注射用凱西萊在不同輸液中穩定性研究＊

楊 輝，覃志高，陳建琴，莫 迎 ，許凱柔

(1.廣西壯族自治區南寧食品藥品檢驗所，廣西 南寧 530001;2.廣西中醫學院2006級實習生，廣西 南寧 530001)

凱西萊(tiopronin)化學名為N－(2－巰基丙酰基)－甘氨酸，為20世紀60年代日本研制的一種甘氨酸衍生物，其側鏈上的游離巰基被認為是人體新陳代謝的保護劑[1]。1998年在我國上市，主要作為化療及放療保護劑、保肝劑及重金屬解毒劑應用于臨床。隨著其臨床的廣泛應用，不良反應的報道也逐漸增多，國內報道的不良反應發生率為3.5% ～17%[2]，目前，其不良反應機理尚不清楚。本試驗旨在通過考察凱西萊與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液及氯化鈉注射液配伍后，在各時間點對其外觀、pH、不溶性微粒數及含量等變化情況進行分析，從藥品質量方面評價凱西萊與不良反應發生的關系，為規范臨床操作及保證臨床安全用藥提供依據。

1 儀器與試藥

LC－20AB型高效液相色譜儀(日本島津公司);威瑪色譜數據工作站;AE240電子天平(梅特勒－托利多儀器＜上海＞有限公司;FE20實驗室pH計(梅特勒－托利多儀器＜上海＞有限公司;ZWF－J6型激光注射劑微粒分析儀(天津天河醫療儀器有限公司);HH－S6型數顯恒溫水浴鍋(金壇市醫療儀器廠)。注射用凱西萊及專用溶劑(河南省新誼藥業股份有限公司，規格為0.1 g/支，批號為091103－2);5%碳酸氫鈉注射液(河南省新誼藥業股份有限公司，規格為2 mL/支，pH=8.5，批號為090808);5%葡萄糖注射液(安徽豐原藥業股份有限公司，規格為100 mL∶5 g，批號為090425134)、10%葡萄糖注射液(廣西南寧百會藥業集團有限公司，規格為100 mL∶10 g，批號為0908002);氯化鈉注射液(廣西科宏藥業有限公司，規格為500mL∶4.5g，批號為09092703);甲醇為色譜純，高純水。

2 方法與結果

2.1 樣品溶液配制

為便于比較，按注射用凱西萊使用說明書要求，均配制為每250 mL含0.1 g的臨床常用質量濃度。取注射用凱西萊3支，分別加入隨藥附帶的專用溶劑(5%碳酸氫鈉注射液，pH=8.5)2 mL溶解，然后分別加入到250 mL的5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液中，充分搖勻，經微孔濾膜(0.45 μm)過濾后制成A，B，C配伍溶液，備用。

2.2 外觀觀察

分別取在 10，15，20，25，30，35，40 ℃條件下配制的配伍溶液A，B，C 適量，以配伍的相應溶劑為空白溶液，分別于 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 時觀察其外觀。結果配伍、空白溶液均透明澄清、無顏色變化、無沉淀、無氣體生成。

2.3 不溶性微粒測定

分別取在 10，15，20，25，30，35，40 ℃條件下配制的配伍溶液A，B，C 適量，以配伍的相應溶劑為空白溶液，分別于 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 時取各空白、配伍溶液，翻轉 20 次，使溶液混勻，立即小心開啟容器，先倒出部分供試液沖洗開啟口及取樣杯，將供試液倒入取樣瓶中，超聲處理(80～120 W)30 s脫氣或靜置于取樣器中，依法測定[3]。結果配伍液放置不同時間、溫度與空白溶液不溶性微粒無顯著性差異。

2.4 pH 測定

取5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液及配伍溶液 A，B，C 適量，在 10，20，30，40 ℃條件下，測定各自在 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 時的 pH。結果見表 1，配伍溶液的 pH隨著時間、溫度的升高逐漸增大。

表1 配伍溶液放置不同時間、不同溫度對pH值的影響(n=3)

2.5 含量測定

鄒雪等[4]的研究表明，用高效液相色譜法測定注射用凱西萊中的凱西萊，質量濃度線性范圍在0.1～1.0 mg/mL。而本研究僅考察凱西萊在不同溶劑的含量隨著時間、溫度而變化的情況，故試驗擬訂開始時的含量為100%，而后各時間點的峰面積與該點峰面積的比值即得出各時間點樣品溶液中凱西萊的相對百分含量。

色譜條件:色譜柱為 Phenomenex C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm);流動相為甲醇 － 水(5 ∶95)，用磷酸調 pH 至 2.5;柱溫30 ℃;檢測波長 205 nm;流速 1.0 mL/min;進樣量 20 μL。理論板數按凱西萊峰計算應不低于2 000。

測定:取配伍溶液 A，B，C 適量，在 10，15，20，25，30，35，40 ℃條件下，測定各自在 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 時的峰面積。結果見表2。配伍溶液A，B，C中凱西萊在不同溶劑、同一檢測點，隨著時間延長和溫度升高，其含量發生顯著變化，表明注射用凱西萊隨著溫度的升高和時間的延長水解或氧化反應越嚴重。

3 討論

由試驗結果可知，臨床采用5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液配伍溶劑對凱西萊進行配伍擴容，在相同條件下，其配伍溶液之間的外觀、不溶性微粒、pH及含量等均無顯著性差異，說明臨床采用5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液配伍溶劑是合理可靠的。

凱西萊含有巰基、羧基，為酸性化合物，較容易被氧化[5]。在臨床應用上，其治療方案也復雜繁多，對于藥物穩定性的研究一般限于6 h或8 h內，但因為凱西萊的療程往往有4周，時常會出現先滴注用凱西萊配伍溶液一段時間，然后換成其他輸液，最后再換回注射用凱西萊配伍溶液的治療方案，大大延長了注射用凱西萊配伍溶液的使用時間，有時甚至超過12 h，故本次研究時間設為12 h。從表2可以看出，隨著配伍后存放時間的延長，配伍液中凱西萊的含量明顯下降。筆者認為，導致凱西萊含量迅速降低的原因，可能與該藥發生水解或氧化反應有關，反應所生成的物質化學結構不明，在本試驗條件下并未檢測到雜質峰。但從凱西萊結構分析，其分解產物可能是小分子的物質。因此，配伍溶液在放置不同溫度和時間后在外觀上無明顯改變，不溶性微粒數也未見明顯增加。試驗結果顯示，凱西萊與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液配伍后存在一定的不穩定性，提示臨床使用該藥時，應現配現用，最好控制在1 h內滴完。同時建議，國家食品藥品監督管理部門對現行的藥品使用說明書重新考察和修訂，對配伍溶液的使用時間加以警示，給予規范，以確保臨床用藥的安全、有效。

表2 配伍溶液放置不同時間和溫度對凱西萊含量的影響(相對百分含量，%)

本次研究設置了不同的溫度點進行考察，根據化學反應的有關反應速度原理[6]，溫度每升高10℃，反應速度則增加2～4倍。從表3看，隨著溫度升高，注射用凱西萊配伍溶液的氧化分解速度會進一步增大，并在試驗中得以證實。提示臨床使用時，應注意環境溫度的影響，在溫度較高的地區和季節，配伍溶液的使用時間的控制就顯得更為重要。

綜上所述，凱西萊與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液配伍后，隨著放置時間的延長，溫度的升高，含量迅速下降，導致藥物療效降低，發生不良反應的概率增大，試驗結果對臨床安全合理使用凱西萊具有一定的參考價值。

[1]徐立新，凌勇武.凱西萊治療乙型肝炎肝硬化臨床療效觀察[J].交通醫學，2002，16(6):624－625.

[2]丁小麗，雷招寶.硫普羅寧致過敏性休克38例文獻分析[J].藥物不良反應雜志，2005，7(5):336－339.

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[4]鄒 雪，羅 娟.HPLC法測定注射用硫普羅寧中硫普羅寧的含量[J].中國藥師，2006，9(4):383 －384.

[5]黃 靜，尹燕杰，黃海偉，等.HPLC測定硫普羅寧注射液含量及其有關物質[J].中國藥學雜志，2009，44(14):1 108 －1 111.

[6]劉幸平.物理化學[M].北京:中國中醫藥出版社，2008:172.