自制外傷藥乳膏鎮痛抗炎作用試驗

劉 鑫，劉萬平

（商丘職業技術學院動物工程系，河南 商丘476000）

自制外傷藥乳膏由蜂蜜、大黃、延胡索、青木香、紅花、旋覆花、乳香、沒藥等十幾味中藥組方制備而成，系我院中獸醫教研室劉萬平教授自制制劑，經多年的臨床使用證實，具有活血化瘀、瘀去生新、復通血脈、行氣止痛之功效。本試驗采用熱板法和醋酸扭體法觀察鎮痛作用；采用大鼠足腫脹模型及小鼠耳廓腫脹模型觀察抗炎作用。

1 材料與儀器

1．1 實驗動物 Wistar種大鼠、昆明系小鼠，均來源于商丘市醫學高等專科學校實驗動物中心，試驗前適應性喂養7d。

1．2 藥物與試劑 6%、12%、18%外傷藥乳膏（每100g制劑含原藥量分別為6g、12g、18g），由商丘職業技術學院中獸醫教研室提供。氟芬那酸丁酯軟膏，由沈陽抗生素廠生產（lot10010013）。其他試劑均為分析純。

1．3 儀器 BS110S電子天平（Sartorius公司生產），數控恒溫浴鍋Ⅱ（寧波東勝儀器科技有限公司生產）。

2 方法與結果

2．1 鎮痛作用試驗

2．1．1 自制外傷藥乳膏對冰醋酸所致小鼠疼痛的影響 取體重18～22g健康小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組，每組10只。設空白組，外傷藥乳膏分大、中、小劑量組，對照組（氟芬那酸丁酯軟膏）。用藥前1d，先用8%硫化鈉脫掉小鼠腹部長的毛，以備第2天試驗用。試驗當日，在各小鼠腹部分別涂藥，連續給藥7d，于末次給藥30min后，每鼠腹腔注射0．3%醋酸0．2mL，詳細記錄各鼠出現每一次扭體反應的時間及20min內小鼠的扭體次數，結果見表1。外傷藥乳膏能顯著延長小鼠鎮痛潛伏期，動物扭體次數隨外傷藥乳膏濃度的增高而降低，且中、大劑量組分別與對照組和鎮痛強度相當，具有較好的鎮痛作用。

2．1．2 外傷藥乳膏對小鼠熱板法致痛的影響 取體重18～22g雌性小鼠，于室溫22℃放入在恒溫水浴鍋預熱到55℃±1℃的500mL燒杯中，1只／次，用秒表記錄小鼠自投入熱板至出現舔后足的時間（s）作為該鼠的痛閾值，如此測定2次，間隔30min，取均值為給藥前痛閾值。篩選出痛閾小于30s的小鼠為試驗所用。以給藥前痛閾值隨機分為3組：第1組為外傷藥乳膏組（中劑量），將外傷藥乳膏按1g／cm2的劑量涂在燒杯底部的基質上（第2組、第3組按同樣劑量分別涂氟芬那酸丁酯軟膏和賦形劑），把小鼠放在藥膏上，讓四肢充分與藥膏接觸。第2組為氟芬那酸丁酯軟膏組，第3組為賦形劑，后兩組的處理方法均同第1組。3組小鼠接觸藥物后30、60、90min再分別測定其痛閾值，每次測定完后均將小鼠放在藥膏上。結果見表2。表明小鼠足部接觸外傷藥乳膏60min后可明顯延長痛閾值。而在60 min前作用不明顯，氟芬那酸丁酯軟膏組也是在60 min后出現鎮痛作用，兩藥作用基本相同。該試驗表明，外傷藥乳膏外用具有一定的鎮痛作用。

表1 外傷藥乳膏對醋酸致小鼠疼痛的影響（±S）

表1 外傷藥乳膏對醋酸致小鼠疼痛的影響（±S）

注：與空白組比較，＊：P＜0．05；＊＊：P＜0．01

組別 劑量（g）第1次扭體反應時間（min） 扭體次數空白組0．5 5．2±4．1 38．14±11．25小劑量組 0．5 8．6±2．3＊ 25．11±14．26＊中劑量組 0．5 8．3±2．1＊ 15．30±11．96＊＊大劑量組 0．5 6．5±2．8 14．70±10．17＊＊對照組 0．5 7．7±3．3 14．98±10．34＊＊

2．2 抗炎作用試驗

2．2．1 自制動物外傷藥乳膏對蛋清致炎大鼠足趾腫脹的影響 取大鼠50只，雌雄各半，按體重隨機分為空白組、外傷藥乳膏大劑量組、中劑量組、小劑量組、對照組（氟芬那酸丁酯軟膏）共5組，每組10只。試驗當日首先用自制容積測定裝置測定各組大鼠右后足正常體積（mL），然后給各組動物分別涂藥物于右后足，均給藥0．3g。30min后，于右后足皮下注射100%新鮮雞蛋清0．1mL／只，測定注射蛋清30、60、90min的右后足體積，連續3次。結果見表3。外傷藥乳膏大劑量組和陽性對照組的足腫脹程度與空白對照組比較差異顯著，說明其對蛋清引起的大鼠足腫脹程度有抑制作用。

2．2．2 自制動物外傷藥乳膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 取體重25g～30g雄性小鼠50只，按體重隨機分為空白組、藥乳膏大、中、小劑量及對照組（氟芬那酸丁酯軟膏），每組10只，面積3cm×1cm左右，45min后各組以蒸餾水棉球擦去藥液，用于棉球擦凈，給小鼠右耳兩面涂二甲苯0．05mL／只，致腫，左耳作對照。30min后將小鼠脫頸處死，用8 mm直徑打孔器在每只動物雙耳相同部位打下圓耳片，置于電子分析天平上稱重，以左右耳片重之差為腫脹度求出腫脹抑制率。結果見表4。外傷藥乳膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹具有明顯的抑制作用。

表2 外傷藥乳膏對小鼠熱板致痛的影響 （±S）

表2 外傷藥乳膏對小鼠熱板致痛的影響 （±S）

注：與賦形劑組比較，＊：P＜0．05，n＝6

組別 劑量g／（cm2） 給藥前痛閾值t／s給藥后不同時間痛閾值（t／s）30min 60min 90min賦形劑 1 16．82±4．39 18．18±5．40 17．71±5．12 17．30±5．61外傷藥乳膏中劑量 1 17．77±3．95 23．03±5．82 24．03±6．34＊ 25．75±7．43＊氟芬那酸丁酯軟膏 1 16．63±4．55 21．89±4．38 23．05±5．41＊ 2 416．00±5．76＊

表3 外傷藥乳膏對蛋清致大鼠足趾腫脹的影響 （±S）

表3 外傷藥乳膏對蛋清致大鼠足趾腫脹的影響 （±S）

注：與空白組比較，＊：P＜0．05，n＝10。下表同

組別不同時間右足容積v／（mL）致炎前30min 60min 90min空白組2．16±0．56 3．79±0．88 4．61±1．06 4．56±1．19小劑量組 2．01±0．67 3．22±0．63 4．20±0．67 4．18±0．53中劑量組 2．12±0．45 3．16±0．51 3．68±0．46＊ 3．71±0．44＊大劑量組 2．05±0．75 3．14±0．69 3．16±0．60＊ 3．54±0．87＊對照組2．10±0．80 3．14±0．98 3．78±1．05 3．84±0．94

表4 外傷藥乳膏對二甲苯所致小鼠耳部腫脹的影響（±S）

表4 外傷藥乳膏對二甲苯所致小鼠耳部腫脹的影響（±S）

組別 腫脹度m（mg） 腫脹度抑制率（%）空白組3．68±0．99 －小劑量組 2．66±0．86＊ 27．72中劑量組 2．35±0．64＊ 36．14大劑量組 2．27±0．65＊ 38．32對照組 2．30±0．81＊37．50

3 小結

通過藥理試驗表明，自制動物外傷藥乳膏對二甲苯所致耳廓腫脹、蛋清致大鼠后足、醋酸誘發的小鼠扭體及熱板法致痛試驗具有抗炎、鎮痛作用，這與外傷藥乳膏里中藥解毒、消腫、活血、止痛、散瘀、瀉火、行水功效是一致的。本試驗為外傷藥乳膏的臨床應用及進一步研究提供了可靠依據。

［1］ 江蘇新醫學院．中藥大辭典［M］．1977：7．

［2］ 于船．中獸醫學［M］．北京：農業出版社，1979：7．

［3］ 陳奇．中藥藥理研究方法學［M］．北京：人民衛生出版社，1993：356．

［4］ 連其深．花椒毒酚抗炎作用的實驗研究［J］．中藥，1998，29（2）：102．

［5］ 馮年平．中藥提取分離技術原理與應用［M］．北京：中國醫藥科技出版社，2004：10．

［6］ 盧曉江．中藥提取工藝與設備［M］．北京：化工出版社，2004：10．