血清Ⅰ類MHC鏈相關蛋白A、C-反應蛋白、α1-酸性糖蛋白對惡性婦科腫瘤診斷的臨床檢測

楊 春

兗礦集團公司總醫院，山東鄒城 273500

婦科腫瘤主要包括外陰腫瘤、陰道腫瘤、子宮腫瘤、卵巢腫瘤和輸卵管腫瘤。其中子宮及卵巢腫瘤多見，外陰及輸卵管腫瘤少見。隨著分子生物學的進展，當前血清Ⅰ類MHC鏈相關蛋白A、C-反應蛋白、α1-酸性糖蛋白是用于婦科腫瘤診斷的可行方法。Ⅰ類主要組織相容性復合體鏈相關蛋白A(MICA)，具有編碼、表達和轉錄蛋白質功能。MICA蛋白的表達在正常組織較少，但在腸道上皮組織表達量稍高，但在多種腫瘤細胞，尤其是上皮源性的腫瘤均有不同程度的表達，并很可能與婦科腫瘤的發生、發展密切相關。C-反應蛋白（CRP）是一種急性時相蛋白，它由肝細胞產生，但其產生機制尚不清楚，可能與白細胞介素和前列腺素有關。正常人血清中C-反應蛋白含量極微，當機體處于驗證或組織損傷狀態時則C-反應蛋白會出現增高，而惡性腫瘤組織損傷嚴重，故會出現CRP升高的現象。α1-酸性糖蛋白（α1-AG）也是一種急性時相蛋白,在多種病理狀態下該蛋白將會發生特征性變化,在急性感染、損傷以及癌癥患者中,血清α1-AG含量呈不同程度升高。

本研究將構建受試者工作特征ROC曲線模型，綜合評價血清Ⅰ類 MHC 鏈相關蛋白 A（MICA）、C-反應蛋白（CRP）、α1-酸性糖蛋白（α1-AG）三種方法診斷惡性婦科腫瘤的效果并進行對比分析，以期為我國惡性婦科腫瘤尋找最佳的實驗診斷方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選用我院2010年2月～2011年10月47例惡性婦科腫瘤患者，年齡54～85歲，平均年齡（62.85±5.97）歲。同時選擇同期的健康體檢者20例作為健康對照組，年齡49～81歲，平均年齡（61.13±4.84）歲。實驗組均經病理診斷確診為惡性婦科腫瘤患者。排除標準①意識障礙、生命體征不穩定；②房顫等其他疾病；③嚴重精神疾病癥狀，臨床不能配合的患者；④嚴重肝腎疾病患者及嚴重全身消耗性疾病患者；⑤入院1周前有重大手術史；⑥異型蛋白血癥。所有入選者均簽署知情同意書。

1.2 檢測方法、儀器及試劑

ELISA法檢測血清MICA水平，人類MICA-ELISA試劑盒，牛血清清蛋白(BSA)，NaCl，KCl，Tween-20、Na2HPO4、KH2PO4、H2SO4等均購自Sigma公司，全波長酶聯儀購自美國Sunrise公司；采用免疫單純擴散法檢測血清CRP水平，抗CRP血清、單擴板、標準品均購自南京大學武進生化實驗工廠；采用透射混濁法測定血清α1-AG水平,寶靈曼試劑盒,奧林巴斯640型全自動生化分析儀。以上檢測均按操作說明進行。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 檢驗結果的描述性統計

實驗組與對照組的MICA、CRP、α1-AG的描述性統計結果。見表1。

表1 實驗組與對照組的MICA、CRP、α1-AG描述性統計（±s）

表1 實驗組與對照組的MICA、CRP、α1-AG描述性統計（±s）

MICA（ng/mL）CRP（mg/L） α1-AG（mg/L）實驗組對照組0.79±0.27 0.32±0.14 42.16+2.32 1.04±0.14 2130.13±650.24 625.91±180.72

2.2 對照組與實驗組的平均值的顯著性t檢驗

實驗組與對照組的MICA、CRP、α1-AG的平均值的顯著性t檢驗結果。見表2。

表2 實驗組與對照組的MICA、CRP、α1-AG的顯著性t檢驗

通過平均值的顯著性t檢驗，可以看出在1%的顯著性水平下，惡性婦科腫瘤患者的MICA、CRP、α1-AG指標均顯著大于對照組的數值。

2.3 不同檢測方法間的相關性

對MICA、CRP、α1-AG這些方法進行相關性檢驗，結果顯示，這些方法間有一定的相關性。

表3 不同檢測方法間的相關性

2.4 應用ROC曲線評價3種診斷方法的預測價值

根據ROC曲線法診斷切點的靈敏度和特異度，可以以靈敏度與特異度之和的最高值為診斷最優切點，不同檢測方法診斷AR準確性以ROC曲線下面積（AUROC）表示：MICA監測AR靈敏度、特異度和AUROC為97.8%、76.2%、0.810；CRP為97.8%、57.1%、0.918；α1-AG 為 93.5%、95.2%、0.835（具體內容見表 4，表5，ROC曲線及 AUC見圖 1）。

表4 ROC曲線的分析結果

表5 3種檢測方法不同診斷界值篩查效果分析

圖1 ROC分析結果

3 討論

惡性婦科腫瘤的實驗診斷尚缺乏“金標準”。理想的檢測方法應具有良好的靈敏度和特異度。因此本研究選用MICA、CRP、α1-AG三種標志物作為觀察指標，并利用ROC曲線法對診斷閾值的設定，對AR進行篩查，并對各種篩查方法進行靈敏度、特異度和準確性評價，進一步提高診斷效能。ROC曲線指受試者工作特征曲線 (receiver operating characteristic curve),是反映敏感性和特異性連續變量的綜合指標,是用構圖法揭示敏感性和特異性的相互關系，它通過將連續變量設定出多個不同的臨界值，從而計算出一系列敏感性和特異性，再以敏感性為縱坐標、（1-特異性）為橫坐標繪制成曲線，曲線下面積越大，診斷準確性越高。在ROC曲線上，最靠近坐標圖左上方的點為敏感性和特異性均較高的臨界值。本研究的結果顯示：MICA>0.3338(ng/mL)、CRP>3.0254(mg/mL)或 α1-AG>428(mg/mL)的患者可認為存在AR。ROC曲線下面積反映診斷試驗的準確性，實驗結果提示AUROC：CRP>α1-AG>MICA。可以認為，相比于其他兩種監測方法，CRP的診斷準確性最好，更有助于指導臨床的惡性婦科腫瘤的診斷。

C-反應蛋白是1930年學者Tillett等在急性大葉性肺炎患者的血清中發現的。CRP是人類重要的急性期反應蛋白，在急性期其濃度可升高上千倍，循環中的CRP半衰期為19h，它作為一種急性時相蛋白已經廣泛用于炎癥疾病的診斷。CRP陽性，可見于多種疾病如：腎炎、肺炎、各類惡性腫瘤及各種急性感染、體外傷以及組織壞死、心肌梗死、心功能不全、多發性骨髓瘤、白血病、膽石癥、肝炎、痢疾、風濕熱等疾病。近年來國際上已經有較多文獻報道建議把CRP作為診斷惡性腫瘤疾病的一個重要指標。此外據文獻報道，CRP的臨床測定值隨著臨床分期的增加而升高，因此在產科臨床上可以通過動態監測CRP水平來了解患者病情的嚴重程度并作為判斷疾病的預后情況，以達到婦科惡性腫瘤“早診斷、早治療”原則的目的，并有望根據標志物檢驗值的改變，調整臨床的治療方案，提高惡性婦科腫瘤患者的存活率。

[1]潘寶駿，張錫彬，劉少娟，等.SPSS中的ROC分析用于檢驗診斷方法的評價[J].海峽預防醫學雜志，2003，9（3）：16-20.

[2]劉堅，郡甫.多腫瘤標志物聯合檢測在婦科惡性腫瘤臨床治療中的應用研究[J].實用癌癥雜志,2008,3(5):480-482.

[3]張彩，馮進波，王郡甫，等．膜型／分泌型MICA對NK細胞受體NKG2D的相反調節效應及其對NK細胞受體譜的影響[J]．中華微生物學和免疫學雜志，2004，24（2）：107-111．

[4]Dunn GP，Koebel CM，Schreiber RD．Interferons，immunity and cancer immunoediting[J]．Nat Rev Immunol，2006，6（11）：836-848．

[5]Coudert JD，Held W．The role of the NKG2D receptor for tumor immunity[J]．Semin Cancer Biol，2006，16（5）：333-343．