心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響

肖 寒 付雯雯 周小涵 曲紹春 于曉風 睢大筼 (吉林大學藥學院藥理教研室，吉林 長春 3002)

心悅膠囊是以西洋參(Panax Quinquefolium Linn)莖葉總皂苷為原料研制的國家中藥二類新藥，具有益氣養心、和血功能，主要用于冠心病心絞痛屬于氣陰兩虛證者。藥理研究表明，西洋參莖葉總皂苷能明顯改善急性心肌梗死犬心臟血流動力學，降低心肌耗氧量〔1〕，縮小心肌缺血大鼠的心肌梗死面積，降低血清肌酸磷酸激酶、乳酸脫氫酶活性〔2〕。由于心腦血管缺血缺氧疾病與中醫的“血瘀證”密切相關，而目前有關心悅膠囊防治血瘀證及其辨證分型的研究尚未見報道。本文擬評價心悅膠囊的活血化瘀作用。

1 材料與方法

1.1 動物 清潔級Wistar大鼠，雌雄各半，210～240 g，合格證號SCXK-(吉)2007-0003，由吉林大學實驗動物中心提供。

1.2 實驗藥品及儀器 心悅膠囊由吉林省集安益盛藥業股份有限公司提供，批號:20111015，規格:每粒裝0.3 g(相當于西洋參莖葉總皂苷50 mg)，用法用量:口服，2粒/次，3次/d，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液。復方丹參片由上海雷允上藥業有限公司生產，每片280 mg，批號:20111202，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液。0.1%鹽酸腎上腺素注射液，1 mg/ml，北京永康制藥廠出品，批號:2009103029。LBY-N6A旋轉式血液黏度計，LBY-NJ2型血小板聚集儀:北京普利生集團產品;XN3型紅細胞電泳計時器:上海第一醫學院產品。

1.3 實驗方法 60只大鼠隨機分為對照組、模型組、復方丹參組及心悅膠囊150、300、600 mg/kg組，每組10只。藥物組每天灌胃給藥1次，連續6 d，對照組及模型組給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉2 ml/kg。除對照組外，其他各組大鼠均皮下注射0.1%腎上腺素0.8 ml/kg，2 h后將大鼠浸入冰水中5 min，2 h后再按0.1%腎上腺素0.6 m/kg注射一次以復制急性血瘀模型〔3〕。大鼠復制急性血瘀模型后禁食不禁水12 h，第7天給藥后1 h，每組動物以戊巴比妥鈉30 mg/kg腹腔注射麻醉，腹主動脈取血，肝素抗凝。從加有抗凝劑的4 ml全血中取出1 ml加入LBY-N6A旋轉式血液黏度計，分別測定全血低切(10/s)、中切(80/s)及高切(160/s)黏度，余下 3 ml全血以3 000 r/min離心10 min，取上層血漿1 ml加入黏度計測定血漿黏度(160/s)。以微量熱沉淀法〔4〕測定血漿纖維蛋白原(Fib)濃度;腹主動脈取血 1.5 ml，109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝。1 500 r/min離心5 min，取上層富血小板血漿(PRP)，余血3 000 r/min離心10 min，取貧血小板血漿(PPP)，用PPP調PRP至血小板數6×1011/L～7×1011/L。以LBY-NJ2型血小板聚集儀按比濁法〔5〕測定血小板聚集活性，求出1、3、5 min的血小板聚集率(PAG)及最大血小板聚集率(MPAG);以微量毛細管法〔6〕測定紅細胞壓積(Hct);通過XN3型紅細胞電泳計時器測定紅細胞電泳時間(RCET);測血沉(ESR);進一步推算出紅細胞聚集指數(EAI)及紅細胞剛性指數(ERI)。

2 結果

2.1 心悅膠囊對大鼠急性血瘀模型全血及血漿黏度的影響模型組大鼠全血低、中、高切黏度及血漿黏度均明顯增加，與對照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。心悅膠囊300、600 mg/kg組可使全血低、中、高切及血漿黏度均明顯降低，與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，其作用效果與復方丹參片200 mg/kg相當。心悅膠囊150 mg/kg組對全血低、中、高切黏度及血漿黏度均無明顯影響(P＞0.05)。見表1。

2.2 心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影響模型組大鼠1、3、5 min PAG及MPAG均明顯升高，與對照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。心悅膠囊 300、600 mg/kg組均可使1、3、5 min PAG及MPAG明顯降低，與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，其作用效果與復方丹參片200 mg/kg相當。心悅膠囊 150 mg/kg組對1、3、5 min PAG及MPAG均無明顯影響(P＞0.05)。見表2。

2.3 心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響 模型組大鼠血漿 Fib、ESR、Hct、EAI及 ERI均明顯增加，RCET 明顯延長，與對照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。心悅膠囊600 mg/kg組可使大鼠血漿Fib、ESR及Hct明顯降低，與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，對EAI、ERI及RCET均無明顯影響(P＞0.05)。心悅膠囊 150、300 mg/kg組對上述血液流變學的異常變化均無明顯改善作用(P＞0.05)。見表3。

表1 心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血液黏度的影響(±s，n=10)

表1 心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血液黏度的影響(±s，n=10)

與對照組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;與模型組比較:3)P＜0.05，4)P＜0.01;下表同

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表2 心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影響(±s，n=10，%)

表2 心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能的影響(±s，n=10，%)

組別 PAG 1 min 3 min 5 min MPAG對照組 25.50±8.52 37.10±8.55 17.50±8.56 38.14±9.68模型組 40.21±11.52)50.98±12.81)32.66±10.32)57.02±12.42)心悅膠囊組150 mg/kg 35.87±10.6 45.31±11.4 28.51±12.8 48.92±13.2 300 mg/kg 26.66±8.373)38.01±9.743)21.04±8.723)41.32±12.73)600 mg/kg 26.35±9.783)37.17±9.153)17.86±8.134)38.63±8.384)復方丹參組 25.88±8.644)37.22±8.423)17.72±9.034)39.01±8.544)

表3 心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響(±s，n=10)

表3 心悅膠囊對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響(±s，n=10)

組別 劑量(mg/kg) Fib(%) ESR(%) Hct(%) RCET(s)EAI ERI對照組 － 1.52±0.40 3.22±0.78 40.58±9.25 18.40±4.351.55±0.68 6.15±0.87模型組 － 2.29±0.522) 4.60±1.062) 55.35±12.41) 25.16±5.181) 2.30±0.791) 7.95±1.492)心悅膠囊組 150 2.10±0.42 4.48±1.15 53.17±10.6 25.19±6.81 2.13±0.83 7.58±1.38 300 1.95±0.45 4.02±1.33 48.28±9.18 23.22±5.76 1.98±0.92 6.98±1.62 600 1.54±0.314) 3.58±0.873) 40.76±8.123) 21.02±7.68 1.85±0.95 6.87±1.85復方丹參組 200 1.56±0.254) 3.42±0.913) 40.65±9.133) 19.25±6.33 1.68±0.583) 6.43±1.053)

3 討論

中醫理論認為，“暴怒”之機多為“肝火上亢”，突遇“外寒之邪”侵襲可引發“寒凝氣滯”，致使血行不暢、脈胳不通、心胸痹阻、瘀阻血脈，最終造成血瘀證。本文根據血瘀證的“暴怒”“寒邪”機制，采用大劑量腎上腺素加冰水冷浴法復制出血流變性呈黏、濃、凝、集狀態的血瘀模型，符合中醫活血化瘀藥物的治療原則〔7〕。

血液流變學是研究血液流動性、變形性、凝固性及心血管黏滯性的科學。最常見的檢驗項目為全血黏度、血漿黏度、Fib、ESR及Hct等。血液黏度是衡量血液流變性的指標，黏度越高，流動性越小，越易堵塞血管形成血栓。血液黏度主要由Hct，血漿黏度及紅細胞聚集性等因素決定〔8〕。本實驗結果表明，心悅膠囊可使急性血瘀模型大鼠全血黏度、血漿黏度、Fib濃度、ESR及Hct均明顯降低，說明其能抑制紅細胞聚集，降低紅細胞脆性，增強其變形性。本實驗還發現，急性血瘀模型大鼠血小板聚集功能增強，符合臨床上氣滯血瘀證的表現，與文獻報道一致〔9〕。心悅膠囊可使大鼠血小板聚集功能明顯降低，表明其對氣滯血瘀有良好的治療作用。這對于防止缺血性心血管疾病時的高黏狀態、預防血栓形成均具有益處。

1 呂忠智，于曉風，金 毅，等.國產西洋參莖葉總皂甙對犬心肌血流量及氧代謝的影響〔J〕.中國藥學雜志，1992;27(2):272-4.

2 邊 城，呂忠智.西洋參莖葉皂苷對實驗性心肌壞死的保護作用〔J〕.中國藥理學通報，1994;10(3):442-4.

3 陳民利，壽旗揚，潘永明，等.冠心寧片對氣滯血瘀大鼠抗血小板聚集和保護血管內皮作用〔J〕.中國臨床藥理學與治療學，2005;10(5):586-9.

4 肖 寒，于曉風，曲紹春，等.碟脈靈注射液對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響〔J〕.中國實用醫藥，2007;2(32):11-4.

5 何小溪，徐華麗，于曉風，等.人參Rb組皂苷對急性血瘀模型大鼠血小板聚集及血液流變學的影響〔J〕.中國藥理學通報，2007;23(9):1259-60.

6 姜紅玉，于曉風，睢大筼，等.刺五加葉皂苷對實驗性腦缺血大鼠血液流變學及血小板功能的影響〔J〕.吉林大學學報(醫學版)，2004;30(3):384-6.

7 瑞 香，羅致強，朱雅宜，等.冠心病血瘀血液理化特性與中醫證型相關性研究〔J〕.中醫雜志，2002;43(4):378-9.

8 于曉風，曲紹春，劉 巍，等.西洋參莖葉20s-原人參二醇組皂苷對實驗性腦缺血大鼠血小板功能及血液流變學的影響〔J〕.中藥材，2011;34(2):272-5.

9 武繼彪，隋在云，許復郁.慢性血瘀證動物模型的建立及其血液流變學的變化〔J〕.中藥藥理與臨床，2001;17(1):45-6.