亞洲前列腺癌患者維生素D受體基因TaqI多態性的Meta分析

侯 祺 李夏西 申 健 彭俊銘 劉希哲 羅榮城 鄭少斌

(南方醫科大學南方醫院泌尿外科，廣東 廣州 510515)

前列腺癌多發生于50歲以上男性。研究提示，前列腺癌與環境、種族、基因、激素及飲食習慣等多因素有關〔1〕。對前列腺癌患者流行病學研究表明，前列腺癌發生率與體內維生素D濃度有關，而位于細胞核內的維生素D受體(VDR)介導了維生素D對前列腺細胞生長、分化的作用〔2〕。VDR基因TaqI位點(rs731236)較早被發現，因其可影響VDR基因的轉錄、翻譯而被廣泛研究。由于種族、地域等差異，國內外關于TaqI位點與前列腺癌關系的研究存在爭議。為了全面評價亞洲人群TaqI位點多態性與前列腺癌易感性的關系，本文綜合既往相關研究進行Meta分析。

1 資料與方法

1.1 檢索策略 檢索 Pubmed、EMBase、CBM、CNKI、VIP、萬方數據平臺，并追溯所有初步納入文獻的參考文獻。搜索年限從建庫到2011年6月1日。英文搜索策略為(“single nucleotide polymorphism”OR SNP OR polymorphism OR“genetic variation”OR“genetic variant”OR mut*OR“Polymorphism，Single Nucleotide”〔MeSH〕)AND(“prostate cancer”OR“prostate carcinoma”OR“Prostatic Neoplasms”〔MeSH〕)AND(“vitamin D”OR VDR OR“vitamin d”［MeSH〕OR“ergocalciferols”〔MeSH〕)。中文搜索策略:(前列腺癌 OR前列腺腫瘤)AND(基因多態性OR多態性OR SNP)AND(維生素D OR VDR)。手工檢索相關雜志、會議論文、學位論文、科技報告。逐一閱讀以亞洲人群為試驗對象的有關TaqI位點多態性的文獻。

1.2 文獻納入和排除標準 納入標準:①國內外公開發表的研究維生素D受體位點TaqI多態性與前列腺癌易感性的相關臨床對照研究，研究設計科學，研究對象有基本構成資料，語言不限;②文獻給出病例組及對照組各多態性基因型頻率;③病例組病理學確診為前列腺癌;④對照組為年齡配對、無泌尿系癥狀的健康人群;⑤病例組與對照組人群基因頻率符合Hardy-Weinberg遺傳平衡。排除標準:①重復發表的文獻;②對照組人群來源不清，特別是患前列腺增生、前列腺炎等患者;③只分析基因的雜合性，未給出多態性基因頻率;④非臨床對照研究。

1.3 數據提取 由第一、第二作者獨立閱讀文題、摘要，對可能符合納入標準的試驗進一步閱讀全文，對納入有矛盾的試驗由第三作者與前二位作者共同討論決定。從每個納入的文獻中提取以下數據:第一作者、出版年份、對象人群、檢測方法、病例組和對照組基因型頻率。

1.4 統計學分析 采用RevMan5.0.0進行Meta分析，Stata11.0軟件進行Egger和Begg檢驗。各研究的異質性由Q檢驗和I2值評價。如I2＜50%，選用固定效應模型進行Meta分析;如I2＞50%，則采用隨機效應模型。Egger檢驗和Begg檢驗評價發表偏倚。

2 結果

2.1 文獻檢索結果 共檢索到英文文獻98篇、中文文獻8篇(截至2011年5月20日)，逐一閱讀全文篩選與VDR TaqI位點有關文獻，最后共納入7篇，文獻的基本特征見表1，試驗設計均為病例對照研究，累計樣本量為1 766例，其中病例組801例，對照組965例。

表1 納入文獻的基本特征(n)

2.2 Meta分析結果 等位基因T對t(圖1)、基因型TT/Tt對tt(圖2)、TT 對 Tt/tt(圖3)，各基因型 TT、Tt、tt之間與前列腺癌易感性的OR值(表2)。Meta分析顯示，納入的7篇文獻研究間未見明顯異質性(Q=5.06，P=0.54，I2=0%)，故采用倒方差法為各獨立研究賦予權重并進行合并。固定效應模型未見等位基因T對t的與前列腺癌易感性有顯著性關聯(OR=1.16，95%CI=0.93 ～1.46，P=0.19)。基因型 TT/Tt對 tt、TT對Tt/tt各合并OR值均大于1，但95%可信區間(CI)包含1，且P＞0.05，表明亞洲人群前列腺癌發病與TaqI的等位基因T與t，基因型TT、Tt與tt均無顯著性關聯。

2.3 發表偏倚評估 采用Egger檢驗和Begg檢驗分別評價入選7個試驗的發表偏倚(圖4，圖5)。在Egger法回歸分析中，截距為－0.76，P＞|t|指標為0.479;且由圖4可見，7個點分布均勻對稱，未見明顯發表偏倚。Begg檢驗顯示 Pr＞|z|=0.548，且圖5點分布對稱，同樣未見明顯發表偏倚。

表2 TaqI多態性與前列腺癌易感性的Meta分析結果匯總

圖1 等位基因T對t的森林圖

圖2 基因型TT/Tt對tt的森林圖

圖3 基因型TT對Tt/tt的森林圖

圖4 Egger發表偏倚評價圖

圖5 Begg發表偏倚評價圖

3 討論

前列腺癌是由遺傳和環境等多因素共同致病的復雜疾病。流行病學研究顯示，維生素D〔1，25(OH)2D3〕缺乏可增加前列腺癌的發生率〔10〕。臨床上也有報道將活性維生素D作為預防前列腺癌復發的輔助治療〔11〕。進一步離體實驗表明維生素D及其類似物能抑制前列腺細胞生長、分化〔2〕。VDR蛋白在健康前列腺細胞和前列腺癌細胞中都有表達，作為甾體激素受體超家族成員介導了1，25(OH)2D3的抗腫瘤作用。VDR蛋白與1，25(OH)2D3結合形成異二聚體，與VDR基因反應原件(react element)一起調節 p21、p27、c-fos、c-myc 等基因的轉錄〔12〕。多態性位點 TaqI位于染色體12q13，VDR基因第9號外顯子，多態性變化介導同義突變，導致該多態性影響了VDR蛋白轉錄效率〔13〕和mRNA的穩定性〔14〕，由此改變前列腺癌易感性。

前列腺癌的生物學行為極其復雜，發生率在不同種族和地區差異很大。1996年Taylor等〔15〕最早對258例美國白人(96例前列腺癌和162例健康對照)VDR TaqI位點多態性研究發現，基因型tt相較TT/Tt攜帶者不易患前列腺癌(OR=0.32，95%CI=0.15～0.75，P＜0.01)。但2006年 Andersson等〔16〕的研究得出不同結果，通過檢測瑞典人(137例前列腺癌和176例健康對照)VDR TaqI位點多態性與前列腺癌易感性發現兩者并不存在顯著關聯。最近Bonilla等〔17〕運用全基因組SNP芯片檢測的方法，研究550例非裔美國人(253例前列腺癌和297例健康對照)基因多態性與前列腺癌易感性的關系發現，VDR TaqI等位基因t是前列腺癌發生的臨界危險因素(OR=1.3，95%CI=1.0～1.8，P=0.04)。前列腺癌易感性與TaqI位點多態性的關系在亞洲人群中研究較少，由于亞洲人群均由黃種人(蒙古人)構成，具有人種、地域和基因頻率的特殊性。開發具有亞洲人群特異性的前列腺癌基因標記物，對腫瘤個體化診斷和治療有重大研究前景。本研究雖未發現TaqI位點與前列腺癌的相關性，但VDR調控機制復雜，目前尚未完全清楚。VDR基因多態性僅是調控VDR的一個因素，而VDR基因多態性并不取決于單個位點的多態性，TaqI位點仍可通過連鎖不平衡影響其他位點多態性對VDR基因的表達和功能〔15〕，推測TaqI位點與其他位點多態性可共同對VDR的發揮復雜網絡調控作用。故下一步的研究可定為于TaqI位點和其他位點多態性共同作用與前列腺癌易感性之間的關聯。

既往的研究對TaqI與前列腺癌是否相關仍有爭論，本研究利用系統評價方法，通過搜集既往同類型研究，根據研究可靠性賦予不同權重，定量合并效應值，達到類似于多中心、大樣本臨床對照試驗的效果，得出更科學、可靠的結論。但本研究的Meta分析也存在眾多限制。在搜集同類型的獨立研究過程中，不能得到每個研究對象的確切資料(紫外線暴露劑量、用藥情況、維生素D攝入劑量及飲食習慣)，影響對前列腺癌與各因素關系的深入挖掘，并限制異質性來源的分析;發表偏倚也需要特別關注，由于研究者往往傾向發表有顯著性結論的研究，導致Meta分析得出不真實的結論。本研究雖經Egger和Begg檢驗未發現明顯發表偏倚，但考慮到納入試驗數較少，發表偏倚仍存在;另外納入文獻的質量和真實程度也影響Meta分析最終的結果。本研究雖未得出TaqI與前列腺相關性的結論，但考慮到樣本量和調控機制問題，更確切的結論有待進一步研究說明。

1 Schulz WA，Burchardt M，Cronauer MV.Molecular biology of prostate cancer〔J〕.Mol Hum Reprod，2003;9(8):437-48.

2 Getzenberg RH，Light BW，Lapco PE，et al.Vitamin D inhibition of prostate adenocarcinoma growth and metastasis in the Dunning rat prostate model system〔J〕.Urology，1997;50(6):999-1006.

3 Furuya Y，Akakura K，Masai M，et al.Vitamin D receptor gene polymorphism in Japanese patients with prostate cancer〔J〕.Endocr J，1999;46(3):467-70.

4 Habuchi T，Suzuki T，Sasaki R，et al.Association of vitamin D receptor gene polymorphism with prostate cancer and benign prostatic hyperplasia in a Japanese population〔J〕.Cancer Res，2000;60(2):305-8.

5 劉建河，李鴻偉，佟 明，等.北方漢族人群易感基因多態性與前列腺癌危險關系及對發病種族差異的分析〔J〕.中華醫學雜志，2004;84(5):364-8.

6 Huang SP，Chou YH，Wayne CW，et al.Association between vitamin D receptor polymorphisms and prostate cancer risk in a Taiwanese population〔J〕.Cancer Lett，2004;207(1):69-77.

7 Chaimuangraj S，Thammachoti R，Ongphiphadhanakul B，et al.Lack of association of VDR polymorphisms with Thai prostate cancer as compared with benign prostate hyperplasia and controls〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev，2006;7(1):136-9.

8 Onsory K，Sobti RC，Al-Badran AI，et al.Hormone receptor-related gene polymorphisms and prostate cancer risk in North Indian population〔J〕.Mol Cell Biochem，2008;314(1-2):25-35.

9 Bai Y，Yu Y，Yu B，et al.Association of vitamin D receptor polymorphisms with the risk of prostate cancer in the Han population of Southern China〔J〕.BMC Med Genet，2009;10(1):125.

10 Schwartz GG，Hulka BS.Is vitamin D deficiency a risk factor for prostate cancer(Hypothesis)〔J〕?Anticancer Res，1990;10(5A):1307-11.

11 Gross C，Stamey T，Hancock S，et al.Treatment of early recurrent prostate cancer with 1，25-dihydroxyvitamin D3(calcitriol)〔J〕.J Urol，1998;159(6):2035-40.

12 Haussler MR，Whitfield GK，Haussler CA，et al.The nuclear vitamin D receptor:biological and molecular regulatory properties revealed〔J〕.J Bone Miner Res，1998;13(3):325-49.

13 Uitterlinden AG，Fang Y，Van Meurs JB，et al.Genetics and biology of vitamin D receptor polymorphisms〔J〕.Gene，2004;338(2):143-56.

14 Alagarasu K，Selvaraj P，Swaminathan S，et al.5'regulatory and 3'untranslated region polymorphisms of vitamin D receptor gene in south Indian HIV and HIV-TB patients〔J〕.J Clin Immunol，2009;29(2):196-204.

15 Taylor JA，Hirvonen A，Watson M，et al.Association of prostate cancer with vitamin D receptor gene polymorphism〔J〕.Cancer Res，1996;56(18):4108-10.

16 Andersson P，Varenhorst E，Soderkvist P.Androgen receptor and vitamin D receptor gene polymorphisms and prostate cancer risk〔J〕.Eur J Cancer，2006;42(16):2833-7.

17 Bonilla C，Hooker S，Mason T，et al.Prostate cancer susceptibility Loci identified on chromosome 12 in African Americans〔J〕.PLoS One，2011;6(2):e16044.