生物安全柜安全使用，維護及注意事項

趙利可

昆明市疾病預防控制中心，云南 昆明 650228

1 生物安全柜的結構原理及作用

生物安全柜由箱體、過濾器、風機系統、排氣管道及電器控制系統組成。它的作用是：提供對人員、樣品和環境的三重保護。

1.1 風機系統

風機在電器系統控制提供風量維持恒定氣流流速。

1.2 過濾器

過濾器起到過濾細菌和灰塵顆粒的作用。目前常采用的是對0.3ìm塵埃粒子擁有截流效率為99.99%的HEPA高效過濾器，以及99.9998%的截流效率的ULPA超高效過濾器。后有更佳的過濾效率、更緊密的結構和更大的單位過濾面積，可為工作區域提供相當于ISO3級的潔凈度。

1.3 控制和警報系統

安全柜的控制系統用于監控生物安全柜的各項操作數值，及時發現任何故障和誤操作，以聲光警報通知用戶采取措施，并自動采取相應的聯鎖安全措施。系統帶有溫度補償功能的流速傳感器，可以測定真實的氣流流速，包括進氣流、下沉氣流和外排氣流（B2）；LCD液晶顯示屏實時顯示氣流流速/流量。對氣流流速過低或不安全前窗高度，系統都會發出聲光警報。

2 生物安全柜依據的標準及級別

2.1 現行的生物安全柜檢測主要標準依據有

①美國NSF/ANSI 49—2002《Class II(Laminar Flow)Biosafety Cabinetry》；②JG 170-2005中華人民共和國建筑工業行業標準《生物安全柜》；③歐盟 EN 12469：2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》；④YY 0569-2005 中華人民共和國醫藥行業標準《生物安全柜》。

2.2 生物安全柜的級別

目前，生物安全柜有一級生物安全柜、二級生物安全柜和三級生物安全柜3中類型。

2.2.1 一級生物安全柜 一級生物安全柜可提供對人員和環境的保護，而不保護樣品，它依賴外接通風管中的風機帶動氣流經排氣口HEPA過濾器排出。但目前使用較少，是因為一級生物安全柜不能夠保護樣品。

2.2.2 二級生物安全柜 由于可提供工作人員、環境和產品的保護，因此應用最廣泛。按照《中華人民共和國醫藥行業標生物安全柜準YY0569-2005生物安全柜》中的規定，二級生物安全柜依照排氣方式、循環方式和入口氣流風速可分為A1型，A2型，B1型和B2型4個級別。

A1型安全柜中30%的氣體通過排氣口過濾排出，70%氣體通過HEPA過濾器再循環至工作區，前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.38m/s。

A2型安全柜中30%的氣體通過排氣口過濾排出，70%氣體通過HEPA過濾器再循環至工作區，前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。

B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除，30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環至工作區。

B2型為100%全排型安全柜，無內部循環氣流，可以操作揮發性核放射物和揮發性化學品作為添加劑的微生物實驗，又可同時提供化學性和生物性的安全控制。

2.3 三級生物安全柜

生物安全防護等級為4級實驗室采用的是三級生物安全柜，其柜體完全氣密，通過連接在柜體的手套，俗稱手套箱，工作人員才可進行操作，為確保不受污染，試驗品需通過雙門的傳遞箱進出安全柜，適用于高風險如進行埃博拉病毒、SARS的相關實驗等。

3 生物安全柜年度檢測檢修

生物安全柜標準規范規定在如下的情況必需做檢修或檢測：①實驗室竣工后、投入使用前；②挪動位置后；③更換配件或濾器后；④年度常規檢測。

3.1 生物安全柜年度檢測的項目

生物安全柜年度檢測的項目可參照JG 170-2005推薦檢測項目。

3.2 生物安全柜年度維護的方式

生物安全柜的維護可采用如下的方式

①選擇生物安全柜生產廠家或專業維護公司提供的定期或不定期的維保，每年定期對生物安全柜進行檢測檢修、更換配件并排除故障；

②選擇具有檢測資質的檢測單位進行檢測認證，出具具有法律效力的檢測報告。

③委托專業公司承擔年度維護，定期檢修，并由其委托檢測單位進行檢測。

3.3 生物安全柜年度維護的注意問題

①維護人員必須具有生物安全防護專業知識與裝備；②不得打開通風系統，如因故障必須打開，打開之前必須經過甲醛熏蒸消毒，確認已經有效殺滅致病性生物危險因子，并可有效控制濾器所截留的致病微生物溢出、擴散；③從生物安全柜拆卸下來的濾器，需經滅菌處理后才能作為普通廢棄物拋棄。

3.4 生物安全柜的安全使用

3.4.1 使用單位的管理層 作為使用單位的管理層首先要高度重視，購買能滿足實驗室工作需要的防護級別的生物安全柜，安裝完畢，經檢測認證，出具具有法律效力的檢測報告，以確認相關參數在正常的范圍之內，方能投入使用；制定后續定期維護檢測計劃，定期維護檢測；建立建全管理制度和操作規程；對操作人員進行培訓持證山崗。

3.4.2 操作人員 操作人員是生物安全柜發生安全事故的第一受害者，更要高度重視。持證山崗≠“安全”，定期更換過濾器≠“安全”，定期檢測仍然不能完全保證你的“安全”，只有隨時保持生物安全柜良好的性能才能真正作到“安全”。那么，怎樣才能隨時保持生物安全柜良好的性能？操作人員應作到以下幾點。

①熟練掌握生物安全柜的性能、檢修、結構原理、安全使用和檢測等方面的知識。

②掌握生物安全柜當前性能狀況，相關參數是否在正常的范圍之內；并弄清檢測項目和檢測標準依據主要指標；上次檢修、檢測時間，下次應在什么時侯檢修、檢測；主要部件（特別是過濾器）的更換的情況。對這些基本情況要了如指掌。

③每次使用前要檢查生物安全柜性能是否處于良好狀態，在確認以后才能使用，一經發現安全隱患，立即停用。

④風速、壓差和菌落總數這些指標參數都很重要。對于控制系統無測量和顯示風速功能的生物安全柜，建議配置風速儀在每次使用前進行測量；菌落總數每季度作一次檢查。

⑤請專業人員更換和維護過濾器。調整控制系統風速仍達不到技術參數時，則更換高效過濾器（一次/1～2年）；定期將粗過濾器中的濾料拆下清洗（一次/3～6個月）。定期用風速儀測量工作室的風速（一次/2個月），如不符合則調整其風速達到正常值。

[1]李勁松.生物安全柜應用指南.原理使用和驗證[M].北京：化學工業出版社，2005∶71-90.