尿液有形成分定量分析方法學(xué)探討

張秋菊 賈莉婷 王丹

尿液有形成分分析是尿液常規(guī)檢查中的重要組成部分，是臨床診斷疾病和病程評估的重要依據(jù)。隨著科技的發(fā)展，尿液有形成分分析的檢測水平不斷提高。在實踐中，不同的檢測方法在識別和計數(shù)各種有形成分時與標準方法的測定結(jié)果存在一定差異。筆者采用AVE-763B、UF-1000i、不離心鏡檢法3種方法對不同尿液標本進行檢測，比對這兩種機器性能，探討差異的原因，尋找更準確方法。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇門診及住院患者324人份新鮮尿液標本(經(jīng)人工顯微鏡確定挑選異常標為主)。

1.2 方法 采用AVE-763B全自動尿有形成分分析儀、UF-1000i全自動尿沉渣分析儀、KOVA尿液定量計數(shù)板鏡檢法，分別測定尿液中有形成分(紅細胞、白細胞、管型)。患者留取晨尿，留取標本前清洗尿道口，采集后2 h內(nèi)完成檢測。儀器法測定，嚴格按儀器說明書操作步驟進行操作。

1.3 參考范圍依據(jù) UF-1000i參考范圍：紅細胞≤28個/μl，白細胞≤28個/μl。AVE-763B參考范圍：紅細胞≤7個/μl，白細胞≤14個/μl。不離心鏡檢法：紅細胞≤7個/μl，白細胞≤14個/μl。考慮目前尿液有形成分沒有統(tǒng)一定量參考范圍，本實驗以全國6個城市(北京、長沙、南昌、武漢、杭州、西安)的9家醫(yī)院對健康人群調(diào)查所得尿液有形成分參考范圍為依據(jù)[1]。

2 結(jié)果

通過AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀、UF-1000i全自動尿沉渣分析儀、不離心定量計數(shù)板鏡檢法3種方法對324例尿液標本測定，結(jié)果以不離心鏡檢法為金標準進行統(tǒng)計。見表1、表2。

表1 白細胞對照結(jié)果分析表 例

表2 紅細胞對照結(jié)果分析表 例

對白細胞AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀與不離心鏡檢法的符合率為94.75%，UF-1000i與其符合率為89.81%。對紅細胞AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀與不離心鏡檢法的符合率為90.12%，UF-1000i與其符合率79.32%。

3 討論

尿液有形成分分析是尿液分析中不可缺少的重要內(nèi)容。尿液分析對泌尿系統(tǒng)疾病、腎臟疾病、循環(huán)系統(tǒng)疾病及感染性疾病等有重要的診斷及鑒別診斷意義，也是臨床用藥檢測、健康普查的一項重要手段。

3.1 對尿液中紅細胞的鑒別 對紅細胞AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀與不離心鏡檢法的符合率為90.12%，UF-1000i 與其符合率為79.32%。其中不離心鏡檢為陽性而UF-1000i陰性的有27例，AVE-763B陰性10例，有10例UF-1000i測定結(jié)果與AVE-763B、不離心鏡檢法檢測結(jié)果相差顯著，筆者認為尿液中紅細胞有多種形態(tài)，特別是腎性紅細胞，可呈環(huán)形、盔形、橢圓形、多邊形、芽胞形、小型固縮形等多種形態(tài)，增加了儀器判讀鑒別的難度。有文獻報道制備紅細胞懸液進行對比分析符合率較高[2]，筆者認為因制備紅細胞形態(tài)接近正常，易于機器辨認。

3.2 尿液中白細胞的鑒別 對白細胞AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀與不離心鏡檢法的符合率為94.75%，UF-1000i與其符合率為89.81%。在尿液中，白細胞形態(tài)變化受尿液滲透壓和酸堿度的影響較大，由于炎癥程度的加重發(fā)生變性而出現(xiàn)形態(tài)改變，內(nèi)部結(jié)構(gòu)崩解，體積膨脹，邊緣不清，白細胞常聚集成團，稱濃細胞，再加上小圓上皮細胞和逆行上皮細胞體積與膨脹變性的白細胞在顯微鏡下的形態(tài)特點非常相近，故儀器容易誤判。

3.3 尿液中管型的鑒別 對分析的324例尿液標本，AVE-763B經(jīng)“人工輔判”后檢測出管型11例，UF-1000i檢測出管型65例，不離心鏡檢法檢測出管型10例。UF-1000i對管型的測定假陽性率高，測定結(jié)果也明顯高于不離心鏡檢法，實際臨床檢驗工作中發(fā)現(xiàn)黏液絲，上皮細胞對管型檢測結(jié)果有明顯干擾[3]。而AVE-763B經(jīng)人工輔判后和不離心鏡檢法比較接近。

3.4 顯微鏡檢測技術(shù) 尿液中紅細胞、白細胞的顯微鏡檢測技術(shù)，目前國內(nèi)外尚無統(tǒng)一標準，主要有離心鏡檢、不離心鏡檢及倒置顯微鏡鏡檢法。有文獻報道，不離心鏡檢法直接計數(shù)尿紅細胞、白細胞，能較真實地反映尿中紅細胞、白細胞濃度，接近真值[4]。

3.5 AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀、全自動尿沉渣分析儀UF-1000i檢測原理 全自動尿沉渣分析儀UF-1000i檢測原理是對尿液標本染色后，利用流式技術(shù)和電阻抗原理，以熒光、散射光和電阻抗的信號技術(shù)識別計數(shù)紅細胞、白細胞、上皮細胞、細菌、結(jié)晶等[5]，由于尿液有形成分復(fù)雜，有時受干擾物質(zhì)影響會產(chǎn)生假陽性或假陰性。AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀利用“機器視覺”技術(shù)，實現(xiàn)顯微鏡檢識別全自動化。通過攝像頭自動地在低倍鏡下對大量的尿液標本中各種有形成分進行掃描，計算機自動準確定位后，再在高倍鏡下對所采集的有形成分圖像進行分析、處理、并與已建立的各種有形成分的模型數(shù)據(jù)庫進行對比分析，計數(shù)紅細胞、白細胞、結(jié)晶等定量結(jié)果[6]。對分析的324例尿液標本，UF-1000i有11例(紅細胞9例，白細胞2例)測定結(jié)果明顯高于不離心鏡檢法。鏡檢確認由草酸鈣結(jié)晶、非晶型鹽類結(jié)晶、真菌、精子、細菌等因素引起。AVE-763B有7例因結(jié)晶、真菌、精子、黏液絲等因素影響細胞計數(shù)結(jié)果，可通過軟件“人工輔判”功能直接對圖像分析進行審核報告，糾正不必要的錯誤信息。對細胞濃度過高的標本，如肉眼血尿和膿血尿，AVE-763B、UF-1000i測定結(jié)果與不離心鏡檢法計數(shù)結(jié)果相差較大(儀器測定值比鏡檢法要低)，應(yīng)將標本稀釋后再進行檢測。

綜上所述，經(jīng)“人工輔判”AVE-763B測定白細胞、紅細胞、管型與不離心鏡檢法的檢測結(jié)果優(yōu)于其他類型儀器。還應(yīng)指出，鏡檢是形態(tài)學(xué)檢查的金標準，儀器分析細胞仍存在許多局限性。在產(chǎn)生疑問時，仍需顯微鏡檢確診，決不能不加分析作為確診依據(jù)。

[1] 叢玉隆，馬駿龍，岳秀玲，等.中國健康人群尿液顯微鏡檢測法有形成分結(jié)果調(diào)查[J].臨床檢驗雜志，2006，24(2)：81-84.

[2] 叢玉隆，馬俊龍，張時民，等.尿液細胞成分定量分析方法學(xué)研究[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，29(3):211-214.

[3] 郭慧，王萍等.干化學(xué)法UF-1000i尿沉渣分析儀檢測結(jié)果與手工法檢查的一致性觀察[J].實用醫(yī)技雜志，2011，18(2):168-169.

[4] 叢玉隆，馬駿龍.尿沉渣測定四種方法參考值范圍調(diào)查[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，1997，20(4):229-231.

[5] 張時民.實用尿液有形成分分析技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:148-151.

[6] 叢玉隆.現(xiàn)代尿液分析技術(shù)與臨床[M].北京:人民軍醫(yī)出版社，2007:162-164.