腺苷脫氨酶的化學(xué)檢測及臨床應(yīng)用

馬永峰

腺苷脫氨酶的化學(xué)檢測及臨床應(yīng)用

馬永峰

腺苷脫氨酶(ADA)是嘌呤核苷代謝中重要的酶類，廣泛分布于人體各組織中，測定血液、體液中的ADA水平對某些疾病的診斷、鑒別診斷、治療及免疫功能的研究日趨受到臨床重視。現(xiàn)就ADA的檢測方法與臨床應(yīng)用展開綜述。

腺苷脫氨酶;肝炎;結(jié)核性胸、腹膜炎;結(jié)核性腦膜炎

1 腺苷脫氨酶(ADA)的來源與生物學(xué)功能

腺苷脫氨酶(ADA)為一種與機(jī)體細(xì)胞免疫活性有重要關(guān)系的核酸代謝酶，屬于巰基酶，每分子至少含2個活性巰基，其活性能對氯汞甲酸完全抑制［1］。其作用是催化腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)變?yōu)榇吸S嘌呤核苷，再經(jīng)核苷磷酸化酶作用生成次黃嘌呤，其代謝緩和終產(chǎn)物為尿酸。ADA廣泛分布于人體各組織中，以胸腺、脾和其他淋巴組織中含量最高，肝、肺、腎和骨胳肌等處含量較低。血清中ADA主要來源于肝臟，是反映肝損害的重要指標(biāo)之一。目前ADA檢測試劑已經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化，可應(yīng)用全自動生化分析儀進(jìn)行檢測，準(zhǔn)確快速。

2 腺苷脫氨酶(ADA)的檢測標(biāo)本與方法

2.1 檢測標(biāo)本 采集患者空腹靜脈血3 ml，分離血清，在采血過程中應(yīng)盡量避免溶血;采集患者胸腹水標(biāo)本放入抗凝管中，如有渾濁或細(xì)胞，離心取上清液;采集患者腦脊液標(biāo)本，如有渾濁或細(xì)胞，離心取上清液。

2.2 檢測儀器與試劑 我院采用全自動生化分析儀HITACHE 7600-020進(jìn)行檢測，試劑由四川邁克公司提供。

2.3 檢測原理 腺苷在ADA作用下脫氨基形成黃苷，黃苷在PNP作用下生成次黃嘌呤，次黃嘌呤在XOD作用下轉(zhuǎn)化為尿酸和過氧化氫(H2O2)，H2O2與EHSPT和4-AA在POD作用下生成醌色物，560nm處測定其吸光度，吸光度變化率與ADA活性成正比。ADA活性用U/L表示，用速率法監(jiān)測吸光度升高的速率從而計算出標(biāo)本中ADA的含量(U/L)。

3 腺苷脫氨酶(ADA)的檢測在肝臟疾病方面的臨床意義

3.1 急性肝損傷時的應(yīng)用 急性肝炎(AH)時ADA僅輕、中度升高，且陽性率明顯低于谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT);重癥肝炎發(fā)生酶膽分離時，ALT正常或輕度增高，ADA明顯升高;AH后期，ADA升高率高于ALT，其恢復(fù)正常時間與組織學(xué)恢復(fù)一致，也較ALT為遲［2］。因此，ADA更能反映急性肝臟損傷，并有助于探測AH的轉(zhuǎn)歸與進(jìn)展。ALT恢復(fù)正常而ADA持續(xù)升高者，常易復(fù)發(fā)或易遷延為慢性肝炎。

3.2 慢性肝病時的應(yīng)用 慢性肝損傷時測定ADA的價值尤為明顯。慢性肝炎(CH)、肝硬化和肝細(xì)胞癌患者血清ADA活性顯著升高，其陽性率達(dá)85%～90%。此期間ALT多正常或輕度升高，因此，同時測定ALT和ADA更具有臨床價值，可作為慢性肝病的篩選指標(biāo)，另外，失代償期肝硬化ADA活性明顯高于代償期肝硬化，因而可判斷慢性肝病的程度;慢性活動性肝炎(CAH)ADA活性明顯高于慢性非活動性肝炎(CPH)，故可用于二者的鑒別診斷。

3.3 鑒別黃疸時的應(yīng)用 阻塞性黃疸時ADA不升高，而肝細(xì)胞性黃疸時ADA活性升高，因此測定血清ADA有助于黃疸類型的鑒別診斷。

3.4 其他 阿米巴肝膿腫(ALA)時ADA活性明顯減少。

4 胸腹水腺苷脫氨酶(ADA)檢測的臨床意義

4.1 胸腹腔積液ADA活性測定，可作為鑒別結(jié)核性與癌性胸腹水的指標(biāo) 結(jié)核性胸膜炎及結(jié)核性腹膜炎患者胸腹腔積液中ADA活性明顯高于癌癥患者，且前者胸腹水ADA與血清ADA的比值大于1，所以測定胸腹水和血清ADA活性及比值是診斷結(jié)核性胸膜炎和結(jié)核性腹膜炎的一項可靠有效的指標(biāo)。

4.2 胸水ADA可作為結(jié)核性胸水療效觀察的指標(biāo) 胸腹水ADA檢測可作為結(jié)核性胸、腹膜炎治療過程中的療效觀察，隨著病情好轉(zhuǎn)，ADA活性會明顯下降。

5 腦脊液腺苷脫氨酶(ADA)檢測的臨床意義

腦脊液腺苷脫氨酶檢測可作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷和鑒別診斷的重要指標(biāo)。結(jié)核性腦膜炎顯著升高，病毒性腦膜炎不升高，顱內(nèi)腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病稍升高［3］。

6 小結(jié)

腺苷脫氨酶作為近年來各醫(yī)院檢驗科廣泛開展的項目，其測定方法靈敏度高、精密度好、結(jié)果準(zhǔn)確快速;對臨床疾病的診斷、鑒別和監(jiān)測指導(dǎo)意義明顯。但是，要注意測定ADA活性時有一定的假陰性、假陽性結(jié)果，因此，需結(jié)合臨床表現(xiàn)，影像學(xué)檢查等以準(zhǔn)確診斷。

［1］葉應(yīng)撫，王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社，2006:429-431．

［2］王靜.中國實用醫(yī)藥，2011，23:84-85．

［3］周美霞，管茶英，陳肖燕.全自動酶聯(lián)法測定腺苷脫氨酶.臨床檢驗雜志，2004，22(5):338-340．

030001解放軍二六四醫(yī)院檢驗科