高效液相色譜法分析甘草炮制前后化學成分的變化

石敏娟，高錦成，王衛(wèi)峰，秦明莉，楊 柳

(1.陜西省中醫(yī)藥研究院，陜西 西安 710003; 2.陜西省西安市第四醫(yī)院，陜西 西安 710003;3.陜西省西安冶金醫(yī)院，陜西 西安 710003)

甘草是豆科植物甘草 Glycyrrhiza uraienxis Fisch的根及根狀莖，性味甘平，能調(diào)和諸藥，為常用中藥[1]，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品[2－4]。其主要有甘草、蜜炙甘草兩種炮制品[3]，現(xiàn)代藥理學研究表明，二者調(diào)節(jié)免疫的作用存在明顯差異，蜜炙甘草作用顯著強于甘草[5]。孫付軍等[6]研究表明，甘草蜜炙后可增強補益功能。筆者用高效液相色譜法研究甘草炮制前后化學成分的變化，以探討中藥炮制的合理性、科學性。

1 儀器與試藥

Waters 2690型高效液相色譜儀(DAD二極管陣列檢測器，美國Waters公司);臺式離心機(上海安亭科學儀器廠);電子天平(德國Sartorius);控溫電熱套(北京科偉電子儀器公司)。甘草、蜜炙甘草，均購自北京同仁堂西安店，經(jīng)陜西省中醫(yī)藥研究院王衛(wèi)峰副主任藥師鑒定為豆科植物脹果甘草 Glycyrrhiza inflata Batal的干燥根及根莖;甲醇(fisher)，水(去離子水)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:Diamond C18柱(200 mm × 4.6 mm，5 μm);流動相:甲醇(A)－水(B)，梯度洗脫(表 1);柱溫:30℃;流速:1 mL/min;檢測波長:254 nm;進樣量:30 μL。

2.2 供試品溶液制備

精密稱取甘草、炙甘草各1.0 g，加入30倍蒸餾水回流提取60 min，過濾，提取液分別濃縮至1 mL。將制備好的兩種藥液3000 r/min離心10 min，即得供試品溶液，微孔濾膜過濾后測定。

2.3 高效液相色譜分析結果

結果見圖1?？梢?，炙甘草的色譜圖保留了甘草的大部分特征峰，但是23，24 min時甘草的2個特征峰消失，而在29 min出現(xiàn)1個新的特征峰。

3 討論

生甘草性味甘、平，炙甘草甘、溫。生用治療咽喉腫痛、癰疽、解藥毒或食物中毒，炙用治療脾胃虛弱、食少、腹痛便溏、勞倦發(fā)熱、肺痿咳嗽、心悸、脈結代[7]。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認為，甘草蜜炙前后藥效學存在一定變化，本研究結果從化學成分變化的角度解釋了這種藥效學的差異。

表1 流動相梯度洗脫表

圖1 高效液相色譜圖

蜂蜜的化學成分以還原糖為主[8]，能防止或減少藥材中有效成分氧化變質(zhì)。此外，甘草在蜜炙過程中需要加熱，這兩個因素可能是造成色譜圖差異的主要原因。

今后，筆者將繼續(xù)研究，從根本上闡明甘草蜜炙的原理，證明其科學性。

[1]孫 鵬.甘草化學成分研究[J].中國醫(yī)藥指南，2010，30(8):226－227.

[2]劉 磊，呂冬梅，楊 薇.炮制因素對甘草中有效成分甘草苷和甘草酸的影響[J].徐州醫(yī)學院學報，2009，29(10):637－640.

[3]朱衛(wèi)星，李愛光，陳 方，等.蜜炙甘草炮制工藝的研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥，2005，16(10):967.

[4]王存琴，龍泉江.甘草炮制的文獻研究[J].甘肅中醫(yī)，2007，20(3):42－44.

[5]王明喜，石志強.生甘草炙甘草臨證應用考辨[J].實用中醫(yī)內(nèi)科雜志，2005，19(4):383.

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[8]閆玲玲，楊秀芬.蜂蜜的化學組成及其藥理作用[J].特種經(jīng)濟動植物，2005，2:40－41.