非小細胞肺癌患者血清TNF-α水平變化及其臨床意義

郭宇玲，孫 哲，吳 薇

（南昌大學第一附屬醫院腫瘤科，南昌 330006）

肺癌是我國常見的惡性腫瘤之一，嚴重危害人類健康，目前研究認為肺癌的形成是一個多階段、多步驟、多基因參與的過程，腫瘤壞死因子-α（TNF-α）在惡性腫瘤的發生、發展過程中起重要作用，TNF-α可直接殺傷腫瘤細胞、誘導細胞凋亡、介導腫瘤溶解，刺激細胞增殖、促進腫瘤血管生成、激活基質降解酶，有利于腫瘤浸潤和轉移、增強腫瘤細胞的活性，具有廣泛的誘導炎癥和免疫調節功能。腫瘤細胞可激活單核細胞且腫瘤細胞具有自分泌功能從而使惡性腫瘤患者血清TNF-α升高［1-2］。本研究采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附（ELISA）法測定不同分期非小細胞肺癌患者血清中TNF-α的水平，探討不同分期非小細胞肺癌患者血清中TNF-α水平的變化及其臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2008—2009年南昌大學第一附屬醫院收治的初治非小細胞肺癌患者60例（肺癌組），男48例，女 12 例，年齡 38～82 歲，平均（59.2±13.2）歲，均經影像學及病理學確診，未行放化療及手術治療，其中鱗癌38例、腺癌22例，Ⅰ＋Ⅱ期 14例、Ⅲa期17例、Ⅲb＋Ⅳ期 29例。選擇同期在本院體檢健康者62例為對照組，男45例，女17例，年齡32～70歲，平均（56.5±9.6）歲，X 線檢查排外肺部疾病。2組一般資料相比差異無統計學意義（P＞0.05），具可比性。

1.2 主要試劑與儀器

人TNF-αELISA試劑盒（北京晶美生物工程有限公司）；JA1003電子天平（上海精科天平廠）、電熱恒溫干燥箱（上海躍進醫療器械廠）、超低溫冰箱（Sanyo，Japan）等。

1.3 研究方法

1）標本采集:受試者均于清晨、空腹時采集外周靜脈血標本2 mL。

2）標本處理:靜脈血自然凝固后，分離血清，-70℃保存待測。

3）ELISA法測定血清TNF-α水平:將試劑盒與標本平衡至室溫→配置洗滌液、標準品、生物素化抗體工作液、酶結合物工作液→取出板條、加樣、孵育→洗板5次→加入生物素化抗體工作液、孵育→洗板5次→加入酶結合物工作液、孵育→洗板5次→加入顯色劑→加入終止液，混勻后即刻測量OD450值→繪制標準曲線，并通過標本的OD值在標準曲線上查出濃度。

1.4 統計學方法

2 結果

2組血清TNF-α水平比較見表1，表1結果顯示:肺癌組患者血清中TNF-α水平顯著升高,與對照組相比差異有統計學意義（P＜0.001）。不同病理類型肺癌患者血清TNF-α水平比較見表2，表2結果顯示:不同病理類型肺癌患者血清TNF-α水平差異不明顯，腺癌與鱗癌相比差異無統計學意義（P＞0.05）。不同臨床分期肺癌患者血清 TNF－α水平比較見表3，表3結果顯示:隨著病情進展,肺癌患者血清TNF－α水平有逐漸增高的趨勢，各臨床分期肺癌患者血清 TNF－α水平相比差異均有統計學意義（P＜0.05 或 P＜0.001)。

表1 2組血清TNF－α水平比較 ，ρ／（ng·L-1）

表1 2組血清TNF－α水平比較 ，ρ／（ng·L-1）

*P＜0.001與對照組相比。

組別 n TNF－α 水平對照組 62 75.39±35.45肺癌組 60 242.21±116.97*

表2 不同病理類型肺癌患者血清TNF－α水平比較 ，ρ／（ng·L-1）

表2 不同病理類型肺癌患者血清TNF－α水平比較 ，ρ／（ng·L-1）

病理類型 n TNF－α水平腺癌 22 266.11±130.00鱗癌 38 228.49±109.61

表3 不同臨床分期肺癌患者血清TNF－α水平比較 ，ρ／（ng·L-1）

表3 不同臨床分期肺癌患者血清TNF－α水平比較 ，ρ／（ng·L-1）

*P＜0.001與Ⅰ＋Ⅱ 期相比；﹟P＜0.05與Ⅲa期相比。

臨床分期 n TNF－α水平Ⅰ＋Ⅱ 期 14 125.48±48.92Ⅲa期 17 236.84±89.05*Ⅲb ＋Ⅳ期 29 308.08±116.80*﹟

3 討論

TNF-α是迄今發現抗腫瘤作用最強的細胞因子。TNF-α生物學作用與其水平的關系密切，低水平TNF-α可增強機體免疫力，TNF-α水平升高可致免疫力降低，內穩態失衡，并引起一系列病理損傷［3-4］。TNF-α水平與惡性腫瘤有相關性，正常情況下人體分泌少量TNF-α；當機體患惡性腫瘤時，血清TNF-α水平明顯升高，而腫瘤得到有效控制后TNF-α水平則呈下降趨勢；TNF-α高表達與某些腫瘤晚期惡病質有關；TNF-α表達水平的高低與某些惡性腫瘤臨床分期及某些腫瘤細胞分化程度有關［5-7］。

本研究結果顯示，肺癌患者血清TNF-α水平明顯高于對照組，且隨分期發展，其水平逐漸升高，這表明，血清TNF-α水平檢測對肺癌的輔助診斷、疾病分期及活動情況有重要意義；不同病理類型間相比，血清 TNF-α 水平無明顯差異，這與文獻［7］報道一致。肺癌患者體內高水平的TNF-α并沒有表現出抑制或殺滅腫瘤的效應,這可能與TNF-α影響機體免疫力、促進腫瘤血管生成及腫瘤轉移有關；另一個可能的原因是腫瘤細胞表面缺乏與TNF-α相結合的TNF受體。

［1］Bastürk B,Yavascaoglu I,Vuruskan H,et al.Cytokine gene polymorphism as potential risk and protective factors in renal cell carcinoma［J］.Cytokine，2005,30（1）:41-45.

［2］余壽益，田華琴，黃志慶.肺癌患者血清sIL-2R、IL-6和TNF-α 水平的測定及其臨床意義［J］.癌癥，2000，19（10）:945.

［3］Locksley R M,Killeen N,Lenardo M J.The TNF receptor superfamilies［J］.Cell，2001,104（4）:487-501.

［4］王俊杰，李忠鋼，楊建良，等.腫瘤患者血清TNF-α變化的臨床意義［J］.中國腫瘤臨床與康復，1999，6（3）:15.

［5］Seynhaeve A L，de Wilh J H，van Tiel S T，et al.Isolated limb perfusion with actinomycin D and THF-alpha results in improved tumor reponse in soft tissue sarcomabearing rats but is accompanied by sever local toxicity［J］.Br J Cancer，2002，86（7）:1174-1179.

［6］李剛，李珊珊，郝樹凡，等.白細胞介素-6及腫瘤壞死因子在食道癌組織表達和預后的關系［J］.中國腫瘤臨床與康復，1998，5（6）:27-28.

［7］呂俊杰，戴天陽，詹福生，等.食管癌患者血清 CEA和TNF-α 的水平和意義［J］. 放射免疫學雜志，2004，17（5）:350-351.