劉俊棟,劉海霞,趙 佳,邵春艷,劉宗平,李建基
(1.江蘇畜牧獸醫職業技術學院,江蘇 泰州 225300;2.揚州大學獸醫學院,江蘇 揚州 225009)
隨著奶牛集約化飼養規模的擴大和產奶量的提高,奶牛真胃變位的發病率逐漸增多,主要發生在飼喂高精料的圍產期奶牛,過食精料后,瘤胃內可產生大量的揮發性脂肪酸(VFA)。據報道,真胃中VFA能明顯抑制真胃平滑肌的收縮,是導致真胃弛緩的主要原因[1-2]。VFA中對動物體代謝作用最為重要的有直鏈乙酸、丙酸和丁酸,其中乙酸含量最高,占總VFA的70%~75%。本試驗采用生物信號采集系統來觀察不同濃度的乙酸及其鈉鹽對真胃平滑肌收縮的影響,借以探討真胃弛緩與乙酸濃度的關系。
1.1 試驗材料 健康成年荷斯坦奶牛10頭(由揚州大學農牧場提供),體重500~550kg。臺氏液[3],MedLab生物信號采集處理系統,JZ101型張力換能器,電熱恒溫水浴鍋,ZC-10型智能型超級恒溫水槽,氧氣袋,乙酸等。
1.2 試驗方法
1.2.1 MedLab生物信號采集處理系統的準備開啟MedLab生物信號采集處理系統,零點設置。打開ZC-10型智能型超級恒溫水槽,溫度設為38℃,使浴槽內溫保持為38℃±0.5℃。在浴槽內加入臺氏液,通入含95%氧氣和5%二氧化碳的混合氣體,并維持1~2個氣泡/s。
1.2.2 離體真胃平滑肌的制備 麻醉后仰臥保定成年健康母牛,實施手術制備離體真胃平滑肌,將所取的離體平滑肌條在盛有臺氏液的培養皿中漂洗干凈,按平滑肌纖維長度方向修剪成1.0cm×0.2cm的縱行肌條,與張力換能器相連,將肌條固定在含臺氏液(38℃±0.5℃)的浴槽中,并持續供給含95%氧氣和5%二氧化碳的混合氣體。
1.2.3 試驗過程 肌條溫浴(38℃±0.5℃)1h,記錄正常真胃平滑肌自發收縮強度(g),然后采用分離加藥和累計加藥的方法[4],向浴槽內加入試驗藥品,記錄肌條收縮強度,分別觀察20~75mmol/L乙酸和2~5mmol/L的乙酸鈉對真胃平滑肌收縮強度的變化,試驗均重復10次。
1.2.4 數據處理 以加藥前5min真胃平滑肌的收縮強度作為對照值,以給藥后第2、3、4min的平均值作為效應值,收縮強度的改變用變化百分數來表示[變化百分數=(效應值-對照值)÷對照值×100%];數據以平均數±標準差表示,采用SPSS 13.0軟件進行數據處理。
2.1 乙酸對奶牛離體真胃平滑肌的作用 8~20 mmol/L和21~35mmol/L的乙酸能使真胃平滑肌條的收縮強度被明顯抑制。隨著浴槽中乙酸濃度的上升,真胃平滑肌收縮強度顯著降低(P<0.01),且均呈劑量-效應關系,見表1、表2。在40~55 mmol/L乙酸濃度范圍內,隨著浴槽中乙酸濃度升高,真胃平滑肌的收縮活動興奮(P<0.05),且均呈劑量-效應關系,見表3。60~75mmol/L乙酸對離體真胃平滑肌作用不明顯(P>0.05)。隨著浴槽中乙酸濃度的不斷升高,真胃平滑肌的收縮平穩,并沒有明顯變化,見表4。2.2 乙酸鈉對奶牛離體真胃平滑肌的作用 2~5 mmol/L乙酸鈉對離體真胃平滑肌并沒有顯著作用(P>0.05),見表5。

表1 8~20mmol/L乙酸對真胃平滑肌的影響(n=10)

表3 40~55mmol/L乙酸對離體真胃平滑肌的作用(n=10)

表4 60~75mmol/L乙酸對離體真胃平滑肌的作用(n=10)

表5 2~5mmol/L乙酸鈉對離體真胃平滑肌的影響(n=10)
真胃平滑肌與其他平滑肌一樣,具有興奮性、傳導性、收縮性以及對化學、溫度和刺激敏感等特點。真胃平滑肌離體之后,置于適宜的溫度環境,仍能在一段時間內進行節律性收縮,環境中各種理化因素,如環境的改變、酸堿度、滲透壓、一些特殊的無機鹽離子,甚至生物活性物質以及供氧和牽拉等刺激,都可以改變真胃平滑肌的收縮活動,表現為收縮的節律、強度等方面的改變。乙酸及其鹽類,現在普遍被應用于飼料中[5]。本試驗活體取奶牛真胃肌條,并置于適宜的溫度環境下,參照機體真胃液內的正常乙酸濃度設計試驗,觀察單一因素對真胃的影響,能夠更直觀的觀察造成真胃弛緩的因素。
通過試驗,可以觀察到不同濃度的乙酸對真胃平滑肌的收縮活動影響不同。8~35mmol/L的乙酸能抑制真胃平滑肌的收縮(P<0.01);40~50 mmol/L乙酸能增大真胃平滑肌的收縮強度(P<0.05);60~75mmol/L的乙酸對真胃平滑肌的收縮無顯著影響(P>0.05);2~5mmol/L乙酸鈉對離體真胃平滑肌的收縮均沒有顯著影響(P>0.05)。本試驗中所取乙酸濃度跨度較大,幾乎囊括了乙酸在機體內的所有生理值。這樣可以觀察到各種濃度乙酸對真胃平滑肌的作用。正常真胃液中乙酸含量為44mmol/L左右,與本試驗中40~55 mmol/L的乙酸濃度對真胃平滑肌有興奮作用這一結果相同。乙酸鈉進入機體后,其有效成分是乙酸,2~5mmol/L乙酸鈉對真胃平滑肌沒有明顯作用,這可能與選擇的濃度有關系。
[1]徐占云,秦睿玲,李繼連.奶牛皺胃變位發病因素的調查[J].中國獸醫雜志,2008,44(3):68-70.
[2]Geishauser T,Duffield L.Prevention and prediction of displaced abomasums in dairy cows[J].Bovine Pract,2000,34:51-55.
[3]瞿頌義,鄭天珍,李偉.縮膽囊素和促胰液素對豚鼠離體胃平滑肌運動的作用[J].生理學報,1995,47(3):305-309.
[4]高宇勤,秦曉民,徐敬東,等.黃連水煎劑對未孕大鼠離體子宮平滑肌運動的影響[J].中藥藥理與臨床,2002,18(5):33-34.
[5]荀文娟,劉強,張延利.兩種常見乙酸鹽在畜牧生產中的應用[J].飼料博覽,2008(1):35-38.