粉針無菌分裝過程中影響粉針劑質量的因素

陳娥，吳育利

(海南海藥實業發展股份有限公司，海南?？?70204)

·藥物與臨床·

粉針無菌分裝過程中影響粉針劑質量的因素

陳娥，吳育利

(海南海藥實業發展股份有限公司，海南?？?70204)

目的嚴格控制無菌分裝的整個環境過程，確保藥品產品質量。方法針對影響抗生素粉針劑質量的幾個環境因素包括壓差、溫濕度、微生物污染、塵埃粒子數、包裝材料進行實驗分析，總結這幾個因素對粉針劑質量有何影響。結果超出所規定的指標的各環境因素都會導致粉針半成品、成品質量檢測不合格。結論應該嚴格控制各項規定指標，使其符合GMP要求。

粉針劑；壓差；溫濕度；微生物污染；包裝材料

注射用無菌粉末又稱粉針。臨床前用滅菌注射用水溶解后注射，是一種較常用的注射劑，適用于在水中不穩定的藥物，特別是對濕熱敏感的抗生素及生物技術藥物，本實驗以注射用頭孢西丁鈉為例。

1 粉針質量的環境因素分析

1.1 壓差、溫濕度、微生物污染、塵埃粒子、包裝材料對粉針的影響在亞潔凈狀態下做10批小樣對注射用頭孢西丁鈉粉針成品進行考察，見表1。從表1中可看出所列舉的5個環境因素對粉針質量都有影響，在亞潔凈狀態下做的10批小樣不合格率都超過了10%，檢測各因素對粉針質量到底有何影響，將做如下的實驗進行具體分析。

表1 影響粉針成品不合格因素統計表

2 壓差對粉針質量的影響

2.1 儀器與試劑微壓差表，GWF-5J微粒分析儀；注射用頭孢西丁鈉，硫酸肼，烏洛托品。

2.2 方法

2.2.1 標準溶液的配制稱取硫酸肼1.00 g，置于100 ml量瓶中，加水適量使溶解，并用水稀釋至刻度，搖勻，放置4～6 h；取此溶液與等容量的10%烏洛托品溶液混合，搖勻，于25℃避光靜置24 h，取該溶液15.0 ml放100 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，見表2。

表2 標準溶液的配制(ml)

2.2.2 壓差對粉針成品相關檢測結果的影響在風量測定之后，將待測區域的所有門都關閉并開啟房間中的排風機或除塵機，通過墻壁上安裝的微壓差表讀出房間之間的壓差，然后再通過5次風速、風量的改變再重新測定壓差，將5次不同壓差條件下生產的粉針小樣進行溶液澄清度、可見異物和成品不容性微粒檢測[1]，結果見表3。從以上6組數據可看出壓差處于5.2 Pa以上的各項相關檢測均符合國家藥典標準，壓差在5.2 Pa以下的成品質量不合格。

表3 壓差對粉針成品相關檢測結果的影響

3 溫濕度對粉針質量的影響

3.1 儀器與試劑儀器：濕度計、溫度計；試劑：注射用頭孢西丁鈉。

3.2 方法通過空調系統調整潔凈室內溫度，將在不同溫度下生產的粉針小樣作澄清度與粉末色澤檢查，結果見表4。通過車間空調凈化系統在潔凈生產區進行6次調整，在風量、風壓調整后，在待測的房間有代表性的工作區或中心點，用濕度計讀出室內相對濕度值，然后在6次不同濕度條件下，按照我國醫藥工業潔凈室(區)浮游菌的測試方法GB/ T16293-1996、醫藥工業潔凈室(區)沉降菌的測試方法GB/T16294-1996規定的方法測定。分別取膠塞、西林瓶(10 ml)5個按干燥失重法進行檢查[2]，結果見表5。分裝半成品澄清度：溶液應澄清，如混濁，應小于1號標準濁度液。由實驗數據可看出，溫度為28℃以上時粉針半成品溶液澄清度已經大于1號標準濁度液，粉末色澤開始變黃；相對濕度為65%時，沉降菌已超出標準，膠塞、西林瓶水份及成品外觀檢測均不合格；溫度28℃以下，相對濕度為65%下時，成品檢測均合格。

表4 潔凈室溫度變化對粉針的影響

表5 潔凈室(區)相對濕度對粉針的影響

4 微生物污染對粉針質量的影響

4.1 培養基無菌性實驗材料：TSB/SCDM培養基(即胰酶咯胨大豆培養基)、西林瓶。方法：將滅菌后的TSB/SCDM培養基分裝于50支西林瓶中，蓋塞、封口后在30℃～35℃恒溫培養一周。結果：西林瓶TSB/SCDM培養基中無任何微生物生長，可用于培養基模擬粉針分裝試驗。

4.2 培養基模擬粉針分裝試驗為了使模擬分裝試驗結果與實際生產狀況更接近，將模擬分裝試驗的時間選擇在一次正常的批分裝生產后、區域熏蒸消毒之前。材料：乳糖(作模擬分裝用無菌粉末)、TSB/ SCDM培養基(經無菌性試驗檢驗合格)、10 ml注射器、西林瓶、分裝樣品3 000瓶。方法：將1.0 g乳糖分裝到無菌西林瓶中，在用注射器將TSB/SCDM培養基8 ml注入瓶中，蓋膠塞，封鋁蓋，在30℃～35℃恒溫下進行微生物培養一周。結果及計算：在實際工作中可根據模擬分裝中發現的污染瓶數、95%可信限控制上限進行計算，見表6。根據統計學概率計算方法，污染率計算公式為[3]：污染率%＝(95%可信限的控制上限/模擬分裝的瓶數)×100%經檢驗，此次模擬分裝實驗污染瓶數為1，查表得95%可信限的控制上限為4.743 9，因此(4.743 9/3 000)×100%＝0.16%＞0.1%。

4.3 結論此次模擬分裝并不符合污染率的可接受標準，證明微生物污染水平已超標，則應立即停止生產，對潔凈室進行消毒滅菌。

表6 模擬分裝污染瓶數、95%可信限控制上限、至少分裝的瓶數的關系

5 塵埃粒子對粉針質量的影響

將在某一萬級潔凈生產區內在六次不同狀態下測定塵埃粒子粒數[4]，然后將6種不同狀態下的小樣成品、半成品作抽樣檢查。

5.1 儀器與試劑塵埃粒子計數器試劑：注射用頭孢西丁鈉(1 g/瓶)、1號液、2號液。

5.2 方法在某一潔凈室內，靜態。潔凈室溫度為25℃，潔凈室級別為萬級，相對溫度為47%，靜壓差為14 Pa下進行檢測塵埃粒子對粉針的影響。結果見表7。

表7 不同塵埃粒子數時粉針相關檢測結果

5.3 結論當≥0.5 μm的塵埃粒子個數達到286 902個/m3時，出現西林瓶可見異物檢測不合格，而當≥0.5 μm和≥5 μm的粒子都超出檢測標準時，成品質量都不合格。

6 包裝材料對粉針質量的影響

用天然膠塞、丁基膠塞作為瓶塞對頭孢西丁鈉等4種抗生素粉針劑質量的影響進行了研究。

6.1 膠塞的透氣性對粉針劑質量的影響[5-6]注射用粉末多采用天然橡膠塞，如果膠塞不緊則水分透過膠塞，而導致產品吸潮變質。近年來，人工合成的丁基膠塞開始在市場出現，其透氣性比天然橡膠塞小十幾倍。實驗在相同條件下，不同種膠塞密封性不同對粉針劑質量的影響；用同一條件下洗滌、干燥滅菌的西林瓶，分裝同一批注射用頭孢西丁鈉，再分別蓋上丁基膠塞、天然膠塞壓蓋后不封蠟，放置在溫度40℃，相對濕度為75%～90%的環境中進行對比實驗，結果見表8。在相同條件下生產和貯存的粉針劑，使用天然膠塞的粉針劑外觀、水分、色級及含量四項指標遠遠低于使用丁基膠塞的粉針劑，所以現在一些廠家已用丁基膠塞代替天然橡膠塞。

表8 不同膠塞對粉針質量的影響

6.2 膠塞、瓶子所含的水分程度對粉針劑質量的影響以10批理化性質較穩定的天然膠塞做實驗，測其吸水性，測試情況見表9。由表9對比分析，天然膠塞的吸水率明顯高于丁基膠塞，抗生素鈉鹽與鉀鹽均有吸濕性，入水后致使藥品失效，因此天然膠塞對粉針嚴密性有很大影響，以丁基膠塞替代天然膠塞已成為迫在眉睫的問題。

表9 丁基膠塞和天然膠塞吸水率情況統計表(%)

6.3 壓蓋及封蠟嚴密性對粉針劑質量的影響取相同條件下分裝的80萬U注射用抗生素鈉為樣品，分鋁蓋不松動沾蠟、鋁蓋松動沾蠟、鋁蓋不松動不沾蠟、鋁蓋松動不沾蠟4種情況進行考察(都使用天然膠塞)，每種情況取300支，放置在溫度40℃，相對濕度75%～90%的環境中，保存6個月，結果見表10。由表10可以看出，樣品在高溫、高濕的實驗條件下貯存6個月，壓蓋及沾蠟嚴密度對粉針劑質量有很大影響，鋁蓋松動及不沾蠟(在生產過程中主要表現為漏蠟)都會引起粉針劑的結塊、變黃，并且使用天然膠塞時，不沾蠟比鋁蓋松動對粉針劑質量的影響更大。

表10 壓蓋及粘蠟嚴密度對粉針劑質量的影響

7 討論

潔凈室內相鄰不同的房間內都存在壓差，因為壓差隔離是防止潔凈室內受到污染的一個重要手段，人員與物品的流動都會造成污染。根據GMP規定，相鄰不同級別房間的壓差絕對值應大于等于5 Pa(0.5 mm水柱)，由實驗看出，壓差大于5 Pa時，相關檢測都符合中國藥典規定，但壓差＜6 Pa時，超出了本廠內控標準(≥10 μm的粒子應≥2 000個，≥25 μm的粒子應少于等于200個)，所以為了提高粉針的質量，壓差維持在6.0 Pa以上能較好的控制成品的不溶性微粒。

無菌室溫度、濕度的控制不僅應考慮防止微生物的生長，而且還應慮無菌室內操作者工作條件的舒適狀況等。由實驗結果可知，溫度過高藥粉容易變黃，稀釋后溶液混濁，且人體易感悶熱，出汗，造成環境的污染。溫度過低人體易感寒冷。潔凈室相對濕度(HR)的高低同樣對藥品與人體兩方面都有影響，過低易產生靜電，人體舒適感差；過高易長菌。所以，根據我國實際，冬夏溫、濕度要求都應降低，全年溫、濕度應在18℃～26℃與45%～60%范圍內變化較合適，確保符合GMP要求。

評價無菌模擬分裝試驗結果的主要指標之一就是微生物污染水平，發達國家GMP一般明確要求控制生產各步的微生物污染水平，尤其對無菌制劑，產品最終滅菌或除菌過濾前的微生物水平必須嚴格控制。而微生物的特點是在一定的環境條件下會迅速繁殖，數量急劇增加，而且空氣中存在的微生物能通過各種途徑污染已清潔的設備。因此，為防止污染或降低污染發生的概率，在無菌室設計時應該注意提供方便有效的無菌室消毒條件，而且每個無菌粉針劑生產企業均應指定其無菌模擬分裝驗證制度，以保證無菌粉針劑分裝工藝過程符合無菌粉針劑分裝要求。

潔凈室塵埃粒子數的多少對粉針成品不溶性微粒檢測結果有很大的影響，人員的數量、動作幅度、走路的快慢等都會影響潔凈室的塵埃粒子數，因此，潔凈室應控制熱源數量，且操作熱源的動作應緩慢、平穩，應盡量避免不必的動作，減少產塵量。

在粉針生產過程中，膠塞的吸濕性及透氣性、壓蓋及沾蠟的嚴密度對粉針劑質量的影響非常大，是引起粉針劑在有效期內結塊、變黃的主要因素。如膠塞.瓶子水分偏高，其直接接觸藥粉而吸潮結塊，一般生產條件，應控制膠塞水分≤0.05%，瓶子水分≤0.5 mg/只，另外包裝加紙盒，以保證藥品質量。因此，為了保證產品質量，保證人民用藥安全，我們必須嚴格控制生產過程中對產品質量有影響的各種因素。為了減少粉針劑有效期內結塊、變黃情況的發生，應保證生產中使用的膠塞彈性好，膠塞與西林瓶密封嚴，鋁蓋不松動，封蠟均勻、嚴密。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[Z].北京：化學工業出版社.2005

[2]國家醫藥管理局推行GMP,GSP委員會.藥品生產驗證指南[M].北京：中國醫藥科技出版社.2003

[3]張宏吉,張明賢.制藥設備與工程設計[M].北京：化學工業出版社,2004：6

[4]杜濱,董艷峰.潔凈室內塵埃粒子的影響因素[J].黑龍江醫藥, 2004,17(1)：31-32

[5]唐杰.抗生素粉針質量影響因素及解決辦法[J].中國藥業, 1999,8(4)：40.

[6]嚴幼達,顧惠敏.膠塞對抗生素粉針劑質量的影響[J].中國醫藥工業雜志,2003,34(4)：190-191

R944.1+1

B

1003—6350（2012）18—086—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.18.041

2012-06-26)

陳娥(1964—)，女，海南省東方市人，制藥工程師，本科。