)重的全身其他系統(tǒng)疾病的患者。三組研究對象在年齡、高血壓史和糖尿病史方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。ACS組吸煙構(gòu)成比明顯高于SAP組和正常對照組。三組研究對象血脂成分中總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。SAP組高密度脂蛋白膽固醇（HDL）明顯高于ACS組。各組基本資料見表1。

表1 三組一般臨床資料分布情況（x±s）

1.2 方法

雙抗體夾心酶標(biāo)法檢測血清CXCL16水平，并收集患者血脂和超敏C-反應(yīng)蛋白 （high sensitivity C-reactive protein，hCRP）等指標(biāo)。根據(jù)冠狀動脈造影評價冠脈狹窄程度，進(jìn)行Gensini評分，分析冠狀動脈造影患者CXCL16與冠脈病變程度的相關(guān)性。人CXC趨化因子配體16酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（Human CXCL16 ELISA Kit）購自美國 R＆D公司，按試劑盒說明書要求操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用PASW 18.0版統(tǒng)計軟件計算和處理數(shù)據(jù)，先進(jìn)行正態(tài)分布及方差齊性檢驗，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本的t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD法。計數(shù)資料采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 急性冠脈綜合征組與穩(wěn)定性心絞痛組及正常對照組CXCL16和hCRP水平比較

ACS組和SAP組血清CXCL16和hCRP水平顯著高于正常對照組（P＜0.01）；ACS組血清CXCL16水平和hCRP水平顯著高于SAP組（P＜0.01）。見表2、圖1。

表2 急性冠脈綜合征組與慢性穩(wěn)定性心絞痛組及正常對照組CXCL16水平比較（x±s）

圖1 急性冠脈綜合征組與穩(wěn)定性心絞痛組及正常對照組CXCL16水平比較

2.2 血清CXCL16和hCRP水平與冠狀動脈病變支數(shù)的關(guān)系

按冠脈造影結(jié)果將冠脈病變分為單支、二支及三支病變，以此分為三組，利用單因素方差分析進(jìn)行比較。隨病變支數(shù)增加，CXCL16水平增加。組間兩兩比較，單支病變組與三支病變組（P=0）、二支病變組與三支病變組（P=0.002），差異有統(tǒng)計學(xué)意義，單支病變組與二支病變組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （P=0.319）。血清hCRP水平與病變支數(shù)無關(guān) （P=0.153）。 見表 3、圖 2。

表3 血清CXCL16水平與冠狀動脈病變支數(shù)的關(guān)系

圖2 血清CXCL16水平與冠狀動脈病變支數(shù)的關(guān)系

2.3 血清CXCL16水平與Gensini積分的關(guān)系

根據(jù)CAG結(jié)果對冠脈病變程度計算Gensini積分，按照Gensini積分≤30分，31～60分，≥61分，將冠脈照影患者分為三組，隨Gensini積分增加，CXCL16和hCRP水平逐漸升高，差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。CXCL16兩兩比較亦有差異（Gensini積分≤30分組vs Gensini積分31～60分組，P=0；Gensini積分≤30分組vs Gensini積分≥61分組，P=0，Gensini積分 31～60 分組 vs Gensini積分≥61 分組，P=0.018）。hCRP兩兩比較有差異 （Gensini積分≤30分組 vs Gensini積分 31～60 分組，P=0；Gensini積分≤30 分組 vs Gensini積分≥61分組 P=0；Gensini積分 31～60分組 vs Gensini積分≥61分組，P=0.011）。見表 4。

表4 血清CXCL16水平與Gensini積分的關(guān)系

3 討論

過去認(rèn)為ACS是由于冠狀動脈粥樣硬化進(jìn)行性發(fā)展造成管腔嚴(yán)重狹窄所致，但后來研究發(fā)現(xiàn)ACS的發(fā)生與冠狀動脈狹窄程度無關(guān)，而與斑塊穩(wěn)定性和繼發(fā)血栓形成密切相關(guān)[2]。有研究發(fā)現(xiàn)CXCL16能夠刺激冠狀動脈內(nèi)膜的新生血管的形成。新生血管近端有炎癥細(xì)胞的滲出和黏附分子的表達(dá)，新生血管既可能是炎癥細(xì)胞滲入病灶的通路，又可能刺激新生血管的生成，并由此激發(fā)正反饋機(jī)制，促進(jìn)斑塊的發(fā)生、發(fā)展，乃至誘發(fā)斑塊破裂出血，導(dǎo)致ACS的發(fā)生[3]。Lehrke等[4]比較不同類型冠心病和正常人CXCL16水平，結(jié)果顯示CXCL16在急性冠狀動脈綜合征和穩(wěn)定冠心病較正常人增高，在急性冠狀動脈綜合征組增高顯著，提示血漿可溶性CXCL16與冠心病，特別是急性冠狀動脈綜合征相關(guān)，是急性冠狀動脈綜合征有力的獨立預(yù)測因子。國內(nèi)研究報道[5]也支持血漿可溶性CXCL16與冠心病，特別是急性冠狀動脈綜合征相關(guān)。

本研究中，冠心病患者的血清CXCL16水平顯著高于正常對照組；ACS組血清CXCL16水平顯著高于穩(wěn)定性心絞痛組（P＜0.01），提示CXCL16與動脈粥樣硬化有關(guān)，并隨著冠心病病情的加重而進(jìn)一步升高。與國內(nèi)外研究[6-7]結(jié)論相似，進(jìn)一步證明了血清CXCL16水平在一定程度上提示冠脈粥樣斑塊炎癥反應(yīng)和穩(wěn)定性，可以作為ACS有力的獨立預(yù)測因子。按冠脈造影結(jié)果將冠脈病變分為單支、二支及三支病變，以此分為三組，發(fā)現(xiàn)隨病變支數(shù)增加，CXCL16水平增加，單支病變組與三支病變組（P=0）、二支病變組與三支病變組（P=0.002）有差異，單支病變組與二支病變組無差異。血清CXCL16水平與冠狀動脈病變支數(shù)的關(guān)系也反應(yīng)了血清CXCL16水平與冠狀動脈病變程度的關(guān)系，但作為危險分層的指標(biāo)尚需要進(jìn)一步大型臨床試驗和研究。本研究發(fā)現(xiàn)隨 Gensini積分，CXCL16水平逐漸升高，且 CXCL16在Gensini積分≤30分、31～60分、≥61分三組間兩兩比較時亦有差異。Yi等[7]對88例SAP、ACS患者及正常人進(jìn)行冠脈造影檢查發(fā)現(xiàn)，ACS患者血清CXCL-16水平明顯高于SAP組及對照組（P＜0.01），與Gensini評分呈正相關(guān)。ACS患者血清CXCL-16水平與與Gensini評分呈正相關(guān)，說明CXCL-16水平越高，患者冠狀動脈狹窄程度越嚴(yán)重。李定良等[8]對61例冠心病患者CXCL16與冠狀動脈狹窄的另一衡量指標(biāo)GRACE積分的相關(guān)性研究表明：在ACS組中，CX CL16與GRACE危險評分呈正相關(guān)，同樣說明CXCL16與冠脈狹窄程度相關(guān)。因此，檢測ACS患者的CXCL16對ACS患者的危險分層及治療策略的選擇具有一定的臨床指導(dǎo)意義。

hCRP是與AS關(guān)系最密切的炎癥標(biāo)志物之一。Ki等[9]體外實驗研究發(fā)現(xiàn)：將重組人CRP與THP-1單核細(xì)胞共同孵育后，可上調(diào)單核細(xì)胞中CC趨化因子受體2（CCR2）的表達(dá)，促進(jìn)由單核細(xì)胞趨化因子-1（MCP-1）介導(dǎo)的對單核細(xì)胞的趨化作用。王克迪等[5]CXCL16基因多態(tài)性與C反應(yīng)蛋白的相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)，CXCL16基因A181V多態(tài)性與血清hCRP水平獨立相關(guān)。本研究中血清hCRP水平在急性冠脈綜合征組與穩(wěn)定性心絞痛組及正常對照組比較、與Gensini積分的關(guān)系，都與血清CXCL16水平表現(xiàn)出一致性，而血清hCRP水平與病變支數(shù)無關(guān)，由此可能說明雖然CXCL16與hCRP呈有關(guān)，但hCRP不能完全取代CXCL16作為冠狀動脈粥樣硬化特別是ACS的獨立預(yù)測作用。CXCL16是獨立于hCRP及血脂水平的生物標(biāo)志物，較hCRP對冠心病危險分層有更大的價值。CXCL16與hCRP在ACS的發(fā)生、發(fā)展中作用機(jī)制不同，聯(lián)合檢測該二項指標(biāo)可能有助于更好地預(yù)測和診斷ACS。

但也有研究發(fā)現(xiàn)矛盾結(jié)果，CXCL16可以劑量依賴的方式刺激血管細(xì)胞增殖[3]。抑制其增殖可以減少斑塊中膠原骨架結(jié)構(gòu)，使內(nèi)皮下組織在血流中暴露增多，從而降低斑塊穩(wěn)定性，成為“易損斑塊”[10]。由此說明，CXCL16有阻止“易損斑塊”形成的作用。免疫組化研究也發(fā)現(xiàn)，在LDL受體缺陷的小鼠，盡管巨噬細(xì)胞積聚氧化LDL的能力有所減低，但CXCL16基因缺陷并沒有減輕動脈粥樣硬化，反而伴有動脈粥樣硬化的加重，這也說明CXCL16可能具有保護(hù)性作用[11]。

目前多數(shù)研究支持CXCL16可作為ACS的獨立預(yù)測因子，因此檢測ACS患者的CXCL16對ACS患者的危險分層具有一定的臨床指導(dǎo)意義，能否成為冠心病早期診斷和療效監(jiān)測的指標(biāo)有待更多的臨床研究。

[1]Ridker PM.High-sensitivity C-reactive protein and cardiovascular risk：rationale for screening and primary prevention [J].Am J Cardiol，2003，92（4）：17-22.

[2]陳旺軍.急性冠脈綜合征血清sCXCL16、hs-CRP水平變化及辛伐他汀的干預(yù)作用[J].浙江臨床醫(yī)學(xué)，2010，12（10）：1077-1078.

[3]Zhuge X，Murayama T，Arai H，et al.CXCL16 is a novel angiogenic factor for human umbilical vein endothelial cells[J].Biochem Biophys Res Commun，2005，331（4）：1295-1300.

[4]Lehrke M，Millington SC，Lefterova M，et al.CXCL16 is a marker of inflammation，atherosclerosis，and acute coronary syndromes in humans[J].JAm Coll Cardiol，2007，49：442-449.

[5]王克迪，劉志忠，王瑞珉，等.CXCL16基因多態(tài)性與C反應(yīng)蛋白的相關(guān)性研究[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2011，26（1）：1-3.

[6]陳陽.不同冠心病血清soL-CXCL16，soL-ICAM1及hsCRP水平研究[J].實用臨床醫(yī)藥雜志，2011，15（5）：30-32.

[7]Yi GW，Zeng T.Circulating CXCL16 is related to the severity of coronary artery stenosis [J].Archives of Medical Research，2008，39 （5）：531-535.

[8]李定良，巫相宏.急性冠脈綜合征患者趨化因子CXCL1 6與GRACE積分的相關(guān)性及臨床意義[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，17（3）：19-21.

[9]Ki HH，Kyung H，Jae HP，et al.C-Reactive protein promotes monocyte chemoattractant protein-1-mediated chemotaxis through upregulating CC chemokine receptor 2 expression in human monocytes [J].Circulation，2004，109（21）：2566-2571.

[10]Stoneman VE，Bennett MR.Role of apoptosis in atherosclerosis and its therapeutic implications[J].Clin Sci，2004，107（4）：343-354.

[11]Aslanian AM，Charo IF.Targeted disruption of the scavenger receptor and chemokine CXCL16 accelerates atherosclerosis [J].Circulation，2006，114（6）：583-590.