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不同濃度黃茶對SD大鼠的胃損傷預防效果

2012-07-29 14:35:34鄧瀟瀟
重慶第二師范學院學報 2012年6期
關鍵詞:水平

鄧瀟瀟,趙 欣

(重慶第二師范學院 1.通識教育部;2.生物與化學工程系,重慶 400067)

黃茶為我國特有的茶類,由綠茶加工工藝發展而來,特殊的悶黃工藝造就了其獨特的“三黃”品質(干茶黃、湯色黃、葉底黃),被茶葉專家推薦為適宜飲用的茶類[1]。其中產于四川的蒙頂黃芽是我國傳統黃茶名品,在唐朝就作為貢茶直至清末,不僅表現在風味佳,也作為一種健康飲品得到人們的認同。黃茶中富含茶多酚、氨基酸、可溶糖、維生素等豐富營養物質,具有預防癌癥的功效。此外,黃茶鮮葉中天然物質保留有85%以上,而這些物質對殺菌、消炎均有特殊效果[2]。胃損傷是消化道疾病的高發病率的主要原因之一,產生胃痛和胃部不舒適,主要體現是反酸、燃心、腹脹、消化不良、胃口欠安等,刺激性物質和一些藥物都可能會引起胃損傷。近年關于黃茶在保健方面的研究已經陸續展開,為了驗證黃茶的抗胃損傷效果,本研究初步對蒙頂黃茶進行了大鼠體內抗胃損傷功能性的研究。

1 材料與方法

1.1 樣品

黃茶:四川省蒙頂皇茶茶業有限責任公司出品的蒙頂皇茶牌蒙頂黃芽,進行冷凍干燥后用沸水3次提取,蒸干后得到水提物待用。

1.2 實驗動物

七周齡SD大鼠購于重慶醫科大學實驗動物中心,在溫度為23±1℃,相對濕度50±5%環境下飼養,大鼠自由攝取飲水和大鼠標準飲食。

1.3 大鼠誘導胃損傷

將實驗大鼠分為5組,分別為正常組(按標準方法飼養大鼠,不進行任何實驗處理)、對照組(按標準方法飼養大鼠,不進行樣品處理,最后誘導胃損傷)、實驗組(用黃茶樣品灌胃大鼠,并且最后誘導胃損傷),每組10只。在隨后兩周內將黃茶水提物按250,500和1000 mg/kg濃度對實驗組SD大鼠每天實施灌胃一次。兩周后對除正常組外各組大鼠用1 ml乙醇溶液(乙醇溶于150 mM鹽酸配制成60%的乙醇溶液)進行灌胃胃損傷誘導,1小時后處死各組大鼠,取大鼠血漿,胃和胃液進行測定。

1.4 酶聯免疫法(ELISA法)測定血清中細胞因子IL-6和 TNF-α

取 2 mL動脈血,4℃,3000 r/min離心分離10分鐘取上層血清。IL-6和 TNF-α定量酶聯檢測試劑盒按ELISA方法操作后用 Bio-Rad 550酶標儀(美國)檢測血清中上述兩種細胞因子水平。

1.5 胃損傷程度測定

將大鼠的胃用10%福爾馬林固定,拍照后用ImageJ軟件分析胃損傷程度。

1.6 胃液量和胃液pH值測定

取解剖后大鼠的胃液測定胃分泌量,用ServenEasy pH計(瑞士Mettler-Toledo公司)測定pH值。

2 結果與分析

2.1 大鼠血清中細胞因子IL-6和 TNF-α水平

通過酶聯免疫法測定血清中IL-6細胞因子水平,正常組、對照組、250,500和1000 mg/kg濃度黃茶灌胃各組的因子水平為 52.1±4.5、271.2±10.2、250.7±11.2、206.3±9.8 和 144.3±12.2 pg/mL。TNF-α 細胞因子水平與 IL-6相似,測得各組大鼠的細胞因子水平為 127.5±14.6、843.3±22.2、715.3±18.5、635.4±20.6 和 438.4±19.4 pg/mL(圖1)。由此可以看出隨著黃茶灌胃濃度的提高,IL-6和TNF-α細胞因子水平隨之下降,并且實驗各組大鼠的細胞因子水平均明顯低于對照組。IL-6和 TNF-α細胞因子水平降低表示炎癥程度降低[3],可以得到黃茶均有降低胃損傷程度的結果。

圖1 各組大鼠血清的IL-6和 TNF-α細胞因子水平

2.2 胃損傷水平

對各組大鼠進行胃損傷誘導后,對照組大鼠的胃損傷程度為14.2±3.4 mm2。 黃茶水提物對大鼠進行灌胃后各組大鼠的胃損傷程度均有一定程度下降。采用1000 mg/kg濃度灌胃的大鼠的胃損傷程度和抑制率為 3.6±1.1 mm2和 74.6%,500 和 250 mg/kg濃度黃茶灌胃時胃損傷抑制率分別為 6.2±1.6, 12.6±2.2 mm2 和 56.3,11.3%(表1,圖2)。由此可以看出,隨著黃茶灌胃濃度的增加胃損傷程度下降,黃茶對胃損傷具有一定的預防作用。

表1 各組大鼠的胃損傷程度和胃損傷抑制率

圖2 各組大鼠的胃損傷外觀觀察

2.3 大鼠胃液量和胃液pH值

胃損傷出現時,胃液分泌量會增加,同時胃液正常pH值也會降低[4]。本實驗中正常組的胃液分泌量和胃液pH 值為 1.3±0.3 ml和 3.7±0.8;對照組的胃液分泌量和胃液 pH 值為 3.2±1.0 ml和 1.2±0.2。 黃茶實驗組大鼠的胃液分泌量隨著灌胃濃度增加而減少,250、500和1000 mg/kg濃度灌胃時分別為 2.8±0.5、2.4±0.5 和 1.8±0.5 ml;胃液pH值隨著灌胃濃度增加而增加,分別為2.1±0.4、2.6±0.4 和 3.1±0.4 (圖 3)。可以看出隨著黃茶濃度的提高,對胃損傷的預防效果得到了增強。

圖3 各組大鼠的胃液分泌量和胃液pH值

3 討論

胃損傷最直接的表現為出現炎癥,IL-6和TNF-α是炎性細胞因子,在臨床上通過測定IL-6和TNF-α細胞因子水平可以判定各種炎癥的程度,包括胃炎[4,5]。酒精引起的急性胃損傷主要表現為胃黏膜炎癥,可造成胃黏膜上皮層發生改變、破壞上皮頂端胞漿膜,導致細胞脫落及胃多發糜爛、潰瘍,如累及血管則可引起出血,是急性酗酒后易發的臨床疾病[6]。飲用保健飲料是預防由于酒精引起的胃損傷的方法之一。黃茶作為一種保健茶葉飲品,其部分功能性已經得到證實。本文以蒙頂黃茶為基準進行了動物體內抗胃損傷比較實驗,從血清細胞因子水平、胃損傷程度、胃液分泌量和pH值結果得出黃茶具有一定的胃損傷預防效果。黃茶對人體的臨床作用也有待更深層次的研究。

[1]周繼榮,倪德江,陳玉瓊,等.黃茶加工工程品質變化的研究[J].湖南農業科學,2001,1:93-95.

[2]趙欣.黃茶的HT-29人體結腸癌細胞的體外抗癌效果[J].北京聯合大學學報(自然科學版),2009,23(3):11-13.

[3]張信,張國安.胃炎患者胃竇IL-6活性和TNF-α含量的檢測[J].胃腸病學和肝病學雜志,1998,7(1):42-44.

[4]Ku CS, Mun SP.Antioxidant activities of ethanol extracts from seeds in fresh Bokbunja(Rubus coreanus Miq.)and wine processing waste[J].Bioresource Technology, 2008,99(10): 4503-4509.

[5]范恒,邱明義,梅家俊,等.理腸四方對潰瘍性結腸炎大鼠組織細胞因子 TNF-α IL-6 IL-8 IL-10 的影響[J].中醫藥學刊,2004,9:1624-1627.

[6]任建林,潘金水,董菁.酒精性胃病[J].世界華人消化雜志,2005,13(17):2061-2063.

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