EDTA-K2抗凝致血小板降低數值觀察

牛安琳

(河南省安陽市第三人民醫院檢驗科 河南安陽 455000)

乙二胺四乙酸二鉀(EDTA—K2)抗凝對血細胞形態影響很小,特別適用于全血細胞分析,根據國際血液學標準委員會(tCSH)1993年文件建議,血細胞計數宜用EDTA鹽[1]。但近年來發現EDTA-K2抗凝導致假性血小板減少臨床上并不少見,我們對此進行了研究,現匯報如下。

1 臨床資料

(1)標本來源:選取2011年1～6月門診健康體檢人員200例,其中男性110例,女性90例,年齡在22～58歲。(2)儀器:SYSMEX XE-5000血細胞分析儀,OLYMPUS顯微鏡。(3)方法:首先用常規方法檢測EDTA-k2抗凝靜脈血,按要求采集靜脈血于EDTA-K2真空抗凝管內至2mL刻度處,檢驗科收到標本后,于室溫5min內在自動旋轉式混勻器上混勻,上機檢測血小板,及EDTA-K2抗凝血標本分別放置30min、90min、2h、6h后各測定3次。同時采手指血按操作規程進行手工計數(按照全國臨床檢驗操作規程進行計數[2]),用計數池直接計數。(4)統計學方法:使用SPSS 10.0統計軟件包進行統計分析,計量資料用均數±標準差(±s)表示,采用t檢驗處理數據。

2 結果

按照檢測方法對EDTA-K2抗凝血標本進行5min、30min、90min、2h、6h檢測血小板并與手工計數標準進行對比,具體見表1。

3 討論

血小板在體內主要參與止血與血栓形成,在止血血栓的病理生理過程中起著重要的作用,血小板的數量異常或功能缺陷是出血性疾病或血栓性疾病的重要原因,因此血小板數量的檢測是臨床常用的檢驗項目之一,它的計數準確性對指導臨床診斷和治療的重要指標,臨床非常重要,是臨床上最常用的檢測項目之一[3]。EDTA抗凝原理是與血液中的凝血因子Ⅳ(鈣離子)結合成螯合物,使其失去凝血作用,從而阻止血液凝固。EDTA-K2抗凝性強,可抑制血小板原發性凝聚,使離體后的血小板離散成為單個顆粒,而對血小板計數的影響較小,有較好的穩定性[4];因其對血細胞形態影響很小,特別適用于全血細胞分析,已被ICSH認定并在臨床廣泛使用。

表1 檢測結果比較(±s)

表1 檢測結果比較(±s)

注:人工計數法與抗凝血放置5min、2h、6h血小板檢測比較,P＜0.05,有顯著差異性

計數方法 檢測值人工計數 222±54抗凝血放置時間5min 151±35 30min 218±53 90min 216±52 2h 199±46 6h 175±40

EDTA導致假性血小板減少原因很多:(1)依賴性假性血小板減少(PTCP)與血小板表面存在某種隱匿性抗原有關[4]。EDTA可引起血小板糖膜(GP)發生改變,使隱匿性抗原暴露,某些病人血漿中存在的某種自身抗體與這種抗原結合后的抗原抗體復合物激活了細胞膜中的磷酯酶,使血小板膜水解并釋放AA、ADP、5-TH、膠原、凝血酶原等血小板活性物質。從而不同程度的活化血小板纖維蛋白原受體(FIR-B),促使血小板與纖維蛋白原受體結合后聚集成團,導致血小板假性減少。(2)EDTA-K2抗凝血中,血小板黏附、圍繞于中性粒細胞(或偶爾黏附于單核細胞)的現象[5],系EDTA和白細胞表面的IgG或Fc片段相互作用、非特異性結合血小板表面的GPⅡb所致,雖與疾病和藥物無關,這些粘附、圍繞于中性粒細胞的血小板被誤計為白細胞,造成血小板假性減少EDTA—K2會使血小板形態發生變化,其外膜游離端向外伸展,從而在血小板周圍形成絲狀偽足,偽足相互纏繞形成血小板可逆性聚集,在用阻抗法做血小板計數時,聚集體所產生的脈沖大于儀器預設的血小板脈沖值,血小板不被計入其結果內,從而使血小板數量減少。在一定時間段內,隨著時間的延長,抗凝劑與血液充分溶融,松散聚集的血小板由盤狀變為球狀而逐步解聚,血小板計數逐步升高[6]。

[1]忠勇.準確計數血小板方法學研究進展[J].國外醫學·臨床生物化學與檢驗分冊,2002,23(3):132～134.

[2]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:11.

[3]叢玉隆,王昌富,樂家新.血細胞自動化分析后血涂片復審標準制定的原則與步驟[J].中華檢驗醫學雜志,2008,31(7):732～735.

[4]孫楊,丘江.抗凝劑乙二胺四乙酸致血小板假性減少[J].檢驗醫學與臨床,2008,5(8):504.

[5]傳清,吳建曾,趙錦,等.EDTA依賴性假性血小板減少癥一例[J].臨床血液學雜志,2006,19(4):246～247.

[6]施巍宇,郝婉瑩.EDTA依賴性假性血小板減少癥[J].中華檢驗醫學雜志,2004,27(10):719.