云南白藥酊口服加外用的抗炎作用研究

張立群，閆俊嶺，張信岳，李 欽，陳愛君，汪苾菡，章琳莉

(1.云南白藥集團股份有限公司云南白藥研究院，云南昆明 650032;2.浙江省醫學科學院藥物研究所，浙江杭州 310013)

云南白藥歷經百年錘煉，成為了在傷科止血、活血、愈傷領域有顯著療效的中成藥瑰寶［1］。以云南白藥處方為基礎制成的云南白藥酊，具有活血散瘀，消腫止痛之功效，主要用于跌打損傷、風濕麻木、筋骨及關節疼痛、肌肉酸痛及凍傷等疾病的治療。本文就云南白藥酊對大鼠佐劑性關節炎和尿酸鈉致大鼠痛風性關節炎的拮抗作用，進行單純口服或外用以及口服加外用的實驗研究，進一步為臨床應用提供依據。

1 材料

1.1 藥物與試劑

云南白藥酊，棕褐色液體，由云南白藥集團提供，規格:90mL/瓶，批號:20080205;臨床用法:口服1次3～5mL，每日3次，最大量1次10mL;外用，適量擦揉患處，每日3～5次。阿司匹林 (腸溶片)，上海九褔藥業有限公司產品，批號:20040810;正骨水，廣西玉林制藥有限責任公司產品，批號:421115;Freund’s完全佐劑，Sigma公司產品，批號:063K8928;尿酸，Sigma公司生產，上海化學試劑公司分裝廠分裝，批號:080516;巴豆油合劑，配方為巴豆油:無水乙醇:蒸餾水:乙醚=0.2∶2∶0.5∶7.3，臨用新配。

1.2 動物

SD大鼠 (清潔級)，雄性，購自浙江省實驗動物中心，動物合格證:SCXK(浙)2003－0001。

2 方法

2.1 云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠的影響

雄性SD大鼠110只，體重170～200g，隨機分為正常對照組、模型對照組、阿司匹林150 mg/kg陽性對照組、正骨水 (外用)陽性對照組、云南白藥酊 (外用)組、云南白藥酊口服 (灌胃)組0.63，1.25，2.5mL/kg劑量、云南白藥酊口服(灌胃)加外用0.63，1.25，2.5 mL/kg劑量組，每組10只。參考文獻 ［2］方法及文獻 ［3］方法，除正常對照組外均在左側足趾皮內注射Freund’s完全佐劑50μL致炎，并從致炎前2d開始給藥，灌胃給藥為每天1次，給藥容積均為10mL/kg，外用方法為每天上、下午各1次，每次浸泡四肢踝關節以下部位1min，正常對照組及模型對照組均灌胃10mL/kg生理鹽水并用生理鹽水浸泡外用，致炎后第21d各組停藥，再繼續觀察3d。采用自制測量尺測量致炎足 (原發性)及對側足(繼發性)致炎前、后間隔一定時間的體積，按下列公式計算腫脹度;觀察繼發于大鼠前足紅腫的出現情況，按5級評分法評價前足紅腫程度 (0分，無紅腫;1分，小趾關節紅腫;2分，趾關節和足趾腫脹;3分，踝關節以下足腫脹;4分，包括踝關節在內全部足爪腫脹)。

腫脹度=(致炎后周長－致炎前周長)/致炎前周長×100%.

2.2 云南白藥酊對尿酸鈉致大鼠關節致炎的影響

雄性SD大鼠102只，體重170～200g，隨機分為對照組、阿司匹林150mg/kg陽性對照組、正骨水 (外用)陽性對照組、云南白藥酊 (外用)對照組、云南白藥酊口服 (灌胃)0.63，1.25，2.5mL/kg劑量組、云南白藥酊口服 (灌胃)加外用0.63，1.25，2.5mL/kg劑量組，每組10只。參考文獻 ［4］方法及文獻 ［5］方法 ，灌胃給藥容積均為10mL/kg，外用方法為局部涂抹致炎足 (左后肢踝關節周圍及以下部位)方法給藥，對照組灌胃10mL/kg生理鹽水并用生理鹽水浸泡外用，間隔30min后再同法給藥1次，2次給藥后立即在大鼠左后肢踝關節腔內注射10%的微晶型尿酸鈉生理鹽水混懸液0.1mL/只致炎，致炎后2h按前述方法再用藥1次，共3次，觀察致炎后2，4，6，24，48h大鼠的步行姿態，按5級評分法進行評分(0分，正常步行;1分，輕度跛行;2分，中度跛行;3分，用腳尖行走;4分，用3只腳行走)，用自制測量尺測定致炎前及致炎后2，4，6，24h致炎足踝周長，同上法計算腫脹度。

2.3 統計方法

3 結果

3.1 云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠的影響

從表1結果可見，大鼠以Freund’s完全佐劑造模后早期局部炎癥腫脹在3d后達峰值，然后逐漸消退，12d后致炎足再度腫脹，其后腫脹消退緩慢;云南白藥酊各用藥組用藥后，各時段致炎足腫脹度均低于模型對照組，其中單純灌胃3劑量組各有部分時段腫脹度與模型對照組相比有統計學差異(P＜0.05)，口服 (灌胃)加外用3劑量組多數時段腫脹度明顯低于模型對照組 (P＜0.05)，部分時段如致炎后9d，12d，18d，21d腫脹度甚至明顯低于單純外用組，提示云南白藥酊有抑制佐劑性關節炎大鼠原發病變的作用，而且口服 (灌胃)加外用各組對佐劑性關節炎大鼠的原發病變的抑制作用優于單純外用組。

從表2～3結果可見，云南白藥酊各用藥組對側足繼發腫脹度均低于模型對照組，致炎后18～21d前足紅腫計分也低于模型對照組，提示云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠的繼發病變有一定的防治作用。

表1 云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠致炎側足趾腫脹度 (原發病變)的影響 (，n=10)

表1 云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠致炎側足趾腫脹度 (原發病變)的影響 (，n=10)

注:*與模型對照組比較，P＜0.05;#與云南白藥酊單純外用組比較，P＜0.05。

表2 云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠對側足趾腫脹度 (繼發病變)的影響 (，n=10)

表2 云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠對側足趾腫脹度 (繼發病變)的影響 (，n=10)

注:*與模型對照組比較，P＜0.05。

表3 云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠前足紅腫評分的影響 (，n=10)

表3 云南白藥酊對佐劑性關節炎大鼠前足紅腫評分的影響 (，n=10)

注:*與模型對照組比較，P＜0.05。

3.2 云南白藥酊對尿酸鈉致大鼠關節致痛的影響

從表4結果可見，云南白藥酊口服以及口服加外用后各時段足踝腫脹度均低于對照組，多數時段與對照組相比有統計學差異 (P＜0.05)，提示云南白藥酊灌胃有一定的抑制尿酸鈉致大鼠關節炎腫脹的作用;云南白藥酊單純外用組雖然用藥后多數時段足踝腫脹度也低于對照組，但均無統計學差異;此外，外用加灌胃各組用藥后多數時段足踝腫脹度均低于單純外用組，部分時段 (如致炎后2h外用加中、低劑灌胃組以及致炎后6，24h外用加高劑量灌胃組)存在統計學差異 (P＜0.05)，提示外用加灌胃各組作用優于單純外用組。

從表5結果可見，云南白藥酊各用藥組用藥后各時段步態計分均低于同期對照組，且多數有統計學差異 (P＜0.05)，提示云南白藥酊無論是單純外用或灌胃對尿酸鈉致關節炎大鼠的關節疼痛均有較好的抑制作用;同時，由于外用加灌胃各組用藥后多數時段步態計分低于單純外用組，部分時段(如致炎后4，6，24h外用加高劑量灌胃組)存在統計學差異 (P＜0.05)，提示外用加灌胃各組作用優于單純外用組。

表4 云南白藥酊對尿酸鈉致大鼠關節炎 (足踝)腫脹度的影響 (，n=10)

表4 云南白藥酊對尿酸鈉致大鼠關節炎 (足踝)腫脹度的影響 (，n=10)

注:*與模型對照組比較，P＜0.05;與云南白藥酊單純外用組比較，P＜0.05。

表5 云南白藥酊對尿酸鈉致大鼠關節疼痛的影響 (，n=10)

表5 云南白藥酊對尿酸鈉致大鼠關節疼痛的影響 (，n=10)

注:*與模型對照組比較，P＜0.05;與云南白藥酊單純外用組比較，P＜0.05。

4 討論

云南白藥酊口服或外用能明顯抑制佐劑性關節炎大鼠致炎足的原發性腫脹以及對側足的繼發性腫脹，降低紅腫計分，表明云南白藥酊對大鼠佐劑性關節炎有治療作用，而且口服加外用各組對佐劑性關節炎大鼠的原發病變的抑制作用優于單純外用組。云南白藥酊口服或口服加外用能明顯抑制尿酸鈉致大鼠關節炎腫脹，均能明顯降低該模型大鼠步態計分，表明云南白藥酊對尿酸鈉致關節炎大鼠的關節腫脹以及關節疼痛均有較好的抑制作用，且口服加外用各組用藥后多數時段步態計分低于單純外用組。云南白藥酊是一個既能外用又能口服的中藥制劑，對于跌打損傷、風濕麻木、筋骨及關節疼痛、肌肉酸痛等疾病有較好的治療作用，口服加外用效果更佳。

［1］高崇昆，劉國忠，張立群，等.云南白藥探秘［M］.昆明:云南科技出版社，2002:12.

［2］李曉紅，趙永娜，李兵蘭，等.滇產粗根蕁麻水提取部分對佐劑性關節炎大鼠腹腔巨噬細胞分泌TNF－α的影響［J］.云南中醫學院學報，2007，30(6):21.

［3］張雯麗，肖金魚.風濕痛消丸對佐劑性關節炎模型動物的抗炎鎮痛作用研究［J］.中國中醫急癥，2011，20(1):96.

［4］張荒生，王進軍.痛風顆粒對尿酸鈉關節炎模型大鼠踝關節腫脹度、血清LP－PLA2的影響［J］.中國中醫急癥，2009，18(7):1133.

［5］張春，唐怡，劉軍，等.痛風靈方對急性痛風性關節炎大鼠步態和關節周徑變化的影響［J］.中國臨床康復，2004，8(23):4802 －4804.