比較兩種抗凝劑對(duì)血小板測(cè)定結(jié)果的影響與分析

姜學(xué)慧 王英芳

血小板在體內(nèi)主要參與止血和血栓形成，同時(shí)在動(dòng)脈粥樣硬化和炎性反應(yīng)中起著重要的作用[1]。EDTA-K2具有對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞形態(tài)影響極小，并可抑制血小板在體外聚集等優(yōu)點(diǎn)[2]。臨床上普遍采用EDTA-K2作為血液分析的最佳抗凝劑。但近年來發(fā)現(xiàn)，EDTA-K2有時(shí)會(huì)引起血小板發(fā)生聚集，從而在血細(xì)胞分析儀檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)血小板假性減少[3]。本文通過7例EDTA-K2抗凝的血小板數(shù)量減少的病例分析，并用枸櫞酸鈉作抗凝劑復(fù)查及用手工法計(jì)數(shù)血小板探討EDTA-K2和枸櫞酸鈉兩種抗凝劑對(duì)血小板測(cè)定結(jié)果的影響與分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年5月-2012年3月來本院就診的門診和住院患者中血小板減少7例，其臨床癥狀均無(wú)皮膚紫癜、牙齦出血等癥狀。

1.2 儀器與試劑 Sysmex-xs-800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀Sysmex-xs-800i全套試劑校準(zhǔn)品等。EDTA-K2與枸櫞酸鈉真空抗凝管日本olympus公司生產(chǎn)雙目顯微鏡，人工計(jì)數(shù)血小板草酸銨稀釋液。

1.3 方法 將2011年5月-2012年3月本院門診和住院的患者采集用EDTA-K2抗凝的靜脈血標(biāo)本用Sysmex-xs-800i進(jìn)行測(cè)定，共發(fā)現(xiàn)7例無(wú)臨床癥狀的血小板減少患者，針對(duì)這7例患者第2天清晨重新抽取2 ml靜脈血分別由EDTAK2和枸櫞酸鈉抗凝用Sysmex-xs-800i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)，同時(shí)制備兩種抗凝血的涂片瑞士染色后鏡檢，觀察血小板的形態(tài)及聚集情況。然后采集患者末梢血10μl加入草酸銨稀釋液中顯微鏡下計(jì)數(shù)血小板數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以（s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

7例EDTA-K2抗凝血液標(biāo)本血小板均減少，檢測(cè)結(jié)果在25×109/L~82×109/L直接涂片染色鏡檢發(fā)現(xiàn)血小板存在聚集現(xiàn)象，而用枸櫞酸鈉抗凝的血小板結(jié)果均正常在112×109/L ~276×109/L直接涂片染色鏡檢發(fā)現(xiàn)血小板散在無(wú)聚集，末梢血手工法檢測(cè)血小板測(cè)定結(jié)果也在正常范圍之內(nèi)116×109/L ~280×109/L，見表1。EDTA-K2抗凝的血小板測(cè)定結(jié)果（44±21）×109/L與枸櫞酸鈉抗凝的血小板結(jié)果（180±63）×109/L比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；末梢血手工法檢測(cè)血小板測(cè)定結(jié)果（185±63）×109/L與枸櫞酸鈉抗凝的血小板測(cè)定結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

表1 3種方法測(cè)定血小板結(jié)果比較

3 討論

EDTA-K2雖然是目前血液分析的最佳抗凝劑，但它引起血小板減少的病例也很多。據(jù)報(bào)道，EDTA依賴性血小板減少癥臨床發(fā)病率為0.09%~0.21%[4]。其發(fā)生機(jī)制是由于EDTA-K2作為抗凝劑的前提下出現(xiàn)的免疫介導(dǎo)血液中的冷抗血小板自身抗體，使血小板互相發(fā)生凝集[5]。血小板相互聚集成團(tuán)形成圍繞在淋巴細(xì)胞周圍的血小板衛(wèi)星現(xiàn)象。血細(xì)胞自動(dòng)分析儀是依據(jù)血小板體積大小及通過微孔時(shí)產(chǎn)生的脈沖數(shù)計(jì)數(shù)的結(jié)果[6]。當(dāng)血小板聚集時(shí)會(huì)使機(jī)器不能將其識(shí)別而導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)的減少。而枸櫞酸鈉很好的消除了血小板的聚集情況，手工法也能準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)血小板數(shù)量，雖然精密度差，但對(duì)于EDTA-K2所致的血小板減少的復(fù)查也是一種有效方便的方法。因此，在臨床工作中對(duì)于EDTA-K2抗凝的血液標(biāo)本檢測(cè)到血小板減低時(shí)，可以改用枸櫞酸鈉抗凝血進(jìn)行復(fù)檢，同時(shí)制備血涂片鏡下觀察血小板分布情況，以免誤診，盡量為臨床醫(yī)生提供準(zhǔn)確有效的診斷信息。

[1]劉春生，柳發(fā)虎.不同抗凝劑對(duì)血小板檢測(cè)結(jié)果的影響[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8（8）:899-900.

[2]姜毅，劉甲辰.EDKA-K2抗凝劑導(dǎo)致血小板假性減少[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2010，16（10）:113.

[3]邢忠海，劉東升.EDTA依賴型血小板減少的分析與對(duì)策[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2011，27（3）:507-508.

[4]Yoneyama A， Nakahara K. EDTA-dependent pseudothrombocytopenia differentiation from true thrombocytopenia [J]. Nippon Rinsho，2003，61（4）:569-574

[5]于波海，范艷玲，沈偉霞，等.乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少癥病例分析[J].中國(guó)自然醫(yī)學(xué)雜志，2007，9（1）：68-69.

[6]林粵.不同抗凝劑對(duì)血小板聚集的處理結(jié)果與分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2010，19（34）:4466-4467.